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吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)格尔德霉素(GDM)生物合成PKS后修饰过程研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-9页
前言第9-15页
第一部分 吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)产生氢醌型格尔德霉素及其氢醌型生物合成中间产物的相关研究第15-37页
 一、实验材料第15-18页
   ·化学绘图软件第15页
   ·菌种第15页
   ·特殊试剂第15-16页
   ·常用仪器第16页
   ·培养基第16-18页
   ·分离介质第18页
   ·其他耗材第18页
 二、实验方法第18-21页
   ·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)、gdmP基因阻断变株及gdmN基因阻断变株的固体发酵培养第18-19页
   ·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)、gdmP基因阻断变株及gdmN基因阻断变株的液体发酵培养第19页
   ·代谢产物提取第19页
   ·代谢产物的初步分析鉴定第19-21页
 三、结果与讨论第21-37页
   ·结果第21-34页
     ·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)在ISPII平板培养及固体发酵培养基中培养的结果第21-23页
     ·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)在ISPII平板培养72-96h产生氢醌型格尔德霉素(geldanamycin hydroquinone,GQH_2)为主要组分第23-24页
     ·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)的gdmN变株在ISPII平板培养至72-96h产生H_2GQH_2-dC为主要组分第24-26页
     ·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)的gdmP变株在ISPII平板培养至72-96h产生H_2GQH_2为主要组分第26-27页
     ·LC-MS/MS确证吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)产生的GQH_2、H_2GQH_2-dC和H_2GQH_2第27-31页
     ·GQH_2、H_2GQH_2-dC和H_2GQH_2在空气中可自发氧化为对应的醌式化合物GDM、H_2GDM-dC和H_2GDM第31-34页
   ·讨论第34-37页
     ·GQH_2自发氧化为GDM应是氢醌型向醌型转变的主要位点第34-36页
     ·GDM生物合成路径的研究第36-37页
第二部分 GDM生物合成中间产物17-O-去甲基利布拉霉(17-O-demethylreblastatin)的相关研究第37-63页
 一、实验材料第37-40页
   ·菌种第37页
   ·试剂第37-38页
   ·抗生素第38页
   ·常用仪器第38页
   ·培养基第38-39页
   ·分离介质第39-40页
   ·其他耗材第40页
 二、实验方法第40-44页
   ·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)、gdmP基因阻断变株的固体发酵培养第40页
   ·吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)、gdmP基因阻断变株的液体发酵培养第40-41页
   ·代谢产物提取第41页
   ·抗肿瘤活性测定第41-42页
   ·代谢产物的初步分析鉴定第42-44页
   ·新GDM结构类似物的分离纯化及结构鉴定第44页
 三、结果与讨论第44-63页
  1、吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)在ISPII平板培养及液体发酵培养基中培养的结果第44-46页
  2、吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)的gdmP变株在ISPII平板培养及液体发酵培养基中培养的结果第46-47页
  3、目标化合物中酚羟基的鉴别第47-48页
  4、HPLC分析目标化合物第48-50页
  5、LC-MS/MS初步确定目标化合物为GDM结构类似物第50-53页
  6、化合物17-O-去甲基利布拉霉素的理化性质及结构鉴定第53-56页
  7、GDM生物合成PKS后修饰研究第56-63页
   ·生物转化第56-60页
     ·液体培养基生物转化第56-58页
     ·固体培养基生物转化第58-60页
   ·GDM生物合成PKS后修饰第60-63页
结论第63-64页
参考文献第64-69页
致谢第69-71页
硕士就读期间发表论文第71-72页
附录第72-82页

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