| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第15-16页 |
| 第一章 生长抑素和皮质抑素双表达DNA疫苗研究进展 | 第16-35页 |
| 1 生长抑素生理生化作用及其研究进展 | 第16-18页 |
| 1.1 生长抑素的生物学特性 | 第16-17页 |
| 1.2 生长抑素的受体及生物学作用 | 第17-18页 |
| 2 生长抑素DNA免疫进展及存在的主要问题 | 第18-26页 |
| 2.1 合成肽生长抑素疫苗 | 第19页 |
| 2.2 基因工程疫苗 | 第19-20页 |
| 2.3 生长抑素DNA免疫 | 第20-24页 |
| 2.4 生长抑素DNA免疫效果研究发展 | 第24-26页 |
| 3 皮质抑素14肽(CST-14)生理生化作用及其研究进展 | 第26-32页 |
| 3.1 前皮质抑素原的克隆 | 第26-27页 |
| 3.2 前皮质抑素原在大脑中表达受到抑制 | 第27-28页 |
| 3.3 CST-14的生理学性状 | 第28-30页 |
| 3.4 皮质抑素的受体 | 第30页 |
| 3.5 在中枢神经系统的附加功能 | 第30-32页 |
| 4 基因疫苗免疫的安全性研究进展 | 第32-33页 |
| 4.1 WHO及FDA对DNA疫苗安全性的有关规定 | 第32-33页 |
| 4.2 基因整合的研究 | 第33页 |
| 5 研究目的与意义 | 第33-35页 |
| 第二章 生长抑素和皮质抑素双表达DNA疫苗的构建与鉴定 | 第35-58页 |
| 引言 | 第35-36页 |
| 1 材料与方法 | 第36-49页 |
| 1.1 材料 | 第36-39页 |
| 1.2 方法 | 第39-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-57页 |
| 2.1 片段S/2SS的PCR扩增产物 | 第49-50页 |
| 2.2 质粒pIRES、PVAX1-S/CST和PVAX1-S/CST14双酶切产物 | 第50-51页 |
| 2.3 质粒pIRES-S/CST和pIRES-S/CST14的双酶切产物 | 第51页 |
| 2.4 质粒pIRES-S/2SS双酶切产物 | 第51-52页 |
| 2.5 质粒pIRES-S/CST14 -S/2SS双酶切产物 | 第52-53页 |
| 2.6 质粒pIRES-S/CST14-S/2SS转染Hela细胞后的RT-PCR转录 | 第53-55页 |
| 2.7 质粒pIRES-S/CST14-S/2SS转染Hela细胞后的蛋白表达 | 第55页 |
| 2.8 双表达质粒转染Hela细胞后,细胞免疫荧光方法观察 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 第三章 双表达质粒转染GH3细胞后的分泌作用及其受体表达水平变化 | 第58-73页 |
| 引言 | 第58-59页 |
| 1 材料和方法 | 第59-66页 |
| 1.1 材料 | 第59-61页 |
| 1.2 方法 | 第61-65页 |
| 1.3 数据分析 | 第65-66页 |
| 2 结果 | 第66-71页 |
| 2.1 生长抑素和皮质抑素在GH3细胞表达 | 第66-67页 |
| 2.2 细胞凋亡 | 第67页 |
| 2.3 cAMP检测 | 第67-68页 |
| 2.4 生长激素和催乳素的检测 | 第68-70页 |
| 2.5 生长抑素受体的蛋白表达分析 | 第70-71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| 第四章 双表达DNA疫苗免疫小鼠的生长及免疫应答效果 | 第73-81页 |
| 引言 | 第73-74页 |
| 1 材料和方法 | 第74-76页 |
| 1.1 质粒和菌株 | 第74页 |
| 1.2 实验动物饲养管理 | 第74页 |
| 1.3 疫苗的免疫及样品采集 | 第74-75页 |
| 1.4 实验试剂及配制 | 第75页 |
| 1.5 小鼠血液采集 | 第75页 |
| 1.6 相关激素和抗体检测 | 第75-76页 |
| 1.7 数据分析 | 第76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-79页 |
| 2.1 小鼠的SS IgG水平检测 | 第76-77页 |
| 2.2 免疫后SS抗体阳性小鼠的增重比较 | 第77-78页 |
| 2.3 GH和CST激素检测 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-81页 |
| 第五章 生长抑素和皮质抑素双表达DNA疫苗安全性研究 | 第81-88页 |
| 引言 | 第81页 |
| 1 材料与方法 | 第81-84页 |
| 1.1 材料 | 第81-82页 |
| 1.2 方法 | 第82-84页 |
| 2 结果分析 | 第84-86页 |
| 2.1 小鼠组织总DNA内参基因的PCR结果 | 第84-85页 |
| 2.2 生长抑素和皮质抑素融合目的基因扩增结果 | 第85-86页 |
| 3 讨论 | 第86-88页 |
| 第六章 基因免疫方法学研究 | 第88-102页 |
| 引言 | 第88-90页 |
| 1 材料与方法 | 第90-93页 |
| 1.1 质粒和细菌 | 第90页 |
| 1.2 细菌菌株接种疫苗的制备 | 第90页 |
| 1.3 疫苗的免疫 | 第90-91页 |
| 1.4 体重数据和血清的采集 | 第91页 |
| 1.5 间接ELISA方法检测抗体水平 | 第91-92页 |
| 1.6 分析质粒的拷贝数以及在机体组织中的生物分布 | 第92页 |
| 1.7 提取DNA试剂盒方法步骤 | 第92-93页 |
| 1.8 统计分析 | 第93页 |
| 2 结果 | 第93-99页 |
| 2.1 生长抑素SS的IgG抗体水平 | 第93-94页 |
| 2.2 抗生长抑素抗体IgG水平 | 第94-95页 |
| 2.3 IgA抗体水平结果 | 第95-96页 |
| 2.4 增重分析 | 第96页 |
| 2.5 小鼠各种组织中质粒的拷贝数及生物分布 | 第96-99页 |
| 3 讨论 | 第99-102页 |
| 全文总结 | 第102-103页 |
| 创新与不足 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-118页 |
| 附录Ⅰ: 已发表论文和专利 | 第118-119页 |
| 附录Ⅱ: 皮质抑素和生长抑素碱基序列 | 第119-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
