摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
·蚜虫防治研究进展 | 第12-15页 |
·凝集素概述 | 第15-18页 |
·植物凝集素分类 | 第15-16页 |
·凝集素作为植物天然防御蛋白的证据 | 第16-17页 |
·凝集素的抗虫作用机制 | 第17页 |
·几种重要的凝集素及抗虫基因工程 | 第17-18页 |
·蚜虫防治存在的问题 | 第18-19页 |
·解决问题的策略 | 第19-21页 |
·新的抗蚜虫基因筛选 | 第19-21页 |
·寻求合适的启动子 | 第21页 |
·联合使用两种及以上的抗蚜虫基因 | 第21页 |
·研究目的及意义 | 第21-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-40页 |
·实验材料 | 第23-27页 |
·植物材料 | 第23页 |
·实验菌株和克隆载体 | 第23页 |
·培养基及实验所用试剂配制 | 第23-25页 |
·主要酶和常规生化试剂 | 第25页 |
·实验仪器 | 第25页 |
·所用引物 | 第25-27页 |
·方法 | 第27-40页 |
·植物RNA 的提取及检测 | 第27-28页 |
·凝集素中间片段、3’端、5’端、全长的获得 | 第28-33页 |
·连接T-Vector(Takara 公司pMD19-T) | 第33页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第33页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第33-34页 |
·大肠质粒的提取(碱裂解法) | 第34页 |
·表达载体的构建(以p2300-35S-PtLec 载体的构建为例) | 第34-36页 |
·根癌农杆菌4404 感受态的制备,转化 | 第36-37页 |
·农杆菌介导的遗传转化 | 第37页 |
·阳性植株抗蚜能力检测 | 第37-38页 |
·原核表达蛋白与纯化及蛋白含量测定 | 第38-40页 |
第三章 结果与分析 | 第40-62页 |
·三叶半夏凝集素基因的克隆及序列分析 | 第40-45页 |
·三叶半夏凝集素基因cDNA 全长序列的获得 | 第40-42页 |
·三叶半夏凝集素基因序列分析 | 第42-45页 |
·海芋凝集素基因的克隆及序列分析 | 第45-48页 |
·海芋凝集素基因cDNA 全长的获得 | 第45-46页 |
·海芋凝集素基因序列分析 | 第46-48页 |
·掌叶半夏凝集素基因的克隆及序列分析 | 第48-52页 |
·掌叶半夏凝集素cDNA 全长的获得 | 第48-49页 |
·掌叶半夏凝集素基因序列分析 | 第49-52页 |
·所获凝集素基因植物表达载体的构建 | 第52-56页 |
·由RbcS1 启动子驱动的植物表达载体框架图 | 第52页 |
·由35S 启动子驱动的植物表达载体框架图 | 第52页 |
·以RbcS1 启动子驱动的ptlec 植物表达载体的构建过程为例,示意图 | 第52-53页 |
·获得的凝集素基因植物表达载体构建多酶切检测结果图 | 第53-56页 |
·多酶切检测结果分析 | 第56页 |
·植物表达载体转化烟草及分子检测 | 第56-57页 |
·转基因烟草的抗蚜能力初步检测 | 第57-58页 |
·凝集素基因原核表达载体构建及表达纯化 | 第58-62页 |
第四章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简历 | 第70页 |