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耐辐射异常球菌冷激蛋白的功能鉴定及转录组分析

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第一章 绪论第16-37页
   ·耐辐射异常球菌概述第16-27页
     ·耐辐射异常球菌属的种类及进化地位第16-17页
     ·耐辐射异常球菌的生理生化特性第17-18页
     ·电离辐射及UV 辐射抗性第18-20页
     ·干燥抗性第20-21页
     ·耐辐射异常球菌的色素合成第21-22页
     ·DNA 损伤修复重要功能蛋白第22-26页
     ·基因资源的发掘利用第26-27页
   ·细菌冷激蛋白研究进展第27-34页
     ·冷激蛋白概述第27-31页
     ·冷激蛋白的作用机理第31-34页
   ·耐辐射异常球菌Csp 蛋白研究进展第34-35页
   ·立题依据第35-36页
   ·技术路线第36-37页
第二章 耐辐射异常球菌R1 冷激蛋白Csp 的功能鉴定第37-70页
   ·材料与方法第37-54页
     ·实验菌株与质粒第37页
     ·培养基、生化试剂及耗材第37-39页
     ·主要仪器设备第39-40页
     ·DNA 提取和转化第40-42页
     ·RNA 提取和纯化第42-44页
     ·RNA 反转录合成cDNA第44页
     ·PCR 反应第44-47页
     ·正常和冷激条件下生长曲线的测定第47-48页
     ·Csp 的免疫电镜观察第48-49页
     ·△csp 突变株Biolog 分析第49-50页
     ·△csp 回补菌株构建第50页
     ·Csp 融合表达载体和GST 表达载体的构建第50页
     ·Csp 蛋白诱导第50-51页
     ·GST BindTM 纯化试剂盒进行蛋白纯化第51-52页
     ·凝胶阻滞实验第52-54页
   ·结果第54-67页
     ·csp 突变株的构建第54页
     ·Csp 的冷诱导特性第54-56页
     ·正常及冷胁迫条件下细胞的生长第56-58页
     ·△csp 突变株Biolog 分析第58-60页
     ·Csp 的细胞定位第60页
     ·△csp 回补菌株构建第60-61页
     ·Csp 蛋白表达载体构建第61-63页
     ·Csp 蛋白表达纯化第63-64页
     ·凝胶阻滞实验研究Csp 与DNA 的结合第64-67页
   ·讨论第67-70页
     ·Csp 的冷激蛋白功能第67-68页
     ·Csp 结合ssDNA第68-70页
第三章 耐辐射异常球菌R1 冷激蛋白Csp 的转录组分析第70-89页
   ·材料与方法第70-73页
     ·菌株、实验仪器及试剂第70页
     ·转录组处理、测序及数据分析第70-72页
     ·实时定量PCR 及结果处理第72页
     ·UV 辐照存活曲线的测定第72页
     ·类胡萝卜素含量测定第72页
     ·透射电镜观察csp 突变对细胞包膜结构的影响第72页
     ·显影质谱研究csp 突变对化合物分布的影响第72-73页
   ·结果第73-84页
     ·转录组数据概况第73-74页
     ·主要代谢途径表达谱第74-76页
     ·类胡萝卜素合成基因表达第76-77页
     ·DNA 损伤修复和氧化抗性基因表达第77-81页
     ·细胞包膜合成基因表达第81-84页
   ·讨论第84-89页
     ·csp 突变对主要代谢途径的影响第84-85页
     ·Csp 对色素合成和细胞壁结构的影响第85-86页
     ·Csp 对细胞UV、氧化胁迫抗性的作用第86-89页
第四章 结论第89-90页
参考文献第90-104页
附录第104-114页
致谢第114-115页
作者简历第115-116页

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