| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-18页 |
| 1.1 课题来源及研究的背景意义 | 第11-12页 |
| 1.2 乳酸杆菌S-层蛋白的结构 | 第12-13页 |
| 1.3 乳酸杆菌S-层蛋白的功能 | 第13-14页 |
| 1.3.1 S-层蛋白对胆盐及消化酶的耐受能力 | 第13页 |
| 1.3.2 S-层蛋白参与乳酸杆菌对宿主的黏附作用 | 第13-14页 |
| 1.3.3 S-层蛋白抑制病原菌对宿主细胞的黏附及侵入作用 | 第14页 |
| 1.4 乳酸杆菌S-层蛋白的免疫调控作用 | 第14-16页 |
| 1.5 国内外文献综述的简析 | 第16页 |
| 1.6 本课题主要研究内容 | 第16-17页 |
| 1.7 技术路线 | 第17-18页 |
| 第2章 材料和方法 | 第18-31页 |
| 2.1 材料及仪器 | 第18-22页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第18-20页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.3 培养基 | 第22页 |
| 2.1.4 菌种及细胞来源 | 第22页 |
| 2.2 乳酸杆菌及S.sonnei的培养 | 第22-23页 |
| 2.3 乳酸杆菌S-层蛋白的提取、纯化及鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.1 乳酸杆菌S-层蛋白的提取 | 第23页 |
| 2.3.2 乳酸杆菌S-层蛋白的纯化 | 第23页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE电泳测定S-层蛋白分子量 | 第23-24页 |
| 2.3.4 BCA法测定S-层蛋白浓度 | 第24页 |
| 2.4 乳酸杆菌的S-层蛋白对HT-29细胞的干预处理 | 第24-25页 |
| 2.5 MTT法检测HT-29细胞的活性 | 第25页 |
| 2.6 台盼蓝染色实验 | 第25-26页 |
| 2.7 NO试剂盒测HT-29细胞上清液中NO的含量变化 | 第26页 |
| 2.8 ELISA法测HT-29细胞上清液中细胞因子IL-8、IL-10、TNF-α、IL-1β的含量变化 | 第26页 |
| 2.9 RT-PCR法测定HT-29细胞中IL-8、IL-10、TNF-α、IL-1β的mRNA表达情况 | 第26-28页 |
| 2.10 流式细胞术测定细胞周期 | 第28页 |
| 2.11 不同处理对HT-29细胞Caspase-1 和Caspase-3 活性的影响 | 第28-29页 |
| 2.12 流式细胞术测定细胞凋亡 | 第29页 |
| 2.13 Western Blot测定HT-29细胞内MAPK信号途径中ERK、p-ERK、p38、p-p38、JNK和p-JNK蛋白表达量的变化 | 第29-30页 |
| 2.14 数据处理及绘图 | 第30-31页 |
| 第3章 乳酸杆菌的S-层蛋白抑制S.sonnei对细胞增殖作用及形态影响的研究 | 第31-42页 |
| 3.1 乳酸杆菌S-层蛋白的分离纯化 | 第31-33页 |
| 3.1.1 乳酸杆菌S-层蛋白的SDS-PAGE | 第31-32页 |
| 3.1.2 BCA法测定乳酸杆菌S-层蛋白的含量 | 第32-33页 |
| 3.2 MTT检测不同处理下HT-29细胞活性 | 第33-37页 |
| 3.2.1 不同浓度的S-层蛋白对HT-29细胞活性的影响 | 第33-35页 |
| 3.2.2 不同S.sonnei的感染复数对HT-29细胞活性的影响 | 第35-37页 |
| 3.3 不同处理下的HT-29细胞学研究 | 第37-39页 |
| 3.4 台盼蓝染色实验 | 第39-40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-42页 |
| 第4章 乳酸杆菌的S-层蛋白对细胞因子调节作用及对MAPK信号通路的研究 | 第42-63页 |
| 4.1 两种S-层蛋白对S.sonnei诱导NO产生的抑制作用 | 第42-44页 |
| 4.2 ELISA法测HT-29细胞上清液中IL-8、IL-10、TNF-α、IL-1β的含量变化 | 第44-50页 |
| 4.2.1 HT-29细胞上清液中IL-10的含量 | 第44-46页 |
| 4.2.2 HT-29细胞上清液中IL-8 的含量 | 第46-47页 |
| 4.2.3 HT-29细胞上清液中IL-1β的含量 | 第47-49页 |
| 4.2.4 HT-29细胞上清液中TNF-α的含量 | 第49-50页 |
| 4.3 RT-PCR法测定HT-29细胞中IL-8、IL-10、TNF-α、IL-1β的mRNA表达情况 | 第50-58页 |
| 4.3.1 HT-29细胞中IL-10的基因的表达水平 | 第50-51页 |
| 4.3.2 HT-29细胞中IL-8 的基因的表达水平 | 第51-53页 |
| 4.3.3 HT-29细胞中IL-1β的基因的表达水平 | 第53-55页 |
| 4.3.4 HT-29细胞中TNF-α的基因的表达水平 | 第55-58页 |
| 4.4 不同处理时对HT-29细胞MAPK信号通路的研究 | 第58-61页 |
| 4.4.1 M5-L的S-层蛋白对HT-29细胞MAPK通路的影响 | 第58页 |
| 4.4.2 Q8-L的S-层蛋白对HT-29细胞MAPK通路的影响 | 第58-61页 |
| 4.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第5章 乳酸杆菌的S-层蛋白拮抗S.sonnei对细胞凋亡的研究 | 第63-73页 |
| 5.1 两种S-层蛋白的不同处理对HT-29细胞周期的影响 | 第63-65页 |
| 5.2 两种S-层蛋白对HT-29细胞Caspase-1 和Caspase-3 活性影响 | 第65-68页 |
| 5.2.1 不同处理对HT-29细胞Caspase-1 活性的研究 | 第65-66页 |
| 5.2.2 不同处理对HT-29细胞Caspase-3 活性的研究 | 第66-68页 |
| 5.3 两种S-层蛋白的不同处理对HT-29细胞凋亡的影响 | 第68-71页 |
| 5.4 本章小结 | 第71-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
