中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 鸭群中主要的病毒病 | 第12-21页 |
1.1.1 鸭坦布苏病毒 | 第12-14页 |
1.1.1.1 病原学 | 第12-13页 |
1.1.1.2 流行病学 | 第13-14页 |
1.1.2 鸭源新型鹅细小病毒 | 第14-15页 |
1.1.2.1 病原学 | 第14-15页 |
1.1.2.2 流行病学 | 第15页 |
1.1.3 H9N2亚型禽流感病毒 | 第15-17页 |
1.1.3.1 病原学 | 第15-16页 |
1.1.3.2 流行病学 | 第16-17页 |
1.1.4 血清4型Ⅰ群禽腺病毒 | 第17-19页 |
1.1.4.1 病原学 | 第17-18页 |
1.1.4.2 流行病学 | 第18-19页 |
1.1.5 新型鸭源呼肠孤病毒 | 第19-21页 |
1.1.5.1 病原学 | 第19-20页 |
1.1.5.2 流行病学 | 第20-21页 |
1.2 病毒常见的检测方法 | 第21-23页 |
1.2.1 免疫学诊断 | 第21页 |
1.2.1.1 血清中和试验 | 第21页 |
1.2.1.2 酶联免疫吸附试验 | 第21页 |
1.2.1.3 乳胶凝集试验 | 第21页 |
1.2.2 分子生物学诊断 | 第21-23页 |
1.2.2.1 PCR检测方法 | 第21-22页 |
1.2.2.2 地高辛标记探针 | 第22页 |
1.2.2.3 环介导等温扩增法 | 第22-23页 |
1.3 研究的目的和意义 | 第23页 |
2 材料与方法 | 第23-29页 |
2.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.1 病料与鸭胚 | 第23页 |
2.1.2 仪器 | 第23页 |
2.1.3 试剂 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-29页 |
2.2.1 病毒的分离和纯化 | 第24页 |
2.2.2 目的基因的扩增 | 第24-27页 |
2.2.2.1 引物设计与合成 | 第24-25页 |
2.2.2.2 病毒总RNA的提取 | 第25页 |
2.2.2.3 病毒DNA的提取 | 第25-26页 |
2.2.2.4 RNA的RT扩增 | 第26页 |
2.2.2.5 目的基因的PCR扩增 | 第26-27页 |
2.2.3 目的片段的纯化及测序 | 第27-29页 |
2.2.3.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
2.2.3.2 目的片段的纯化 | 第27页 |
2.2.3.3 连接 | 第27页 |
2.2.3.4 用CaCl_2制备大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第27-28页 |
2.2.3.5 连接产物转化至感受态细胞 | 第28页 |
2.2.3.6 质粒DNA的提取及测序 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-35页 |
3.1 死亡鸭胚剖检变化 | 第29页 |
3.2 病毒的分离与鉴定 | 第29-34页 |
3.2.1 PCR检测结果 | 第29-30页 |
3.2.2 序列分析 | 第30-34页 |
3.2.2.1 坦布苏病毒E基因遗传进化分析 | 第30-31页 |
3.2.2.2 新型鹅细小病毒VP3基因遗传进化分析 | 第31-32页 |
3.2.2.3 H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传进化分析 | 第32-33页 |
3.2.2.4 血清4型Ⅰ群禽腺病毒Hexon基因遗传进化分析 | 第33页 |
3.2.2.5 新型鸭呼肠孤病毒σC基因遗传进化分析 | 第33-34页 |
3.3 五种病毒感染统计结果 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
5 结论 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第49-50页 |
附录 | 第50-52页 |