摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 引言 | 第12-23页 |
·叶绿体蛋白质组学研究进展 | 第12-17页 |
·蛋白组学研究的相关技术 | 第12-14页 |
·叶绿体蛋白组学的最新进展 | 第14-17页 |
·展望 | 第17页 |
·叶绿体转化的进展 | 第17-20页 |
·叶绿体转化的优点 | 第18页 |
·叶绿体转化的方法 | 第18-19页 |
·叶绿体转化的筛选标记 | 第19页 |
·叶绿体转化待解决的问题 | 第19-20页 |
·抗草甘膦植物的研究进展 | 第20-22页 |
·草甘膦的作用机制 | 第20-21页 |
·抗草甘膦作物遗传改良的策略 | 第21页 |
·EPSPS 基因的克隆 | 第21页 |
·抗草甘膦作物的研究现状 | 第21-22页 |
·研究的目的和意义 | 第22-23页 |
·研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 水稻玉米叶绿体蛋白组学 | 第23-37页 |
·实验材料和仪器 | 第23页 |
·实验材料 | 第23页 |
·实验仪器 | 第23页 |
·试剂 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-25页 |
·叶绿体的提取 | 第23-24页 |
·叶绿体的纯化 | 第24页 |
·叶绿体纯度的检测 | 第24页 |
·叶绿体蛋白的提取 | 第24页 |
·蛋白质浓度的测定(Bradford 法测蛋白浓度) | 第24-25页 |
·SDS-PAGE | 第25页 |
·单向电泳的胶内酶解(In-gel Digest of a gel band from SDS-PAGE) | 第25页 |
·二级质谱(LC-ESI-MS/MS) | 第25页 |
·实验结果 | 第25-35页 |
·水稻叶绿体超速离心 | 第25-26页 |
·水稻叶绿体纯度检测 | 第26-27页 |
·Bradford 法测蛋白浓度标准曲线 | 第27-28页 |
·水稻叶绿体蛋白质电泳图 | 第28-29页 |
·水稻叶绿体蛋白质的二级质谱结果 | 第29-31页 |
·玉米叶绿体超速离心 | 第31页 |
·玉米叶绿体纯度检测 | 第31-32页 |
·玉米叶绿体蛋白质的电泳图 | 第32-33页 |
·玉米叶绿体蛋白质的二级质谱结果 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
·水稻、玉米叶绿体蛋白质 | 第35-37页 |
第三章 玉米叶绿体转化体系的建立 | 第37-55页 |
·实验材料和仪器 | 第37-38页 |
·实验材料 | 第37页 |
·实验仪器 | 第37页 |
·常用的试剂和工具酶 | 第37页 |
·培养基 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-43页 |
·玉米叶绿体分离和叶绿体基因组的提取纯化 | 第38页 |
·同源载体构建 | 第38-39页 |
·玻璃奶法纯化回收DNA 片段 | 第39-40页 |
·大肠杆菌热激感受态细胞的制备 | 第40页 |
·连接反应 | 第40页 |
·质粒DNA 或连接产物的转化热激感受态细胞 | 第40页 |
·一步法鉴定 | 第40页 |
·碱法少量快速抽提质粒DNA | 第40-41页 |
·酶切反应 | 第41页 |
·玉米幼胚的分离及愈伤组织的诱导 | 第41页 |
·转化受体材料的准备 | 第41页 |
·微粒子弹(DNA coated microprojectiles)的制备 | 第41-42页 |
·装备基因枪 | 第42页 |
·转化玉米愈伤的过渡培养及抗性筛选培养 | 第42-43页 |
·实验结果与分析 | 第43-54页 |
·玉米 16SrRNA 启动子和 rbcL 终止子的克隆 | 第43-44页 |
·玉米叶绿体同源片段的构建 | 第44-48页 |
·玉米叶绿体转化载体的构建 | 第48-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
第四章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第61页 |