摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-16页 |
第一章 绪论 | 第16-37页 |
·耐辐射异常球菌概述 | 第16-27页 |
·耐辐射异常球菌属的种类及进化地位 | 第16-17页 |
·耐辐射异常球菌的生理生化特性 | 第17-18页 |
·电离辐射及UV 辐射抗性 | 第18-20页 |
·干燥抗性 | 第20-21页 |
·耐辐射异常球菌的色素合成 | 第21-22页 |
·DNA 损伤修复重要功能蛋白 | 第22-26页 |
·基因资源的发掘利用 | 第26-27页 |
·细菌冷激蛋白研究进展 | 第27-34页 |
·冷激蛋白概述 | 第27-31页 |
·冷激蛋白的作用机理 | 第31-34页 |
·耐辐射异常球菌Csp 蛋白研究进展 | 第34-35页 |
·立题依据 | 第35-36页 |
·技术路线 | 第36-37页 |
第二章 耐辐射异常球菌R1 冷激蛋白Csp 的功能鉴定 | 第37-70页 |
·材料与方法 | 第37-54页 |
·实验菌株与质粒 | 第37页 |
·培养基、生化试剂及耗材 | 第37-39页 |
·主要仪器设备 | 第39-40页 |
·DNA 提取和转化 | 第40-42页 |
·RNA 提取和纯化 | 第42-44页 |
·RNA 反转录合成cDNA | 第44页 |
·PCR 反应 | 第44-47页 |
·正常和冷激条件下生长曲线的测定 | 第47-48页 |
·Csp 的免疫电镜观察 | 第48-49页 |
·△csp 突变株Biolog 分析 | 第49-50页 |
·△csp 回补菌株构建 | 第50页 |
·Csp 融合表达载体和GST 表达载体的构建 | 第50页 |
·Csp 蛋白诱导 | 第50-51页 |
·GST BindTM 纯化试剂盒进行蛋白纯化 | 第51-52页 |
·凝胶阻滞实验 | 第52-54页 |
·结果 | 第54-67页 |
·csp 突变株的构建 | 第54页 |
·Csp 的冷诱导特性 | 第54-56页 |
·正常及冷胁迫条件下细胞的生长 | 第56-58页 |
·△csp 突变株Biolog 分析 | 第58-60页 |
·Csp 的细胞定位 | 第60页 |
·△csp 回补菌株构建 | 第60-61页 |
·Csp 蛋白表达载体构建 | 第61-63页 |
·Csp 蛋白表达纯化 | 第63-64页 |
·凝胶阻滞实验研究Csp 与DNA 的结合 | 第64-67页 |
·讨论 | 第67-70页 |
·Csp 的冷激蛋白功能 | 第67-68页 |
·Csp 结合ssDNA | 第68-70页 |
第三章 耐辐射异常球菌R1 冷激蛋白Csp 的转录组分析 | 第70-89页 |
·材料与方法 | 第70-73页 |
·菌株、实验仪器及试剂 | 第70页 |
·转录组处理、测序及数据分析 | 第70-72页 |
·实时定量PCR 及结果处理 | 第72页 |
·UV 辐照存活曲线的测定 | 第72页 |
·类胡萝卜素含量测定 | 第72页 |
·透射电镜观察csp 突变对细胞包膜结构的影响 | 第72页 |
·显影质谱研究csp 突变对化合物分布的影响 | 第72-73页 |
·结果 | 第73-84页 |
·转录组数据概况 | 第73-74页 |
·主要代谢途径表达谱 | 第74-76页 |
·类胡萝卜素合成基因表达 | 第76-77页 |
·DNA 损伤修复和氧化抗性基因表达 | 第77-81页 |
·细胞包膜合成基因表达 | 第81-84页 |
·讨论 | 第84-89页 |
·csp 突变对主要代谢途径的影响 | 第84-85页 |
·Csp 对色素合成和细胞壁结构的影响 | 第85-86页 |
·Csp 对细胞UV、氧化胁迫抗性的作用 | 第86-89页 |
第四章 结论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-104页 |
附录 | 第104-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
作者简历 | 第115-116页 |