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水稻、玉米叶绿体蛋白组学的研究和玉米叶绿体转化体系的建立

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 引言第12-23页
   ·叶绿体蛋白质组学研究进展第12-17页
     ·蛋白组学研究的相关技术第12-14页
     ·叶绿体蛋白组学的最新进展第14-17页
     ·展望第17页
   ·叶绿体转化的进展第17-20页
     ·叶绿体转化的优点第18页
     ·叶绿体转化的方法第18-19页
     ·叶绿体转化的筛选标记第19页
     ·叶绿体转化待解决的问题第19-20页
   ·抗草甘膦植物的研究进展第20-22页
     ·草甘膦的作用机制第20-21页
     ·抗草甘膦作物遗传改良的策略第21页
     ·EPSPS 基因的克隆第21页
     ·抗草甘膦作物的研究现状第21-22页
   ·研究的目的和意义第22-23页
     ·研究的目的和意义第22-23页
第二章 水稻玉米叶绿体蛋白组学第23-37页
   ·实验材料和仪器第23页
     ·实验材料第23页
     ·实验仪器第23页
     ·试剂第23页
   ·实验方法第23-25页
     ·叶绿体的提取第23-24页
     ·叶绿体的纯化第24页
     ·叶绿体纯度的检测第24页
     ·叶绿体蛋白的提取第24页
     ·蛋白质浓度的测定(Bradford 法测蛋白浓度)第24-25页
     ·SDS-PAGE第25页
     ·单向电泳的胶内酶解(In-gel Digest of a gel band from SDS-PAGE)第25页
     ·二级质谱(LC-ESI-MS/MS)第25页
   ·实验结果第25-35页
     ·水稻叶绿体超速离心第25-26页
     ·水稻叶绿体纯度检测第26-27页
     ·Bradford 法测蛋白浓度标准曲线第27-28页
     ·水稻叶绿体蛋白质电泳图第28-29页
     ·水稻叶绿体蛋白质的二级质谱结果第29-31页
     ·玉米叶绿体超速离心第31页
     ·玉米叶绿体纯度检测第31-32页
     ·玉米叶绿体蛋白质的电泳图第32-33页
     ·玉米叶绿体蛋白质的二级质谱结果第33-35页
   ·讨论第35-37页
     ·水稻、玉米叶绿体蛋白质第35-37页
第三章 玉米叶绿体转化体系的建立第37-55页
   ·实验材料和仪器第37-38页
     ·实验材料第37页
     ·实验仪器第37页
     ·常用的试剂和工具酶第37页
     ·培养基第37-38页
   ·实验方法第38-43页
     ·玉米叶绿体分离和叶绿体基因组的提取纯化第38页
     ·同源载体构建第38-39页
     ·玻璃奶法纯化回收DNA 片段第39-40页
     ·大肠杆菌热激感受态细胞的制备第40页
     ·连接反应第40页
     ·质粒DNA 或连接产物的转化热激感受态细胞第40页
     ·一步法鉴定第40页
     ·碱法少量快速抽提质粒DNA第40-41页
     ·酶切反应第41页
     ·玉米幼胚的分离及愈伤组织的诱导第41页
     ·转化受体材料的准备第41页
     ·微粒子弹(DNA coated microprojectiles)的制备第41-42页
     ·装备基因枪第42页
     ·转化玉米愈伤的过渡培养及抗性筛选培养第42-43页
   ·实验结果与分析第43-54页
     ·玉米 16SrRNA 启动子和 rbcL 终止子的克隆第43-44页
     ·玉米叶绿体同源片段的构建第44-48页
     ·玉米叶绿体转化载体的构建第48-54页
   ·讨论第54-55页
第四章 结论第55-56页
参考文献第56-60页
致谢第60-61页
作者简历第61页
攻读硕士期间发表论文第61页

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