| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-25页 |
| 1.1 蓝细菌简介 | 第9页 |
| 1.2 鱼腥蓝细菌PCC 7120的特点 | 第9-15页 |
| 1.2.1 异形胞的特点 | 第10-12页 |
| 1.2.2 异形胞的分化发育 | 第12-15页 |
| 1.3 氮代谢 | 第15-16页 |
| 1.4 2-OG信号分子的简介 | 第16-17页 |
| 1.5 NtcA蛋白简介 | 第17-22页 |
| 1.5.1 NtcA的转录调控作用 | 第17-20页 |
| 1.5.2 ntcA与herR之间的关系 | 第20-22页 |
| 1.6 PipX蛋白的简介 | 第22-23页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-33页 |
| 2.1 菌株和质粒 | 第25页 |
| 2.2 培养基配方以及培养条件 | 第25-26页 |
| 2.2.1 大肠杆菌的培养 | 第25-26页 |
| 2.2.2 鱼腥蓝细菌的培养 | 第26页 |
| 2.3 主要分子生物学试剂 | 第26-27页 |
| 2.4 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.4.1 生物信息学分析方法 | 第27页 |
| 2.4.2 质粒DNA的制备及其基本操作 | 第27-28页 |
| 2.4.3 转化 | 第28-29页 |
| 2.4.4 大肠杆菌超表达外源蛋白质的纯化 | 第29页 |
| 2.4.5 电泳迁移率实验 | 第29-30页 |
| 2.4.6 鱼腥蓝细菌异形胞的诱导(缺氮诱导) | 第30-31页 |
| 2.4.7 鱼腥蓝细菌PCC 7120总DNA的小量抽提 | 第31页 |
| 2.4.8 鱼腥蓝细菌RNA提取和纯化 | 第31-32页 |
| 2.4.9 实时定量反转录PCR(Real-Time RT-PCR) | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-51页 |
| 3.1 蓝细菌中PipX的生物信息学分析 | 第33-35页 |
| 3.2 鱼腥蓝细菌PCC 7120中pipX突变体的构建 | 第35-38页 |
| 3.2.1 鱼腥蓝细菌PCC 7120中pipX突变体的构建原理 | 第35页 |
| 3.2.2 pipX中断突变体克隆的构建流程 | 第35-37页 |
| 3.2.3 pipX中断突变体的筛选 | 第37-38页 |
| 3.3 鱼腥蓝细菌PCC 7120中pipX的表达分析 | 第38-42页 |
| 3.3.1 Real Time-PCR分析鱼腥蓝细菌PCC 7120中pipX的表达 | 第38-40页 |
| 3.3.2 pipX的空间表达分析 | 第40-42页 |
| 3.4 在体外验证PipX对NtcA结合DNA片段效率的影响 | 第42-51页 |
| 3.4.1 NtcA蛋白的诱导和纯化 | 第42-43页 |
| 3.4.2 PipX蛋白的诱导和纯化 | 第43-45页 |
| 3.4.3 EMSA验证PipX对NtcA与pipX/ntcA启动子片段结合效率的影响 | 第45-49页 |
| 3.4.4 EMSA验证PipX促进NtcA与hetR启动子片段的结合 | 第49-51页 |
| 4 讨论与展望 | 第51-54页 |
| 4.1 讨论 | 第51-52页 |
| 4.2 工作展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录1 蓝细菌接合转移(三亲本杂交) | 第62-64页 |
| 附录2 本研究所用引物 | 第64页 |
