| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 前言 | 第16-17页 |
| 文献回顾 | 第17-28页 |
| 第一部分 MICU1在糖尿病心肌病中的作用 | 第28-50页 |
| 1 材料 | 第28-30页 |
| 1.1 实验动物及细胞 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂 | 第28-29页 |
| 1.3 主要仪器 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-42页 |
| 2.1 动物实验实施方案 | 第30页 |
| 2.2 心脏石蜡切片制备 | 第30-31页 |
| 2.3 心肌组织免疫组化检测MICU1的表达及定位 | 第31-33页 |
| 2.4 构建心肌点注射腺病毒过表达MICU1小鼠模型 | 第33-34页 |
| 2.5 体式荧光显微镜观察腺病毒荧光表达 | 第34页 |
| 2.6 小动物超声检测心脏功能 | 第34页 |
| 2.7 心脏重量及心重/胫骨长度 | 第34页 |
| 2.8 体式荧光显微镜观察观察心肌大体样本 | 第34-35页 |
| 2.9 心脏冰冻切片制备 | 第35页 |
| 2.10 心肌组织麦胚凝集素染色检测心肌细胞横截面积 | 第35页 |
| 2.11 心肌组织Mito SOX?染色检测心肌细胞线粒体ROS的生成 | 第35-36页 |
| 2.12 Western blot检测心肌组织MICU1、caspase3及caspase9的蛋白表达水平 | 第36-39页 |
| 2.13 实时定量PCR检测不同周龄心肌组织MICU1及 α-MHC、β-MHC、ANF的m RNA表达水平 | 第39-41页 |
| 2.14 统计学分析 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-48页 |
| 3.1 糖尿病小鼠心肌组织MICU1的表达下调 | 第42-43页 |
| 3.2 心肌点注射腺病毒模型成功构建 | 第43-44页 |
| 3.3 MICU1改善糖尿病心肌病的心脏功能 | 第44页 |
| 3.4 MICU1抑制糖尿病心肌肥厚，减缓糖尿病心肌病的发展 | 第44-47页 |
| 3.5 MICU1抑制线粒体ROS生成，减少心肌细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第二部分 MICU1下调促进糖尿病心肌细胞凋亡的机制研究 | 第50-71页 |
| 1 材料 | 第50-52页 |
| 1.1 实验动物及细胞 | 第50页 |
| 1.2 主要试剂 | 第50-51页 |
| 1.3 主要仪器 | 第51-52页 |
| 2 方法 | 第52-62页 |
| 2.1 细胞实验分组 | 第52-54页 |
| 2.2 细胞培养所需液体的配制 | 第54页 |
| 2.3 H9C2心肌细胞系的培养、传代、冻存及复苏 | 第54-55页 |
| 2.4 腺病毒感染H9C2心肌细胞系 | 第55-56页 |
| 2.5 si RNA转染实验 | 第56-57页 |
| 2.6 Western Blot检测心肌细胞MICU1、PV、caspase3、caspase9和Cyto-c的蛋白表达水平 | 第57-58页 |
| 2.7 流式细胞术检测心肌细胞凋亡 | 第58-59页 |
| 2.8 TMRM检测心肌细胞膜电位 | 第59页 |
| 2.9 Rhod-2 检测心肌细胞线粒体钙静态及钙瞬变 | 第59-60页 |
| 2.10 Mito SOX~(?)染色检测心肌细胞线粒体ROS的生成 | 第60页 |
| 2.11 PDH活性检测试剂盒检测心肌细胞PDH活性 | 第60-61页 |
| 2.12 α-KGDH活性检测试剂盒检测心肌细胞PDH活性 | 第61页 |
| 2.13 NAD~+/NADH及NADP~+/NADPH在心肌细胞中的检测 | 第61页 |
| 2.14 心肌细胞GSH/GSSG的检测 | 第61-62页 |
| 2.15 统计学分析 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62-68页 |
| 3.1 下调MICU1促进心肌细胞凋亡 | 第62-63页 |
| 3.2 上调MICU1抑制心肌细胞凋亡 | 第63-64页 |
| 3.3 MICU1通过促进线粒体钙摄取抑制ROS，减轻高糖高脂诱导的心肌细胞凋亡 | 第64-66页 |
| 3.4 MICU1介导的线粒体钙摄取通过提高线粒体抗氧化能力抑制ROS生成 | 第66-67页 |
| 3.5 MICU1通过MCU促进线粒体钙摄取抑制心肌细胞凋亡 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| 第三部分 MICU1在糖尿病小鼠心脏中表达降低的机制 | 第71-81页 |
| 1 材料 | 第71-73页 |
| 1.1 实验动物及细胞 | 第71页 |
| 1.2 主要试剂 | 第71-72页 |
| 1.3 主要仪器 | 第72-73页 |
| 2 方法 | 第73-78页 |
| 2.1 MICU1启动子序列分析 | 第73页 |
| 2.2 染色质免疫共沉淀（Ch IP） | 第73-76页 |
| 2.3 细胞实验实施方案 | 第76-77页 |
| 2.4 Western Blot检测MICU1和SP1的蛋白表达水平 | 第77页 |
| 2.5 实时定量PCR检测心肌组织MICU1及SP1的m RNA表达水平 | 第77页 |
| 2.6 利用基因芯片分析SP1与MICU1的相关性 | 第77页 |
| 2.7 统计学分析 | 第77-78页 |
| 3 结果 | 第78-80页 |
| 3.1 SP1直接转录调节MICU1的表达 | 第78-79页 |
| 3.2 组织水平MICU1的表达与SP1呈正相关 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-81页 |
| 小结 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 个人简历和研究成果 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
