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凝集素基因克隆及功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 文献综述第12-23页
   ·蚜虫防治研究进展第12-15页
   ·凝集素概述第15-18页
     ·植物凝集素分类第15-16页
     ·凝集素作为植物天然防御蛋白的证据第16-17页
     ·凝集素的抗虫作用机制第17页
     ·几种重要的凝集素及抗虫基因工程第17-18页
   ·蚜虫防治存在的问题第18-19页
   ·解决问题的策略第19-21页
     ·新的抗蚜虫基因筛选第19-21页
     ·寻求合适的启动子第21页
     ·联合使用两种及以上的抗蚜虫基因第21页
   ·研究目的及意义第21-23页
第二章 材料与方法第23-40页
   ·实验材料第23-27页
     ·植物材料第23页
     ·实验菌株和克隆载体第23页
     ·培养基及实验所用试剂配制第23-25页
     ·主要酶和常规生化试剂第25页
     ·实验仪器第25页
     ·所用引物第25-27页
   ·方法第27-40页
     ·植物RNA 的提取及检测第27-28页
     ·凝集素中间片段、3’端、5’端、全长的获得第28-33页
     ·连接T-Vector(Takara 公司pMD19-T)第33页
     ·大肠杆菌感受态的制备第33页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第33-34页
     ·大肠质粒的提取(碱裂解法)第34页
     ·表达载体的构建(以p2300-35S-PtLec 载体的构建为例)第34-36页
     ·根癌农杆菌4404 感受态的制备,转化第36-37页
     ·农杆菌介导的遗传转化第37页
     ·阳性植株抗蚜能力检测第37-38页
     ·原核表达蛋白与纯化及蛋白含量测定第38-40页
第三章 结果与分析第40-62页
   ·三叶半夏凝集素基因的克隆及序列分析第40-45页
     ·三叶半夏凝集素基因cDNA 全长序列的获得第40-42页
     ·三叶半夏凝集素基因序列分析第42-45页
   ·海芋凝集素基因的克隆及序列分析第45-48页
     ·海芋凝集素基因cDNA 全长的获得第45-46页
     ·海芋凝集素基因序列分析第46-48页
   ·掌叶半夏凝集素基因的克隆及序列分析第48-52页
     ·掌叶半夏凝集素cDNA 全长的获得第48-49页
     ·掌叶半夏凝集素基因序列分析第49-52页
   ·所获凝集素基因植物表达载体的构建第52-56页
     ·由RbcS1 启动子驱动的植物表达载体框架图第52页
     ·由35S 启动子驱动的植物表达载体框架图第52页
     ·以RbcS1 启动子驱动的ptlec 植物表达载体的构建过程为例,示意图第52-53页
     ·获得的凝集素基因植物表达载体构建多酶切检测结果图第53-56页
     ·多酶切检测结果分析第56页
   ·植物表达载体转化烟草及分子检测第56-57页
   ·转基因烟草的抗蚜能力初步检测第57-58页
   ·凝集素基因原核表达载体构建及表达纯化第58-62页
第四章 结论第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69-70页
作者简历第70页

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