| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1、前言 | 第10-18页 |
| 1.1 植物先天免疫 | 第10-12页 |
| 1.2 由病原相关分子模式触发的免疫反应(PTI) | 第12-13页 |
| 1.3 RLKs在植物先天免疫中发挥重要作用 | 第13-14页 |
| 1.4 RLCKs是一类特殊的受体类激酶 | 第14-16页 |
| 1.5 类受体胞质激酶AtBIK1在植物免疫反应中具有重要功能 | 第16-17页 |
| 1.6 本实验的目的意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-28页 |
| 2.1 材料、试剂、仪器设备 | 第18-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第18页 |
| 2.1.5 培养基 | 第18-19页 |
| 2.1.6 原生质体提取与转化所用缓冲液 | 第19-20页 |
| 2.1.7 引物序列 | 第20页 |
| 2.2 植物材料的处理及生长环境 | 第20-21页 |
| 2.2.1 拟南芥处理及生长环境 | 第20页 |
| 2.2.2 水稻处理及生长环境 | 第20-21页 |
| 2.3 DNA提取 | 第21页 |
| 2.4 RNA提取及反转录 | 第21-22页 |
| 2.5 PCR和qRT-PCR | 第22-23页 |
| 2.6 载体构建 | 第23-24页 |
| 2.7 氯化铯密度梯度离心法大提质粒 | 第24-25页 |
| 2.8 原生质体提取与转化 | 第25-26页 |
| 2.8.1 水稻原生质体提取与转化及亚细胞定位观察 | 第25页 |
| 2.8.2 拟南芥原生质体提取与转化 | 第25-26页 |
| 2.9 双元荧光素酶报告系统分析 | 第26页 |
| 2.10 蛋白提取及Western blotting | 第26页 |
| 2.11 原核表达分析及Western blotting | 第26页 |
| 2.12 OsBIK3基因表达分析 | 第26-27页 |
| 2.13 突变体水稻生长表型观察 | 第27页 |
| 2.13.1 种子发芽观察 | 第27页 |
| 2.13.2 株高和夹角测定 | 第27页 |
| 2.14 突变体水稻的抗病表型观察 | 第27页 |
| 2.14.1 活体接种细菌性白叶枯病原菌与病斑调查 | 第27页 |
| 2.14.2 离体接种真菌性稻瘟病菌及其调查 | 第27页 |
| 2.15 转基因水稻病程相关蛋白基因的表达 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-43页 |
| 3.1 OsBIK3基因编码一个类受体蛋白激酶 | 第28-30页 |
| 3.1.1 OsBIK3基因全长cDNA序列的分离 | 第28页 |
| 3.1.2 序列测序及分析 | 第28-30页 |
| 3.2 OsBIK3基因的表达分析 | 第30-32页 |
| 3.2.1 OsBIK3基因在叶片和茎中高表达 | 第30-31页 |
| 3.2.2 OsBIK3基因受到病原菌诱导表达 | 第31页 |
| 3.2.3 OsBIK3基因受到激素诱导表达 | 第31-32页 |
| 3.3 OsBIK3基因激活拟南芥bikl突变体的PTI途径 | 第32-33页 |
| 3.4 OsBIK3基因定位在细胞膜上 | 第33-35页 |
| 3.4.1 OsBIK3基因在拟南芥中的定位分析 | 第33页 |
| 3.4.2 OsBIK3基因在水稻中的定位分析 | 第33-35页 |
| 3.5 bik3突变体的分子鉴定 | 第35-36页 |
| 3.5.1 bik3突变体PCR鉴定 | 第35页 |
| 3.5.2 bik3突变体的RNA鉴定 | 第35-36页 |
| 3.6 bik3突变体中T-DNA插入OsBIK3基因的外显子上 | 第36-37页 |
| 3.7 bik3突变体的生长发育受影响 | 第37-38页 |
| 3.8 bik3突变体的抗病鉴定 | 第38-40页 |
| 3.8.1 bik3突变体对白叶枯的抗性下降 | 第38-40页 |
| 3.8.2 bik3突变体对稻瘟病的抗性下降 | 第40页 |
| 3.9 病程相关基因在突变体中的表达 | 第40-41页 |
| 3.10 OsBIK3超量表达载体构建 | 第41-42页 |
| 3.11 His融合蛋白的原核表达分析 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 OsBIK3是一个定位在细胞膜上的具有重要功能的RLCK | 第43页 |
| 4.2 OsBIK3基因影响植株的形态 | 第43-44页 |
| 4.3 OsBIK3基因缺失引起抗病性下降 | 第44-46页 |
| 5. 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
