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半夏块茎与细胞培养体系的建立及主要生物碱的代谢调控研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
前言第14-15页
第一章 文献综述第15-30页
   ·药用植物半夏的研究现状第15-25页
     ·半夏的生物学特性第15-17页
     ·半夏的生药学研究第17-18页
     ·半夏的化学成分研究第18-19页
     ·半夏的药理学研究第19-22页
     ·半夏的毒副作用研究第22页
     ·半夏鸟苷、肌苷和葫芦巴碱的代谢途径研究进展第22-25页
   ·植物的次生代谢研究进展第25-27页
     ·次生代谢的概念及分类第25-26页
     ·植物细胞培养生产次生代谢物第26页
     ·诱导子对植物次生代谢产物合成的调控第26-27页
   ·课题立题的依据和研究思路第27-30页
第二章 半夏愈伤组织的诱导及总生物碱含量的检测第30-40页
   ·试验材料第30-31页
     ·主要试剂第30页
     ·主要仪器第30-31页
   ·试验方法第31-32页
     ·半夏无菌外植体的获取第31页
     ·愈伤组织的诱导第31页
     ·愈伤组织的增殖第31-32页
     ·愈伤组织的显微结构观察第32页
     ·不同愈伤组织细胞系总生物碱的检测第32页
   ·试验结果第32-38页
     ·半夏愈伤组织的诱导第32-36页
     ·半夏愈伤组织细胞系的增殖第36-37页
     ·半夏不同愈伤组织细胞系总生物碱的含量第37页
     ·不同生理状态愈伤组织显微结构的比较第37-38页
   ·讨论第38-40页
第三章 半夏愈伤组织颗粒悬浮培养体系的建立及生物碱的HPLC 检测第40-47页
   ·试验材料第40-41页
     ·主要试剂第40页
     ·主要仪器第40-41页
     ·植物材料第41页
   ·试验方法第41-42页
     ·半夏悬浮培体系中愈伤组织状态的调控第41页
     ·半夏颗粒状愈伤组织悬浮培养体系的建立及特征第41页
     ·半夏细胞培养物及栽培块茎中生物碱HPLC 检测方法的建立第41-42页
   ·试验结果第42-45页
     ·半夏悬浮培养愈伤组织状态的调控第42-43页
     ·半夏颗粒状愈伤组织悬浮培养体系的建立及特征第43页
     ·半夏细胞培养物及栽培块茎中生物碱含量HPLC 检测方法的建立第43-45页
     ·半夏培养细胞中生物碱含量的测定第45页
   ·讨论第45-47页
第四章 半夏小块茎的诱导及其悬浮培养体系的建立第47-55页
   ·实验材料第47-48页
     ·主要试剂第47页
     ·主要仪器第47-48页
   ·实验方法第48-49页
     ·无菌外植体的获得及培养第48页
     ·半夏小块茎的诱导第48页
     ·小块茎的继代培养第48页
     ·小块茎液体悬浮培养体系的建立第48页
     ·组培小块茎和栽培块茎总生物碱的比较第48-49页
     ·小块茎中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱的含量分析第49页
   ·试验结果第49-53页
     ·不同激素组合对半夏外植体诱导形成小块茎的影响第49-50页
     ·半夏小块茎的继代培养第50页
     ·半夏小块茎的液体悬浮培养第50-51页
     ·组培小块茎和栽培块茎总生物碱含量的比较第51-52页
     ·组培小块茎和栽培块茎中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱含量的比较第52-53页
   ·讨论第53-55页
第五章 半夏内生菌的分离与鉴定第55-66页
   ·试验材料第55-56页
     ·主要试剂第55页
     ·主要仪器第55-56页
     ·植物材料和培养基第56页
   ·实验方法第56-57页
     ·内生真菌的分离纯化第56页
     ·内生细菌和放线菌的分离纯化第56页
     ·内生真菌的初步鉴定第56-57页
     ·产生物碱菌株的筛选第57页
     ·内生细菌的鉴定第57页
   ·实验结果第57-64页
     ·半夏内生菌分离、纯化结果第57-58页
     ·不同器官半夏内生菌数量与种属分布第58-59页
     ·产生物碱内生菌的筛选第59-61页
     ·产生物碱内生细菌的鉴定第61-64页
   ·讨论第64-66页
第六章 真菌诱导子对半夏小块茎悬浮培养体系中生物碱合成的诱导第66-74页
   ·试验材料第66-67页
     ·主要试剂第66页
     ·主要仪器第66-67页
   ·试验方法第67-68页
     ·小块茎悬浮培养体系的建立第67页
     ·真菌诱导子的制备第67页
     ·小块茎中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱含量的检测第67页
     ·真菌诱导子对小块茎生长分化和生物碱含量的影响第67-68页
     ·Penicillium sp. 和 Ozonium sp.诱导子添加浓度的筛选第68页
     ·Penicillium sp. 和 Ozonium sp.诱导子添加时间的筛选第68页
     ·Penicillium sp. 和 Ozonium sp.诱导子诱导的时间进程第68页
     ·真菌发酵液中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱的检测第68页
   ·实验结果第68-73页
     ·真菌诱导子对半夏小块茎生长、分化与生物碱含量的影响第68-70页
     ·Penicillium sp. 和 Ozonium sp.添加浓度对小块茎生物碱含量的影响第70页
     ·Penicillium sp. 和 Ozonium sp.添加时间对小块茎生物碱含量的影响第70-71页
     ·Penicillium sp. 和 Ozonium sp. 诱导的时间进程第71-72页
     ·真菌发酵液中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱的检测第72-73页
   ·讨论第73-74页
第七章 细菌诱导子对半夏小块茎生长分化及生物碱含量的影响第74-81页
   ·实验材料第74-75页
     ·主要试剂第74页
     ·主要仪器第74-75页
   ·实验方法第75-76页
     ·小块茎的悬浮培养第75页
     ·半夏内生细菌的分离第75页
     ·细菌诱导子的制备第75页
     ·有诱导效应的内生细菌的筛选和鉴定第75-76页
     ·内生细菌对半夏小块茎生长和分化的影响第76页
     ·内生细菌对半夏小块茎生物碱含量的影响第76页
     ·细菌发酵液中生物碱的检测第76页
   ·实验结果第76-79页
     ·内生细菌的筛选结果及菌种鉴定第76-77页
     ·Pseudomonas sp. 和 Enterobacter sp.对半夏小块茎生长的影响第77页
     ·细菌细胞提取物对半夏小块茎生物碱含量的影响第77-78页
     ·活体细菌和小块茎共培养对小块茎生物碱含量的影响第78-79页
     ·Pseudomonas sp. 和 Enterobacter sp.发酵液中生物碱的检测第79页
   ·讨论第79-81页
第八章 非生物诱导子和前体化合物对半夏生物碱的诱导及关键酶活性的影响第81-97页
   ·实验材料第81-82页
     ·主要试剂第81-82页
     ·主要仪器第82页
   ·实验方法第82-86页
     ·小块茎的悬浮培养第82页
     ·小块茎生物碱含量的检测第82页
     ·非生物诱导子对半夏小块茎中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱含量的影响第82-83页
     ·前体化合物对半夏小块茎中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱含量的影响第83-84页
     ·甘氨酸和肌苷酸对IMP 脱氢酶和SAMP 合成酶活性的影响第84-86页
   ·实验结果第86-94页
     ·非生物诱导子对半夏小块茎中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱含量的影响第86-89页
     ·前体化合物对半夏小块茎中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱含量的影响第89-92页
     ·肌苷酸和甘氨酸添加对IMP 脱氢酶和SAMP 合成酶活性的影响第92-94页
   ·讨论第94-97页
第九章 全文总结第97-99页
   ·主要研究结论第97-98页
   ·研究的创新点第98页
   ·存在的不足及后续研究设想第98-99页
参考文献第99-109页
附录第109-117页
致谢第117-118页
作者简介第118页

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