| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要 | 第11-15页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 文献回顾 | 第19-30页 |
| 第一部分 GDNF在 6-OHDA诱导的DA能神经细胞损伤早期应激性高表达 | 第30-51页 |
| 1 材料 | 第30-32页 |
| 1.1 实验动物及细胞株 | 第30页 |
| 1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
| 1.3 质粒及细菌 | 第31页 |
| 1.4 引物 | 第31-32页 |
| 2 方法 | 第32-42页 |
| 2.1 损伤早期的PD大鼠模型的构建 | 第32页 |
| 2.2 行为学方法 | 第32-33页 |
| 2.3 损伤早期的DA能神经细胞模型的构建 | 第33页 |
| 2.4 Annexin/PI染色法 | 第33页 |
| 2.5 AO/EB染色法 | 第33页 |
| 2.6 q PCR | 第33-36页 |
| 2.7 免疫印迹 | 第36-37页 |
| 2.8 携带GDNF启动子区的双荧光素酶报告基因质粒的构建 | 第37-40页 |
| 2.9 细胞转染 | 第40-41页 |
| 2.10 双荧光素酶报告基因分析 | 第41页 |
| 2.11 统计学分析 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-49页 |
| 3.1 损伤早期的PD大鼠运动能力的变化 | 第42-43页 |
| 3.2 损伤早期的PD大鼠黒质中GDNF的表达变化 | 第43-44页 |
| 3.3 GDNF存在于大鼠黒质DA能神经细胞中 | 第44-45页 |
| 3.4 损伤早期的DA能神经细胞凋亡的检测 | 第45-47页 |
| 3.5 损伤早期的DA能神经细胞中GDNF的表达变化 | 第47-48页 |
| 3.6 损伤早期的 DA 能神经细胞中 GDNF 转录活性的变化 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 第二部分 Akt1 /Eya1/Six2信号通路调控损伤早期DA能神经细胞中GDNF的应激性高表达 | 第51-87页 |
| 1 材料 | 第51-56页 |
| 1.1 细胞株 | 第51页 |
| 1.2 主要试剂 | 第51-52页 |
| 1.3 细菌、引物及所需的质粒 | 第52-56页 |
| 2 方法 | 第56-66页 |
| 2.1 细胞培养 | 第56页 |
| 2.2 携带过表达靶基因的表达质粒的构建 | 第56-59页 |
| 2.3 携带靶基因干扰序列的表达质粒的构建 | 第59-60页 |
| 2.4 细胞转染 | 第60-61页 |
| 2.5 免疫印迹 | 第61页 |
| 2.6 免疫共沉淀 | 第61页 |
| 2.7 质谱分析 | 第61-63页 |
| 2.8 染色质免疫共沉淀 | 第63-65页 |
| 2.9 统计学分析 | 第65-66页 |
| 3 结果 | 第66-83页 |
| 3.1 损伤不同时间点的DA能神经细胞中p-Akt1、p-Eya1和p-Six2的表达 · 61 | 第66-68页 |
| 3.2 Akt1通过磷酸化Eya1促进损伤早期DA能神经细胞中GDNF的应激性高表达 | 第68-72页 |
| 3.3 Akt1/Eya1信号通过使转录因子Six2发生去磷酸化促进损伤早期DA能神经细胞中GDNF的应激性高表达 | 第72-80页 |
| 3.4 转录因子Six2直接结合于GDNF启动子区促进损伤早期DA能神经细胞中GDNF的应激性高表达 | 第80-83页 |
| 4 讨论 | 第83-87页 |
| 第三部分 应激性高表达的GDNF对 6-OHDA诱导损伤的DA能神经细胞具有保护作用 | 第87-95页 |
| 1 材料 | 第87页 |
| 1.1 实验动物及细胞株 | 第87页 |
| 1.2 主要试剂 | 第87页 |
| 1.3 质粒 | 第87页 |
| 2 方法 | 第87-90页 |
| 2.1 AO/EB染色法 | 第87-88页 |
| 2.2 包装携带Six2基因的慢病毒 | 第88页 |
| 2.3 黒质部位定位注射p LV-Six2的病毒颗粒 | 第88-89页 |
| 2.4 PD大鼠模型的构建 | 第89页 |
| 2.5 行为学方法 | 第89页 |
| 2.6 统计学分析 | 第89-90页 |
| 3 结果 | 第90-93页 |
| 3.1 阻断应激性高表达的GDNF效应导致损伤的DA能神经细胞的凋亡率增加 | 第90-91页 |
| 3.2 离体实验证实通过Six2促进GDNF应激性高表达可保护损伤的DA能神经细胞 | 第91-92页 |
| 3.3 在体实验证实通过Six2促进GDNF应激性高表达可保护损伤的DA能神经细胞 | 第92-93页 |
| 4 讨论 | 第93-95页 |
| 小结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-109页 |
| 个人简历和研究成果 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
