符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
1 前言 | 第10-34页 |
1.1 水稻白叶枯病的发生与症状 | 第10-12页 |
1.2 稻黄单胞杆菌的形态与生理生化特性 | 第12-13页 |
1.3 水稻白叶枯病菌的侵染机制 | 第13页 |
1.4 水稻抗白叶枯病基因与水稻黄单胞杆菌致病相关基因 | 第13-15页 |
1.5 水稻黄单胞菌的主要致病因子 | 第15-21页 |
1.5.1 胞外多糖 | 第17-19页 |
1.5.2 细菌鞭毛 | 第19页 |
1.5.3 细菌毒素 | 第19-20页 |
1.5.4 hrp基因 | 第20-21页 |
1.6 蛋白效应因子 | 第21-26页 |
1.6.1 细菌蛋白分泌系统 | 第21-22页 |
1.6.2 效应因子 | 第22-26页 |
1.7 植物内源激素 | 第26-27页 |
1.8 细菌IAA合成途径 | 第27-30页 |
1.8.1 IAM途径 | 第28页 |
1.8.2 IPyA途径 | 第28-29页 |
1.8.3 TAM途径与TSO途径 | 第29页 |
1.8.4 IAN途径 | 第29-30页 |
1.9 双向电泳技术在蛋白组学中的应用 | 第30-33页 |
1.9.1 蛋白组学 | 第30页 |
1.9.2 双向电泳技术原理 | 第30-31页 |
1.9.3 双向电泳技术的特点与发展前景 | 第31-32页 |
1.9.4 双向电泳技术的应用 | 第32-33页 |
1.10 研究的目的和意义 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-44页 |
2.1 菌株与质粒 | 第34-35页 |
2.2 植物材料 | 第35-36页 |
2.3 引物设计与合成 | 第36页 |
2.4 仪器与试剂 | 第36页 |
2.5 在寄主水稻上的致病性测定 | 第36-37页 |
2.6 水稻白叶枯病菌PXO99A基因组DNA的提取 | 第37页 |
2.7 大肠杆菌菌株BL21电转化感受态细胞的制备 | 第37页 |
2.8 构建含pxo_04823的大肠杆菌菌株 | 第37-38页 |
2.8.1 pxo_04823的T载体构建 | 第37-38页 |
2.8.2 热激转化质粒扩增 | 第38页 |
2.8.3 重组质粒电转 | 第38页 |
2.9 pxo_04823的原核表达与蛋白纯化 | 第38-39页 |
2.9.1 pxo_04823的原核表达 | 第38-39页 |
2.9.2 目的蛋白电泳鉴定 | 第39页 |
2.9.3 蛋白分离与纯化 | 第39页 |
2.10 pxo_04823目的蛋白酶活测定 | 第39-40页 |
2.11 构建含pxo_00867的大肠杆菌菌株 | 第40-41页 |
2.11.1 pxo_04867的T载体构建 | 第40页 |
2.11.2 热激转化质粒扩增 | 第40页 |
2.11.3 重组质粒电转 | 第40-41页 |
2.12 pxo_00867的原核表达与蛋白纯化 | 第41页 |
2.13 pxo_00867目的蛋白的酶活测定 | 第41页 |
2.14 用双向电泳的方法检测各菌株的分泌蛋白 | 第41-44页 |
2.14.1 菌株分泌蛋白提取 | 第41-42页 |
2.14.2 双向电泳 | 第42-44页 |
3 结果与分析 | 第44-54页 |
3.1 突变菌株致病性检测 | 第44-46页 |
3.2 含pxo_04823、pxo_00867的大肠杆菌菌株的构建 | 第46-47页 |
3.3 重组菌株Pxo-23和Pxo-67表达蛋白的电泳鉴定 | 第47-49页 |
3.4 pxo_04823、pxo_00867产物的活性测定 | 第49-51页 |
3.5 各菌株分泌蛋白的差异检测 | 第51-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
4.1 IAA合成基因突变菌株致病力提高 | 第55页 |
4.2 稻黄单胞杆菌中存在至少一条IAA负调控相关致病因子途径 | 第55-56页 |
4.3 IAA调控稻黄单胞杆菌致病因子新途径 | 第56页 |
5 结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-73页 |
附录 | 第73-76页 |
致谢 | 第76页 |