| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 ADP葡萄糖焦磷酸化酶 | 第14-15页 |
| 1.2 颗粒淀粉合成酶 | 第15页 |
| 1.3 淀粉合成酶I | 第15-16页 |
| 1.4 淀粉合成酶II | 第16页 |
| 1.5 淀粉合成酶III | 第16-17页 |
| 1.6 淀粉合成酶IV | 第17页 |
| 1.7 淀粉分支酶 | 第17-18页 |
| 1.7.1 淀粉分支酶I | 第17页 |
| 1.7.2 淀粉分支酶II | 第17-18页 |
| 1.8 淀粉去分支酶 | 第18-19页 |
| 1.8.1 异淀粉酶 | 第18页 |
| 1.8.2 极限糊精酶 | 第18-19页 |
| 1.9 RNAi技术的原理及应用 | 第19-21页 |
| 1.9.1 RNAi技术的原理 | 第19-20页 |
| 1.9.2 RNAi技术的特点 | 第20页 |
| 1.9.3 RNAi技术在植物方面的应用 | 第20-21页 |
| 1.10 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与实验方法 | 第23-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第23页 |
| 2.1.3 实验试剂与仪器 | 第23-27页 |
| 2.1.3.1 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3.2 实验仪器 | 第24页 |
| 2.1.3.3 培养基 | 第24-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 水稻总RNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.2 cDNA第一条链的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.3 SSIII-1 和PUL靶序列的获得 | 第28-29页 |
| 2.2.3.1 PCR产物琼脂糖电泳及纯化回收 | 第29页 |
| 2.2.4 SSIII-1 和PUL正向和反向靶序列连接克隆载体 | 第29-30页 |
| 2.2.4.1 大肠杆菌（DH5α）感受态的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.4.2 靶序列连接克隆载体及转化大肠杆菌 | 第30页 |
| 2.2.4.3 连接产物转化大肠杆菌 | 第30页 |
| 2.2.5 克隆载体检测 | 第30-31页 |
| 2.2.5.1 阳性菌落PCR检测 | 第30页 |
| 2.2.5.2 克隆载体质粒的抽提 | 第30-31页 |
| 2.2.5.3 克隆载体质粒测序检测 | 第31页 |
| 2.2.6 PTCK303-S-A载体的构建及检测 | 第31-35页 |
| 2.2.6.1 正向片段（PTCK303-S）的构建 | 第32-34页 |
| 2.2.6.2 反向片段（PTCK303-S-A）的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.6.3 PTCK303-S-A终载体的检测 | 第35页 |
| 2.2.7 表达载体PTCK303-S-A转化农杆菌 | 第35-36页 |
| 2.2.7.1 农杆菌（EHA105）感受态的制备 | 第35页 |
| 2.2.7.2 转化农杆菌感受态 | 第35-36页 |
| 2.2.7.3 转化农杆菌阳性菌落的检测 | 第36页 |
| 2.2.8 水稻遗传转化 | 第36-37页 |
| 2.2.8.1 R372种子胚性愈伤组织的诱导及继代 | 第36页 |
| 2.2.8.2 农杆菌（EHA105）介导的水稻遗传转化 | 第36-37页 |
| 2.2.9 水稻基因组DNA的提取 | 第37-38页 |
| 2.2.10 转基因植株的阳性检测 | 第38页 |
| 2.2.10.1 潮霉素基因（Hyg）PCR检测 | 第38页 |
| 2.2.10.2 GUS染色检测 | 第38页 |
| 2.2.11 淀粉合成基因的荧光定量分析 | 第38-40页 |
| 2.2.12 淀粉含量的测定 | 第40-41页 |
| 2.2.12.1 植物淀粉含量的测定 | 第40页 |
| 2.2.12.2 直链淀粉含量的测定 | 第40-41页 |
| 第三章 结果与分析 | 第41-52页 |
| 3.1 水稻RNA的提取及检测 | 第41页 |
| 3.2 SSIII-1 和PUL RNAi片段扩增及克隆载体鉴定 | 第41-42页 |
| 3.3 植物表达载体PTCK303-S-A的构建 | 第42-44页 |
| 3.3.1 PTCK303-S质粒的构建 | 第42-43页 |
| 3.3.2 PTCK303-S-A质粒的构建 | 第43-44页 |
| 3.4 农杆菌转化子的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.5 农杆菌介导水稻愈伤组织遗传转化及其分化 | 第45-46页 |
| 3.6 阳性植株的检测 | 第46-48页 |
| 3.6.1 潮霉素基因PCR检测 | 第46-47页 |
| 3.6.2 GUS染色检测 | 第47-48页 |
| 3.7 SSIII-1 和PUL RNAi植株淀粉合成基因表达量分析 | 第48-50页 |
| 3.7.1 SSIII-1 RNAi植株淀粉合成基因表达量分析 | 第48-49页 |
| 3.7.2 PUL RNAi植株淀粉合成基因表达量分析 | 第49-50页 |
| 3.8 SSIII-1 和PUL RNAi植株淀粉含量测定 | 第50-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-56页 |
| 4.1 RNAi载体的构建 | 第52页 |
| 4.2 籼稻的遗传转化 | 第52-53页 |
| 4.3 阳性植株的鉴定 | 第53页 |
| 4.4 淀粉合成基因表达量分析 | 第53-54页 |
| 4.5 淀粉含量测定 | 第54页 |
| 4.6 展望 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
