| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 图表清单 | 第10-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-26页 |
| ·PRRSV的分子生物学 | 第13-18页 |
| ·病毒的分类地位 | 第13页 |
| ·病毒的形态及理化特性 | 第13-14页 |
| ·病毒的基因组结构 | 第14页 |
| ·非结构蛋白 | 第14-15页 |
| ·主要结构蛋白 | 第15-16页 |
| ·次要结构蛋白 | 第16-18页 |
| ·PRRSV的细胞嗜性与受体 | 第18-20页 |
| ·硫酸乙酰肝素 | 第19页 |
| ·唾液酸粘附素 | 第19页 |
| ·猴波形蛋白 | 第19页 |
| ·CD163 | 第19-20页 |
| ·CD151 | 第20页 |
| ·PRRSV的致病性 | 第20-21页 |
| ·PRRSV对宿主的侵入 | 第20-21页 |
| ·PRRSV的抗体依赖性增强作用 | 第21页 |
| ·PRRSV的变异 | 第21页 |
| ·糖基化在PRRSV研究中的应用 | 第21-24页 |
| ·糖基化的研究 | 第21-22页 |
| ·糖基化与PRRSV | 第22-24页 |
| ·GP5蛋白的糖基化研究状况 | 第22-23页 |
| ·GP2a和GP4的糖基化研究 | 第23-24页 |
| ·GP3蛋白的糖基化研究 | 第24页 |
| ·研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 PRRSV GP3蛋白单糖基化位点突变株的构建及生物学特性分析 | 第26-42页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·细胞,毒株,菌株 | 第26页 |
| ·试剂与仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-35页 |
| ·糖基化位点分析 | 第26-27页 |
| ·引物设计及合成 | 第27-28页 |
| ·含糖基化位点突变质粒的构建 | 第28-31页 |
| ·全长突变质粒的构建 | 第31页 |
| ·病毒的拯救 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的线性化 | 第31页 |
| ·含糖基化位点突变的全长DcNA的体外转录 | 第31-32页 |
| ·体外转录获得RNA的纯化 | 第32页 |
| ·病毒RNA的体外转染 | 第32页 |
| ·病毒的传代 | 第32页 |
| ·PRRSV HuN4-F112株含GP3突变糖基化位点感染性克隆的鉴定 | 第32-35页 |
| ·拯救病毒的生物学特性分析 | 第35页 |
| ·病毒细胞TCID_(50)测定 | 第35页 |
| ·拯救毒株的细胞病变观察 | 第35页 |
| ·拯救病毒生长曲线绘制 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-40页 |
| ·PRRSV特异性引物检测结果 | 第35-36页 |
| ·拯救病毒ORF3序列测定 | 第36-37页 |
| ·GENOMIC MALER检测结果 | 第37-38页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第38页 |
| ·拯救毒株的细胞病变观察 | 第38-39页 |
| ·拯救病毒的TCID_(50)测定 | 第39-40页 |
| ·拯救病毒生长曲线的绘制 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 PRRSV GP3蛋白多糖基化位点突变株的构建及生物学特性分析 | 第42-55页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·细胞,毒株,菌株 | 第42页 |
| ·仪器与试剂 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-46页 |
| ·多点突变全长质粒的构建 | 第42-44页 |
| ·病毒的拯救 | 第44页 |
| ·拯救病毒的鉴定 | 第44-45页 |
| ·拯救病毒生物学特性分析 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-53页 |
| ·PRRSV引物检测结果 | 第46-47页 |
| ·检测GENOMIC MARKER | 第47-48页 |
| ·拯救病毒GP3蛋白序列测定 | 第48-49页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第49页 |
| ·细胞病变 | 第49-50页 |
| ·拯救病毒的TCID_(50)测定 | 第50页 |
| ·生长曲线的检测 | 第50页 |
| ·荧光定量PCR检测拯救病毒的表达量 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 全文总结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 作者简历 | 第67页 |
