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外源20-羟基蜕皮激素对洋虫的影响及其EcR和HR3基因的表达分析

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
1 绪论第19-34页
    1.1 洋虫的概述第19-25页
        1.1.1 洋虫的分类地位及命名第19页
        1.1.2 洋虫的形态特征第19-23页
        1.1.3 洋虫的生活习性及生活史第23页
        1.1.4 洋虫的饲养第23-24页
        1.1.5 洋虫的营养成分第24页
        1.1.6 洋虫的保健作用第24-25页
    1.2 昆虫蜕皮行为的激素调控机理第25-32页
        1.2.1 昆虫蜕皮激素及其功能第26-27页
        1.2.2 蜕皮激素合成的信号途径第27-28页
        1.2.3 核受体基因家族与蜕皮激素信号传导第28-30页
        1.2.4 核受体基因结构第30-31页
        1.2.5 蜕皮激素受体(EcR)的研究进展第31页
        1.2.6 激素受体接受子3(HR3)的研究进展第31-32页
    1.3 本研究的目的与意义第32页
    1.4 本研究的内容与技术路线第32-34页
        1.4.1 研究内容第32页
        1.4.2 技术路线第32-34页
2 洋虫蜕皮激素受体(EcR)基因的克隆及序列分析第34-57页
    2.1 前言第34页
    2.2 材料与方法第34-40页
        2.2.1 实验材料第34-37页
        2.2.2 实验方法第37-40页
    2.3 结果与分析第40-54页
        2.3.1 总RNA质量检测及浓度测定第40-41页
        2.3.2 洋虫EcR基因的克隆及鉴定第41-43页
        2.3.3 洋虫EcR基因序列测定与同源性比对第43-46页
        2.3.4 洋虫EcR基因的系统进化分析第46-47页
        2.3.5 洋虫PdEcR序列的开放阅读框分析第47-49页
        2.3.6 洋虫PdEcR氨基酸组成、分子量、等电点分析第49-50页
        2.3.7 洋虫PdEcR蛋白信号肽分析第50-51页
        2.3.8 洋虫PdEcR蛋白疏水性分析第51-52页
        2.3.9 洋虫PdEcR蛋白跨膜结构分析第52-53页
        2.3.10 洋虫PdEcR蛋白保守区域分析第53页
        2.3.11 洋虫PdEcR蛋白质三级结构预测第53-54页
    2.4 讨论第54-55页
        2.4.1 总RNA提取的重要性第54-55页
        2.4.2 洋虫EcR基因克隆的意义第55页
    2.5 本章小结第55-57页
3 洋虫不同发育时期EcR和HR3基因mRNA水平的表达第57-73页
    3.1 前言第57-58页
        3.1.1 实时荧光定量PCR的特点第57页
        3.1.2 实时荧光定量PCR的基因定量方法第57-58页
        3.1.3 利用实时荧光定量PCR研究基因表达的意义第58页
    3.2 材料与方法第58-61页
        3.2.1 实验材料第58-59页
        3.2.2 实验方法第59-61页
    3.3 结果与分析第61-69页
        3.3.1 总RNA质量检测及浓度测定第61-63页
        3.3.2 引物有效专一性检测第63-64页
        3.3.3 qRT-PCR的优化条件第64-66页
        3.3.4 qRT-PCR技术检测洋虫不同发育时期EcR基因的mRNA水平表达第66-68页
        3.3.5 qRT-PCR技术检测洋虫不同发育时期HR3基因的mRNA水平表达第68-69页
    3.4 讨论第69-71页
        3.4.1 实验整体操作细节的重要性第69页
        3.4.2 内参基因选择的重要性第69-70页
        3.4.3 引物设计及PCR反应体系优化的重要性第70页
        3.4.4 洋虫不同发育时期EcR基因的mRNA水平表达分析第70-71页
        3.4.5 洋虫不同发育时期HR3基因的mRNA水平表达分析第71页
    3.5 本章小结第71-73页
4 外源20-羟基蜕皮激素对洋虫幼虫、蛹及成虫发育的影响第73-83页
    4.1 前言第73页
    4.2 材料与方法第73-74页
        4.2.1 供试昆虫第73页
        4.2.2 供试样品配制第73-74页
        4.2.3 生物测定方法第74页
    4.3 结果与分析第74-80页
        4.3.1 外源20-羟基蜕皮激素对洋虫幼虫发育的影响第74-77页
        4.3.2 外源20-羟基蜕皮激素对洋虫蛹发育的影响第77-79页
        4.3.3 外源20-羟基蜕皮激素对洋虫成虫发育的影响第79-80页
    4.4 讨论第80-81页
        4.4.1 外源20-羟基蜕皮激素对洋虫幼虫发育的影响第80-81页
        4.4.2 外源20-羟基蜕皮激素对洋虫蛹发育的影响第81页
        4.4.3 外源20-羟基蜕皮激素对洋虫成虫发育的影响第81页
    4.5 本章小结第81-83页
5 外源20-羟基蜕皮激素对洋虫体壁超微结构的影响第83-100页
    5.1 前言第83-84页
    5.2 材料与方法第84-86页
        5.2.1 供试昆虫和试剂第84页
        5.2.2 实验器材第84-85页
        5.2.3 实验药品第85页
        5.2.4 实验溶液配制第85页
        5.2.5 试虫处理方法第85页
        5.2.6 体壁透射电镜样品制备和观察第85-86页
    5.3 结果与分析第86-98页
        5.3.1 外源20E处理后6~(th)h洋虫蛹体壁超微结构的电镜观察第86页
        5.3.2 外源20E处理后12~(th)h洋虫蛹体壁超微结构的电镜观察第86-90页
        5.3.3 外源20E处理后24~(th)h洋虫蛹体壁超微结构的电镜观察第90-91页
        5.3.4 外源20E处理后36~(th)h洋虫蛹体壁超微结构的电镜观察第91-93页
        5.3.5 外源20E处理后48~(th)h洋虫蛹体壁超微结构的电镜观察第93-95页
        5.3.6 外源20E处理后72~(nd)h洋虫蛹体壁超微结构的电镜观察第95页
        5.3.7 外源20E处理后96~(th)h洋虫蛹体壁超微结构的电镜观察第95-98页
    5.4 讨论第98页
    5.5 本章小结第98-100页
6 外源20-羟基蜕皮激素对洋虫中肠超微结构的影响第100-107页
    6.1 前言第100-102页
    6.2 材料与方法第102-103页
        6.2.1 供试昆虫和试剂第102页
        6.2.2 实验器材、实验药品及实验溶液配制第102页
        6.2.3 试虫处理方法第102页
        6.2.4 中肠透射电镜样品制备和观察第102-103页
    6.3 结果与分析第103-104页
        6.3.1 对照组洋虫幼虫中肠超微结构观察第103-104页
        6.3.2 外源20E处理后洋虫幼虫中肠超微结构变化第104页
    6.4 讨论第104-106页
    6.5 本章小结第106-107页
结论第107-110页
参考文献第110-120页
附录第120-125页
攻读学位期间发表的学术论文第125-126页
致谢第126-127页

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