| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 茯苓的资源分布 | 第11页 |
| 1.2 茯苓的生长习性 | 第11-12页 |
| 1.3 茯苓的药用价值 | 第12-13页 |
| 1.4 茯苓遗传育种现状 | 第13-14页 |
| 1.5 分子标记技术在茯苓中的应用 | 第14-16页 |
| 1.6 真菌遗传转化 | 第16-19页 |
| 1.6.1 遗传转化方法 | 第17-18页 |
| 1.6.2 启动子 | 第18-19页 |
| 1.6.3 筛选标记 | 第19页 |
| 1.7 立题依据和意义 | 第19-21页 |
| 2 茯苓菌株的生物学性状研究 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第21页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 供试培养基 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 菌落形态的研究 | 第21-22页 |
| 2.2.2 生长速度 | 第22-23页 |
| 2.2.3 不同碳氮源各菌株的生长情况 | 第23页 |
| 2.2.4 高渗培养基对各菌株的生长情况 | 第23页 |
| 2.2.5 生物学分析 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-31页 |
| 2.3.1 菌落形态和生长速度 | 第23-25页 |
| 2.3.2 不同碳氮源对各菌株生长影响 | 第25-26页 |
| 2.3.3 高渗培养基对各菌株的生长影响 | 第26-27页 |
| 2.3.4 聚类分析 | 第27-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-33页 |
| 3 茯苓菌株的ISSR分析 | 第33-45页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第33-34页 |
| 3.1.1 供试菌株 | 第33页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第33页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第33-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-37页 |
| 3.2.1 菌丝培养 | 第34页 |
| 3.2.2 DNA提取和检测 | 第34页 |
| 3.2.3 ISSR引物筛选 | 第34-35页 |
| 3.2.4 退火温度的筛选 | 第35页 |
| 3.2.5 ISSR分析 | 第35-36页 |
| 3.2.6 数据分析 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-43页 |
| 3.3.1 DNA质量检测 | 第37页 |
| 3.3.2 引物筛选 | 第37-38页 |
| 3.3.3 退火温度的筛选 | 第38-39页 |
| 3.3.4 ISSR分析 | 第39-40页 |
| 3.3.5 聚类分析 | 第40-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-45页 |
| 4 PEG介导的茯苓原生质体转化研究 | 第45-62页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第45-46页 |
| 4.1.1 材料 | 第45页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第45页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第45-46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-55页 |
| 4.2.1 菌丝培养 | 第46-47页 |
| 4.2.2 潮霉素抑制茯苓生长的最低浓度的筛选 | 第47页 |
| 4.2.3 转化载体的构建 | 第47-52页 |
| 4.2.4 PEG介导的茯苓原生质体转化 | 第52-53页 |
| 4.2.5 转化子的PCR验证 | 第53页 |
| 4.2.6 转化子的Southern blot验证 | 第53-55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-60页 |
| 4.3.1 潮霉素抑制茯苓生长的最低浓度的筛选 | 第55页 |
| 4.3.2 转化载体的构建 | 第55-57页 |
| 4.3.3 PEG介导的茯苓原生质体转化 | 第57-58页 |
| 4.3.4 转化子PCR验证 | 第58页 |
| 4.3.5 转化子Southern blot验证 | 第58-60页 |
| 4.4 讨论 | 第60-62页 |
| 5 结论与创新点 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录A | 第73-76页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第76页 |