| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略表 | 第12-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-26页 |
| 1.1 Procaspase-8与DISC信号通路 | 第16-18页 |
| 1.2 以TRAIL为激动剂的抗肿瘤靶向的药物筛选 | 第18-19页 |
| 1.3 受体效应复合物荧光成像技术(REFI) | 第19页 |
| 1.4 U2OS-Prc8DED1-GFP的构建机制 | 第19-20页 |
| 1.5 新的基因编辑技术--CRISPR/Cas9 | 第20-22页 |
| 1.6 CRISPR/Cas9的应用前景 | 第22页 |
| 1.7 研究目的 | 第22-23页 |
| 1.8 研究路线 | 第23-26页 |
| 1.8.1 细胞系U2OS-Prc8DED1-GFP鉴定方法 | 第23页 |
| 1.8.2 优化筛选细胞系U20S-Prc8DED1-GFP | 第23-26页 |
| 第二章 U2OS-Prc8DED1-GFP细胞系的验证 | 第26-58页 |
| 2.1 实验材料及试剂配制 | 第27-38页 |
| 2.1.1 载体、菌种及细胞 | 第27-28页 |
| 2.1.2 实验仪器和耗材 | 第28-30页 |
| 2.1.3 实验试剂和药品 | 第30-32页 |
| 2.1.4 实验试剂的准备 | 第32-38页 |
| 2.2 实验内容与结果 | 第38-58页 |
| 2.2.1 细胞实验 | 第38-42页 |
| 2.2.2 高内涵显微镜下拍摄观察 | 第42-45页 |
| 2.2.3 图片结果分析 | 第45-48页 |
| 2.2.4 查找影响因素,优化细胞系U2OS-Prc8DED1-GFP | 第48-56页 |
| 2.2.5 分析讨论 | 第56-58页 |
| 第三章 内源性Procaspase-8的敲除 | 第58-92页 |
| 3.1 实验思路及流程 | 第59-60页 |
| 3.2 实验材料 | 第60页 |
| 3.2.1 载体、菌种及细胞 | 第60页 |
| 3.2.2 实验仪器和耗材 | 第60页 |
| 3.2.3 实验试剂及药品 | 第60页 |
| 3.2.4 实验试剂配制 | 第60页 |
| 3.3 实验内容及结果分析 | 第60-92页 |
| 3.3.1 质粒构建 | 第60-86页 |
| 3.3.2 细胞转染 | 第86-90页 |
| 3.3.3 单克隆细胞筛选 | 第90-91页 |
| 3.3.4 药物验证 | 第91-92页 |
| 第四章 讨论与总结 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第107页 |
