| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词(中英文对照表) | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-34页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-34页 |
| 前言 | 第15页 |
| 1.1 应用转基因技术改良家畜生产性状的国际研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2 国内转基因动物的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 转基因动物的制备方法 | 第19-24页 |
| 1.3.1 显微注射法 | 第19-20页 |
| 1.3.2 嵌合体法 | 第20页 |
| 1.3.3 精子载体法 | 第20-21页 |
| 1.3.4 体细胞核移植(克隆)技术 | 第21-23页 |
| 1.3.5 RNA干扰技术 | 第23-24页 |
| 1.4 转基因动物在医药方面的应用 | 第24-27页 |
| 1.4.1 人类疾病模型方面的运用 | 第24-25页 |
| 1.4.2 生产动物器官用于人体移植 | 第25-26页 |
| 1.4.3 转基因动物在农业领域的应用 | 第26-27页 |
| 1.5 基因编辑技术 | 第27-29页 |
| 1.6 foxo3a基因研究进展 | 第29-31页 |
| 1.7 ALK6基因研究进展 | 第31-34页 |
| 第二部 分试验部分 | 第34-72页 |
| 第二章 TALEN介导的foxo3a基因敲除小鼠的表型研究 | 第35-61页 |
| 1 实验材料与方法 | 第36-43页 |
| 1.1 实验材料 | 第36页 |
| 1.2 主要仪器 | 第36-37页 |
| 1.3 实验方法 | 第37-43页 |
| 1.3.1 TALEN位点和引物设计 | 第37-38页 |
| 1.3.2 foxo3a敲除小鼠的制备与PCR鉴定 | 第38-41页 |
| 1.3.3 foxo3a基因在不同基因型小鼠卵巢和睾丸组织的表达模式研究 | 第41-42页 |
| 1.3.4 阳性小鼠卵巢组织切片的制作与HE染色观察 | 第42-43页 |
| 2 实验结果 | 第43-58页 |
| 2.1 foxo3a~(-/+)小鼠foxo3a~(-/-)和的鉴定 | 第43-46页 |
| 2.1.1 普通PCR结果 | 第43-44页 |
| 2.1.2 PCR产物T7E1酶切和PSTI酶切结果 | 第44-46页 |
| 2.2 TALEN介导的foxo3a敲除小鼠后代阳性率的统计 | 第46-54页 |
| 2.2.1 TALEN介导的foxo3a~(-/+)+foxo3a~(-/+)后代阳性鉴定及阳性率统计 | 第46-50页 |
| 2.2.2 TALEN介导的foxo3a~(-/+)+foxo3a~(+/+)后代阳性鉴定及阳性率统计 | 第50-52页 |
| 2.2.3 foxo3a基因敲除小鼠后代产仔数的统计 | 第52-53页 |
| 2.2.4 不同周龄敲除小鼠产仔数变化分析 | 第53-54页 |
| 2.3 foxo3a基因在敲除小鼠和野生型体内的表达异同 | 第54-57页 |
| 2.3.1 foxo3a基因在野生型小鼠各组织的表达模式的建立 | 第54-55页 |
| 2.3.2 foxo3a~(-/+)小鼠卵巢和睾丸中foxo3a基因表达模式 | 第55-56页 |
| 2.3.3 foxo3a~(-/-)小鼠卵巢和睾丸foxo3a基因表达模式 | 第56-57页 |
| 2.4 不同基因型小鼠卵巢切片HE染色结果 | 第57-58页 |
| 3 分析与讨论 | 第58-60页 |
| 4 结论 | 第60-61页 |
| 第三章 水牛源ALK6点突变小鼠的表型研究 | 第61-72页 |
| 1 材料与方法 | 第62-65页 |
| 1.1 材料 | 第62-63页 |
| 1.2 方法 | 第63-65页 |
| 1.2.1 生物信息学分析 | 第63页 |
| 1.2.2 引物设计 | 第63-64页 |
| 1.2.3 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第64页 |
| 1.2.4 QRT-PCR反应 | 第64-65页 |
| 2 结果 | 第65-70页 |
| 2.1 水牛和小鼠ALK6基因蛋白序列一级结构生物信息学分析 | 第65-66页 |
| 2.2 水牛和小鼠ALK6基因蛋白序列高级结构生物信息学分析 | 第66-67页 |
| 2.3 水牛源ALK6点突变转基因小鼠及野生型小鼠生仔数统计分析 | 第67页 |
| 2.4 ALK6在转基因小鼠和野生型体内的表达异同 | 第67-70页 |
| 3 分析与讨论 | 第70-71页 |
| 4 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-86页 |
| 致谢 | 第86-89页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第89页 |
