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死亡鸭胚中常见病毒的分离鉴定及序列分析

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-23页
    1.1 鸭群中主要的病毒病第12-21页
        1.1.1 鸭坦布苏病毒第12-14页
            1.1.1.1 病原学第12-13页
            1.1.1.2 流行病学第13-14页
        1.1.2 鸭源新型鹅细小病毒第14-15页
            1.1.2.1 病原学第14-15页
            1.1.2.2 流行病学第15页
        1.1.3 H9N2亚型禽流感病毒第15-17页
            1.1.3.1 病原学第15-16页
            1.1.3.2 流行病学第16-17页
        1.1.4 血清4型Ⅰ群禽腺病毒第17-19页
            1.1.4.1 病原学第17-18页
            1.1.4.2 流行病学第18-19页
        1.1.5 新型鸭源呼肠孤病毒第19-21页
            1.1.5.1 病原学第19-20页
            1.1.5.2 流行病学第20-21页
    1.2 病毒常见的检测方法第21-23页
        1.2.1 免疫学诊断第21页
            1.2.1.1 血清中和试验第21页
            1.2.1.2 酶联免疫吸附试验第21页
            1.2.1.3 乳胶凝集试验第21页
        1.2.2 分子生物学诊断第21-23页
            1.2.2.1 PCR检测方法第21-22页
            1.2.2.2 地高辛标记探针第22页
            1.2.2.3 环介导等温扩增法第22-23页
    1.3 研究的目的和意义第23页
2 材料与方法第23-29页
    2.1 材料第23-24页
        2.1.1 病料与鸭胚第23页
        2.1.2 仪器第23页
        2.1.3 试剂第23-24页
    2.2 方法第24-29页
        2.2.1 病毒的分离和纯化第24页
        2.2.2 目的基因的扩增第24-27页
            2.2.2.1 引物设计与合成第24-25页
            2.2.2.2 病毒总RNA的提取第25页
            2.2.2.3 病毒DNA的提取第25-26页
            2.2.2.4 RNA的RT扩增第26页
            2.2.2.5 目的基因的PCR扩增第26-27页
        2.2.3 目的片段的纯化及测序第27-29页
            2.2.3.1 琼脂糖凝胶电泳第27页
            2.2.3.2 目的片段的纯化第27页
            2.2.3.3 连接第27页
            2.2.3.4 用CaCl_2制备大肠杆菌DH5α感受态细胞第27-28页
            2.2.3.5 连接产物转化至感受态细胞第28页
            2.2.3.6 质粒DNA的提取及测序第28-29页
3 结果第29-35页
    3.1 死亡鸭胚剖检变化第29页
    3.2 病毒的分离与鉴定第29-34页
        3.2.1 PCR检测结果第29-30页
        3.2.2 序列分析第30-34页
            3.2.2.1 坦布苏病毒E基因遗传进化分析第30-31页
            3.2.2.2 新型鹅细小病毒VP3基因遗传进化分析第31-32页
            3.2.2.3 H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传进化分析第32-33页
            3.2.2.4 血清4型Ⅰ群禽腺病毒Hexon基因遗传进化分析第33页
            3.2.2.5 新型鸭呼肠孤病毒σC基因遗传进化分析第33-34页
    3.3 五种病毒感染统计结果第34-35页
4 讨论第35-38页
5 结论第38-40页
参考文献第40-48页
致谢第48-49页
攻读硕士学位期间发表论文情况第49-50页
附录第50-52页

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