摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 绪论 | 第10-22页 |
1.1 PAEs的理化性质和应用 | 第10-11页 |
1.1.1 PAEs的理化性质 | 第10-11页 |
1.1.2 PAEs的应用 | 第11页 |
1.2 PAEs在环境中的分布和危害 | 第11-14页 |
1.2.1 PAEs在环境中的分布 | 第11-12页 |
1.2.2 PAEs对环境的危害 | 第12页 |
1.2.3 PAEs对人体的危害 | 第12-14页 |
1.3 微生物代谢PAEs的研究 | 第14-15页 |
1.4 酯酶简介 | 第15-18页 |
1.4.1 酯酶的概述 | 第15-16页 |
1.4.2 酯酶的分类 | 第16-17页 |
1.4.3 酯酶的催化机制 | 第17-18页 |
1.4.4 酯酶的应用 | 第18页 |
1.5 信息学技术 | 第18-20页 |
1.5.1 同源建模 | 第18-19页 |
1.5.2 分子对接 | 第19页 |
1.5.3 定点突变 | 第19-20页 |
1.6 本课题研究意义和目的 | 第20-22页 |
第2章 Acinetobacter sp. LMB-5降解特性的研究 | 第22-31页 |
2.1 前言 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22-23页 |
2.2.1 菌株来源 | 第22页 |
2.2.2 主要溶液配方和试剂 | 第22-23页 |
2.2.3 主要仪器 | 第23页 |
2.3 实验方法 | 第23-25页 |
2.3.1 温度和pH对LMB-5降解速率的影响 | 第23-24页 |
2.3.2 LMB-5的降解底物谱 | 第24页 |
2.3.3 LMB-5的降解动力学 | 第24页 |
2.3.4 LMB-5降解DBP的代谢途径 | 第24-25页 |
2.4 结果和讨论 | 第25-30页 |
2.4.1 温度,pH对LMB-5降解性能的影响 | 第25-26页 |
2.4.2 底物特异性分析 | 第26-27页 |
2.4.3 降解动力学研究 | 第27-29页 |
2.4.4 代谢途径的推测 | 第29-30页 |
2.5 本章小结 | 第30-31页 |
第3章 基因的克隆表达和酯酶酶学性质的研究 | 第31-52页 |
3.1 前言 | 第31页 |
3.2 实验材料 | 第31-35页 |
3.2.1 菌株和质粒 | 第31页 |
3.2.2 主要试剂 | 第31-32页 |
3.2.3 主要溶液配方 | 第32-34页 |
3.2.4 主要仪器 | 第34-35页 |
3.3 实验方法 | 第35-43页 |
3.3.1 实验流程 | 第35页 |
3.3.2 基因组测序 | 第35-36页 |
3.3.3 酯酶基因片段的挖掘及序列分析 | 第36-37页 |
3.3.4 体外克隆及表达 | 第37-41页 |
3.3.5 酯酶活性验证 | 第41页 |
3.3.6 基本酶学性质 | 第41-42页 |
3.3.7 酯酶水解DBP的产物 | 第42-43页 |
3.4 结果和讨论 | 第43-51页 |
3.4.1 酯酶信息学分析 | 第43-44页 |
3.4.2 体外克隆表达 | 第44-47页 |
3.4.3 酶活性验证 | 第47页 |
3.4.4 基本酶学性质 | 第47-50页 |
3.4.5 酯酶转化DBP的产物 | 第50-51页 |
3.5 本章小结 | 第51-52页 |
第4章 酯酶的同源建模和定点突变 | 第52-61页 |
4.1 前言 | 第52页 |
4.2 实验材料 | 第52-53页 |
4.2.1 菌株和质粒 | 第52页 |
4.2.2 主要试剂 | 第52页 |
4.2.3 主要仪器 | 第52-53页 |
4.2.4 信息学分析数据库和运用软件 | 第53页 |
4.3 实验方法 | 第53-55页 |
4.3.1 模板筛选和序列比对 | 第53页 |
4.3.2 同源建模及评价分析 | 第53页 |
4.3.3 分子对接 | 第53页 |
4.3.4 选择突变位点 | 第53-54页 |
4.3.5 定点突变 | 第54-55页 |
4.3.6 突变型酯酶的耐热性 | 第55页 |
4.4 结果和讨论 | 第55-60页 |
4.4.1 同源建模 | 第55-56页 |
4.4.2 模型分析 | 第56-58页 |
4.4.3 分子对接 | 第58页 |
4.4.4 突变位点的选择 | 第58-59页 |
4.4.5 定点突变 | 第59-60页 |
4.4.6 耐热性的比较 | 第60页 |
4.5 本章小结 | 第60-61页 |
第5章 总结和展望 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
附录 | 第71-73页 |
致谢 | 第73页 |