| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 Pyroxd2蛋白研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 线粒体结构与功能简述 | 第13页 |
| 1.3 线粒体蛋白输入机制综述 | 第13-18页 |
| 1.3.1 概论 | 第13-16页 |
| 1.3.2 信号肽通路 | 第16页 |
| 1.3.3 分子伴侣通路 | 第16-17页 |
| 1.3.4 富含半胱氨酸蛋白的膜间隙定位通路 | 第17页 |
| 1.3.5 外膜 β-筒状蛋白定位通路 | 第17页 |
| 1.3.6 外膜 α-螺旋状蛋白定位通路 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 实验细胞系 | 第18页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 实验耗材 | 第19页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.5 缓冲液配置 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-36页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第21-27页 |
| 2.2.3 Western blot | 第27-28页 |
| 2.2.4 定量PCR | 第28-30页 |
| 2.2.5 稳转细胞株的构建 | 第30页 |
| 2.2.6 细胞免疫荧光实验 | 第30-31页 |
| 2.2.7 细胞线粒体提取 | 第31-33页 |
| 2.2.8 线粒体组分分离 | 第33页 |
| 2.2.9 免疫共沉淀（CO-IP） | 第33-34页 |
| 2.2.10 Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis (BN-PAGE) | 第34-36页 |
| 3. 实验结果 | 第36-49页 |
| 3.1 Pyroxd2细胞中定位相关研究 | 第36-41页 |
| 3.1.1 Pyroxd2定位于线粒体 | 第36页 |
| 3.1.2 线粒体组分分析证实Pyroxd2存在于线粒体内膜与基质组分 | 第36-38页 |
| 3.1.3 Pyroxd2在线粒体中定位依赖于线粒体外膜通道蛋白Tom40和内膜通道蛋白Tim23，而不依赖于线粒体膜间隙定位相关蛋白Mia40 | 第38-40页 |
| 3.1.4 Pyroxd2是线粒体呼吸传递链复合物IV（complex Ⅳ）组分之一 | 第40-41页 |
| 3.2 Pyroxd2的 151-230aa多肽是介导其定位于线粒体的关键序列 | 第41-49页 |
| 3.2.1 Pyroxd2101-400aa能定位于线粒体 | 第41-43页 |
| 3.2.2 Pyroxd2蛋白中 101-200aa和 201-300aa都能介导EYFP输入线粒体 | 第43-44页 |
| 3.2.3 Pyroxd2151-230aa是介导蛋白定位于线粒体的关键序列 | 第44-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-52页 |
| 5. 参考文献 | 第52-58页 |
| 6. 附录 | 第58-59页 |
