中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
前言 | 第9-15页 |
第一部分 吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)产生氢醌型格尔德霉素及其氢醌型生物合成中间产物的相关研究 | 第15-37页 |
一、实验材料 | 第15-18页 |
·化学绘图软件 | 第15页 |
·菌种 | 第15页 |
·特殊试剂 | 第15-16页 |
·常用仪器 | 第16页 |
·培养基 | 第16-18页 |
·分离介质 | 第18页 |
·其他耗材 | 第18页 |
二、实验方法 | 第18-21页 |
·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)、gdmP基因阻断变株及gdmN基因阻断变株的固体发酵培养 | 第18-19页 |
·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)、gdmP基因阻断变株及gdmN基因阻断变株的液体发酵培养 | 第19页 |
·代谢产物提取 | 第19页 |
·代谢产物的初步分析鉴定 | 第19-21页 |
三、结果与讨论 | 第21-37页 |
·结果 | 第21-34页 |
·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)在ISPII平板培养及固体发酵培养基中培养的结果 | 第21-23页 |
·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)在ISPII平板培养72-96h产生氢醌型格尔德霉素(geldanamycin hydroquinone,GQH_2)为主要组分 | 第23-24页 |
·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)的gdmN变株在ISPII平板培养至72-96h产生H_2GQH_2-dC为主要组分 | 第24-26页 |
·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)的gdmP变株在ISPII平板培养至72-96h产生H_2GQH_2为主要组分 | 第26-27页 |
·LC-MS/MS确证吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)产生的GQH_2、H_2GQH_2-dC和H_2GQH_2 | 第27-31页 |
·GQH_2、H_2GQH_2-dC和H_2GQH_2在空气中可自发氧化为对应的醌式化合物GDM、H_2GDM-dC和H_2GDM | 第31-34页 |
·讨论 | 第34-37页 |
·GQH_2自发氧化为GDM应是氢醌型向醌型转变的主要位点 | 第34-36页 |
·GDM生物合成路径的研究 | 第36-37页 |
第二部分 GDM生物合成中间产物17-O-去甲基利布拉霉(17-O-demethylreblastatin)的相关研究 | 第37-63页 |
一、实验材料 | 第37-40页 |
·菌种 | 第37页 |
·试剂 | 第37-38页 |
·抗生素 | 第38页 |
·常用仪器 | 第38页 |
·培养基 | 第38-39页 |
·分离介质 | 第39-40页 |
·其他耗材 | 第40页 |
二、实验方法 | 第40-44页 |
·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)、gdmP基因阻断变株的固体发酵培养 | 第40页 |
·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)、gdmP基因阻断变株的液体发酵培养 | 第40-41页 |
·代谢产物提取 | 第41页 |
·抗肿瘤活性测定 | 第41-42页 |
·代谢产物的初步分析鉴定 | 第42-44页 |
·新GDM结构类似物的分离纯化及结构鉴定 | 第44页 |
三、结果与讨论 | 第44-63页 |
1、吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)在ISPII平板培养及液体发酵培养基中培养的结果 | 第44-46页 |
2、吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)的gdmP变株在ISPII平板培养及液体发酵培养基中培养的结果 | 第46-47页 |
3、目标化合物中酚羟基的鉴别 | 第47-48页 |
4、HPLC分析目标化合物 | 第48-50页 |
5、LC-MS/MS初步确定目标化合物为GDM结构类似物 | 第50-53页 |
6、化合物17-O-去甲基利布拉霉素的理化性质及结构鉴定 | 第53-56页 |
7、GDM生物合成PKS后修饰研究 | 第56-63页 |
·生物转化 | 第56-60页 |
·液体培养基生物转化 | 第56-58页 |
·固体培养基生物转化 | 第58-60页 |
·GDM生物合成PKS后修饰 | 第60-63页 |
结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
硕士就读期间发表论文 | 第71-72页 |
附录 | 第72-82页 |