| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| 1.1 阿尔兹海默症 | 第9页 |
| 1.2 高半胱氨酸血症 | 第9-10页 |
| 1.3 冠心病 | 第10页 |
| 1.4 高半胱氨酸 | 第10-11页 |
| 1.5 SAHH | 第11-14页 |
| 1.6 毕赤酵母表达SAHH | 第14-15页 |
| 1.7 抑制剂筛选 | 第15-17页 |
| 1.7.1 ChemMapper初步筛选 | 第15-16页 |
| 1.7.2 SciFinder Scholar再次筛选 | 第16-17页 |
| 1.8 展望 | 第17-18页 |
| 第二章 实验材料、仪器与方法 | 第18-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.2 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-39页 |
| 2.3.1 sahh的克隆 | 第20-21页 |
| 2.3.2 目的基因sahh的获取 | 第21-25页 |
| 2.3.3 构建GS115表达载体 | 第25-28页 |
| 2.3.4 重组蛋白SAHH的表达 | 第28-29页 |
| 2.3.5 SAHH蛋白纯化 | 第29-33页 |
| 2.3.6 测定酶活性 | 第33-35页 |
| 2.3.7 SAHH酶促反应动力学参数测定 | 第35页 |
| 2.3.8 筛选SAHH抑制剂 | 第35-39页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第39-66页 |
| 3.1 表达载体的构建以及筛选高拷贝转化子 | 第39-45页 |
| 3.1.1 pPIC9K-sahh扩增保存 | 第39-40页 |
| 3.1.2 pPIC9K-sahh双酶切 | 第40-41页 |
| 3.1.3 pPIC9K-sahh线性化鉴定 | 第41-43页 |
| 3.1.4 筛选高拷贝转化子 | 第43-44页 |
| 3.1.5 PCR产物测序鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2 SAHH表达，纯化 | 第45-47页 |
| 3.2.1 纯化SAHH | 第45-46页 |
| 3.2.2 SAHH酶活 | 第46-47页 |
| 3.3 SAHH最适反应条件以及酶促反应动力学参数 | 第47-48页 |
| 3.3.1 SAHH的最适pH值,温度 | 第47页 |
| 3.3.2 SAHH酶促反应动力学分析 | 第47-48页 |
| 3.4 SAHH抑制剂 | 第48-66页 |
| 3.4.1 筛选SAHH抑制剂 | 第48-64页 |
| 3.4.2 竞争性抑制剂 | 第64-66页 |
| 第四章 结论与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |