| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 本论文的主要创新点 | 第12-13页 |
| 第一章 绪言 | 第13-34页 |
| 1.1 细胞表面的聚糖 | 第14-15页 |
| 1.1.1 糖复合物 | 第14页 |
| 1.1.2 聚糖的结构 | 第14-15页 |
| 1.1.3 聚糖的功能 | 第15页 |
| 1.2 细胞表面聚糖的识别与检测 | 第15-20页 |
| 1.2.1 凝集素识别 | 第16-17页 |
| 1.2.2 基于分子改造的化学共价识别 | 第17-18页 |
| 1.2.3 糖代谢标记技术 | 第18-19页 |
| 1.2.4 直接化学共价识别 | 第19-20页 |
| 1.3 特定糖蛋白上单糖的成像分析 | 第20-24页 |
| 1.3.1 细胞表面特定糖蛋白上糖成像 | 第21-23页 |
| 1.3.2 细胞内特定糖蛋白上糖成像 | 第23-24页 |
| 1.4 上转换纳米粒子及其在生物检测中的应用 | 第24-25页 |
| 1.5 黏蛋白MUC1及其家族 | 第25-29页 |
| 1.5.1 黏蛋白的功能 | 第25-26页 |
| 1.5.2 黏蛋白家族的序列和结构 | 第26-27页 |
| 1.5.3 黏蛋白MUC1 | 第27-29页 |
| 1.6 选题意义及研究内容 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-34页 |
| 第二章 单激发-双通道成像策略用于细胞表面特定糖蛋白上糖型的分析 | 第34-65页 |
| 2.1 引言 | 第34-36页 |
| 2.2 实验部分 | 第36-43页 |
| 2.2.1 材料和试剂 | 第36-37页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第37页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第37-38页 |
| 2.2.4 核壳结构的上转换纳米粒子NaYF_4：Er/Gd/Yb@NaGdF_4的合成 | 第38页 |
| 2.2.5 合成Oleate-free UNP | 第38-39页 |
| 2.2.6 合成A30-COOH修饰的UNP(A30-UNP) | 第39页 |
| 2.2.7 合成和核酸适配体功能化的UNP(Apt-UNP) | 第39页 |
| 2.2.8 细胞免疫分析实验 | 第39-40页 |
| 2.2.9 流式细胞分析验证核酸适配体特异性 | 第40页 |
| 2.2.10 共聚焦显微成像分析验证核酸适配体特异性 | 第40页 |
| 2.2.11 UNP表面Apt的装载量 | 第40-41页 |
| 2.2.12 扫描电镜及透射电镜表征Apt-UNP在细胞表面特定位点上的识别 | 第41页 |
| 2.2.13 体外双通道能量共振转移(D-LRET)实验 | 第41页 |
| 2.2.14 MUC1上盐藻糖的成像及正交标记 | 第41-42页 |
| 2.2.15 双通道成像及数据分析 | 第42-43页 |
| 2.2.16 衣霉素处理阻碍N-型糖的糖基化 | 第43页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第43-62页 |
| 2.3.1 方案设计 | 第43-44页 |
| 2.3.2 UNP的功能化及表征 | 第44-45页 |
| 2.3.2.1 TEM表征 | 第44-45页 |
| 2.3.2.2 其它表征方法 | 第45页 |
| 2.3.3 免疫荧光法证明细胞表面MUC1的表达 | 第45-46页 |
| 2.3.4 核酸适配体S2.2的特异性验证 | 第46-47页 |
| 2.3.4.1 流式细胞法 | 第46-47页 |
| 2.3.4.2 激光共聚焦显微成像法 | 第47页 |
| 2.3.5 Apt-UNP与MUC1~+细胞的特异性结合 | 第47-48页 |
| 2.3.6 电镜实验表征Apt-UNP在细胞表面的分布 | 第48-49页 |
| 2.3.6.1 SEM实验 | 第48-49页 |
| 2.3.6.2 基于TEM的共定位实验 | 第49页 |
| 2.3.7 D-LRET体系中能量受体的选择 | 第49-50页 |
| 2.3.8 体外实验验证D-LRET | 第50-51页 |
| 2.3.9 体外实验排除两组LRET间的相互干扰 | 第51-52页 |
| 2.3.9.1 荧光激发实验 | 第51-52页 |
| 2.3.9.2 LRET1与LRET2信号间的相互影响 | 第52页 |
| 2.3.10 体外实验验证LRET信号强度与能量受体浓度的关系 | 第52-53页 |
| 2.3.11 基于单LRET的MUC1上岩藻糖的成像 | 第53-54页 |
| 2.3.12 代谢时间的优化 | 第54-55页 |
| 2.3.13 基于D-LRET的MUC1上的双糖成像 | 第55-56页 |
| 2.3.14 细胞表面D-LRET的验证 | 第56-57页 |
| 2.3.15 终端糖岩藻糖和唾液酸的相对表达量分析 | 第57-60页 |
| 2.3.15.1 糖内标成像 | 第57-59页 |
| 2.3.15.2 D-LRET成像成像数据分析 | 第59-60页 |
| 2.3.16 蛋白分子内D-LRET的验证 | 第60-61页 |
| 2.3.17 D-LRET效率 | 第61页 |
| 2.3.18 药物处理下岩藻糖/唾液酸的动态变化 | 第61-62页 |
| 2.4 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
