| 前言 | 第11-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-69页 |
| 第一章 生长激素释放因子和垂体腺苷酸环化酶激活肽的结构与功能 | 第15-39页 |
| 第一节 生长激素释放因子的结构与功能 | 第15-28页 |
| 1 GRF 研究的兴起 | 第15-16页 |
| 2 GRF 的产生部位、生理作用及机理 | 第16-18页 |
| 3 GRF 的结构及结构与功能的关系 | 第18-23页 |
| 4 GRF 在畜牧业上的应用 | 第23-25页 |
| 5 GRF 的制备 | 第25-28页 |
| 第二节 垂体腺苷酸环化酶激活肽的结构与功能 | 第28-39页 |
| 1 PACAP 的发现 | 第28页 |
| 2 PACAP 基因 | 第28-30页 |
| 3 PACAP 的结构及其受体 | 第30-32页 |
| 4 PACAP 在体内的分布 | 第32-33页 |
| 5 PACAP 的作用机理 | 第33-34页 |
| 6 PACAP 的结构与功能的关系 | 第34-35页 |
| 7 PACAP 生物功能 | 第35-37页 |
| 8 PACAP 的应用前景 | 第37-39页 |
| 第二章 基因转染技术 | 第39-69页 |
| 1 基因转染的载体 | 第39-45页 |
| 2 基因转染的方法 | 第45-59页 |
| 3 肝脏的基因转染 | 第59-60页 |
| 4 肌肉组织的基因转染 | 第60-67页 |
| 5 促生长核酸生物制剂 | 第67-69页 |
| 第二篇 研究内容 | 第69-151页 |
| 第一章 GRF、PACAP、及GRF-PACAP 基因真核表达载体的构建 | 第69-97页 |
| 1 材料与方法 | 第72-78页 |
| 1.1 材料 | 第72页 |
| 1.2 方法 | 第72-78页 |
| 2 结果 | 第78-92页 |
| 2.1 pIRE51-PACAP 真核表达载体的构建 | 第78-84页 |
| 2.2 pIRE51-neo-GRF 真核表达载体的构建 | 第84-88页 |
| 2.3 pIRES-GRF-PACAP 真核表达载体的构建 | 第88-92页 |
| 3 讨论 | 第92-96页 |
| 3.1 GRF、PACAP 基因的设计和合成 | 第92-93页 |
| 3.2 PCR 反应系统的条件优选 | 第93-94页 |
| 3.3 真核表达载体的构建 | 第94-95页 |
| 3.4 PCR 快速筛选阳性菌落的方法 | 第95-96页 |
| 4 小结 | 第96-97页 |
| 第二章 重组质粒在 CHO 细胞中瞬时表达及检测 | 第97-117页 |
| 1 材料与方法 | 第97-105页 |
| 1.1 主要材料 | 第97-98页 |
| 1.2 方法 | 第98-105页 |
| 2 结果 | 第105-112页 |
| 2.1 三种重组质粒的制备 | 第105-106页 |
| 2.2 总 RNA 的提取 | 第106-107页 |
| 2.3 RT-PCR | 第107页 |
| 2.4 CHO 表达GRF 的Dot-ELISA | 第107-108页 |
| 2.5 CHO 表达PACAP 的Dot-ELISA | 第108页 |
| 2.6 CHO 表达GRF 的Western blot | 第108-109页 |
| 2.7 CHO 表达这PACAP 的Western blot | 第109-110页 |
| 2.8 表达产物生学活性的测定 | 第110-112页 |
| 3 讨论 | 第112-115页 |
| 3.1 重组质粒的提取与纯化 | 第112页 |
| 3.2 GRF 和PACAP 在CHO 细胞的表达 | 第112-114页 |
| 3.3 表达产物的生物学活性 | 第114-115页 |
| 4 小结 | 第115-117页 |
| 第三章 微球介导的 GRF、PACAP 、GRF-PACAP 重组质粒在动物体内的表达 | 第117-151页 |
| 1 材料与方法 | 第117-125页 |
| 1.1 材料 | 第117-118页 |
| 1.2 方法 | 第118-125页 |
| 2 结果 | 第125-140页 |
| 2.1 质粒微球的制备 | 第125-131页 |
| 2.2 重组质粒微球对小鼠生长的影响 | 第131-136页 |
| 2.3 微球介导的重组质粒对獭兔生长的影响 | 第136-140页 |
| 3 讨论 | 第140-149页 |
| 3.1 关于质粒的大量制备 | 第140-141页 |
| 3.2 微球的制备 | 第141页 |
| 3.3 微球介导重组质粒在活体小鼠肌肉中的表达 | 第141-142页 |
| 3.4 微球介导重组质粒DNA 对小鼠、獭兔生长的影响 | 第142-145页 |
| 3.5 质粒注射部位、剂量、方式对动物生长的影响 | 第145-146页 |
| 3.6 重组质粒对动物血清IGF-I 浓度的影响 | 第146页 |
| 3.7 微球介导基因调控动物生长的优缺点 | 第146-147页 |
| 3.8 基因药物 | 第147-149页 |
| 4 小结 | 第149-151页 |
| 结论 | 第151-153页 |
| 参考文献 | 第153-181页 |
| 中文摘要 | 第181-185页 |
| 英文摘要 | 第185页 |
| 个人简历 | 第188-191页 |
| 致谢 | 第191页 |
