| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 符号说明 | 第14-15页 |
| 引言 | 第15-21页 |
| 一、ERLIN1对乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响 | 第21-32页 |
| 1.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 1.1.1 主要试剂及仪器 | 第21-22页 |
| 1.2 实验方法及步骤 | 第22-26页 |
| 1.2.1 细胞培养和转染 | 第22页 |
| 1.2.2 CCK-8 检测ERLIN1对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第22-23页 |
| 1.2.3 克隆形成实验检测ERLIN1对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第23-24页 |
| 1.2.4 Transwell迁移实验检测ERLIN1对乳腺癌细胞迁移能力的影响 | 第24页 |
| 1.2.5 Transwell侵袭实验检测ERLIN1对乳腺癌细胞侵袭能力的影响 | 第24-25页 |
| 1.2.6 FACS检测ERLIN1对乳腺癌细胞凋亡的影响 | 第25-26页 |
| 1.2.7 统计学处理 | 第26页 |
| 1.3 实验结果 | 第26-29页 |
| 1.3.1 CCK-8 分析ERLIN1对乳腺癌细胞活力的影响 | 第26-27页 |
| 1.3.2 克隆形成实验分析ERLIN1对乳腺癌细胞增殖能力的影响 | 第27页 |
| 1.3.3 Transwell迁移实验分析ERLIN1对乳腺癌细胞迁移能力的影响 | 第27-28页 |
| 1.3.4 Transwell侵袭实验分析ERLIN1对乳腺癌细胞侵袭能力的影响 | 第28-29页 |
| 1.3.5 FACS分析ERLIN1对乳腺癌细胞凋亡的影响 | 第29页 |
| 1.4 讨论 | 第29-31页 |
| 1.5 结论 | 第31-32页 |
| 二、乳腺癌中ERLIN1上游miRNA的筛选与验证 | 第32-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 主要试剂及仪器 | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法及步骤 | 第33-47页 |
| 2.2.1 靶miRNA预测： | 第33页 |
| 2.2.2 细胞培养和细胞转染 | 第33-34页 |
| 2.2.3 细胞RNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 2.2.5 Western Blot检测九种mi RNA mimics对MCF-7 细胞系ERLIN1蛋白表达水平的影响 | 第36-41页 |
| 2.2.6 pmirGLO/ERLIN1- 3’UTR载体的构建 | 第41-43页 |
| 2.2.7 pmirGLO/ERLIN1- 3’UTR mut载体的构建 | 第43-46页 |
| 2.2.8 双荧光素酶报告基因检测 | 第46-47页 |
| 2.2.9 统计学处理 | 第47页 |
| 2.3 实验结果 | 第47-53页 |
| 2.3.1 靶miRNA预测结果： | 第47页 |
| 2.3.2 Western Blot分析九种mi RNA mimics对MCF-7 细胞系ERLIN1蛋白表达水平的影响 | 第47-49页 |
| 2.3.3 荧光定量PCR分析九种mi RNA mimics对MCF-7 细胞系ERLIN1 mRNA水平的影响 | 第49-51页 |
| 2.3.4 pmiGLO/ERLIN1- 3’UTR和pmiGLO/ERLIN1- 3’UTR mut质粒的构建 | 第51-52页 |
| 2.3.5 双荧光报告载体实验验证ERLIN1是miR-410 的直接靶基因 | 第52-53页 |
| 2.4 讨论 | 第53-55页 |
| 2.5 结论 | 第55-56页 |
| 三、乳腺癌细胞中miR-410 和ERLIN1的表达 | 第56-67页 |
| 3.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 3.1.1 主要试剂及仪器 | 第56-57页 |
| 3.2 实验方法及步骤 | 第57-61页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第57页 |
| 3.2.2 RNA的提取 | 第57-58页 |
| 3.2.3 实时定量PCR | 第58-59页 |
| 3.2.4 Western Blot | 第59-61页 |
| 3.2.5 统计学处理 | 第61页 |
| 3.3 实验结果 | 第61-65页 |
| 3.3.1 Western Blot分析不同细胞中ERLIN1的表达水平 | 第61-62页 |
| 3.3.2 实时定量PCR分析不同细胞中miR-410 的表达水平 | 第62-63页 |
| 3.3.3 实时定量PCR分析临床样本中ERLIN1mRNA的表达水平 | 第63-65页 |
| 3.3.4 实时定量PCR分析临床样本中miR-410 的表达水平 | 第65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-66页 |
| 3.5 结论 | 第66-67页 |
| 四、miR-410 对乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响 | 第67-78页 |
| 4.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 4.1.1 主要试剂及仪器 | 第67-68页 |
| 4.2 实验方法及步骤 | 第68-73页 |
| 4.2.1 细胞培养和转染 | 第68页 |
| 4.2.2 CCK-8 检测mi R-410 对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第68-70页 |
| 4.2.3 克隆形成实验检测miR-410 对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第70页 |
| 4.2.4 Transwell迁移实验检测miR-410 对乳腺癌细胞迁移能力的影响 | 第70-71页 |
| 4.2.5 Transwell侵袭实验检测miR-410 对乳腺癌细胞侵袭能力的影响 | 第71页 |
| 4.2.6 FACS检测miR-410 对乳腺癌细胞凋亡的影响 | 第71-73页 |
| 4.3 实验结果 | 第73-76页 |
| 4.3.1 CCK-8 分析miR-410 对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第73页 |
| 4.3.2 克隆形成实验分析miR-410 对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第73-74页 |
| 4.3.3 Transwell迁移实验分析miR-410 对乳腺癌细胞侵袭能力的影响 | 第74-75页 |
| 4.3.4 Transwell小室侵袭实验分析miR-410 对乳腺癌细胞侵袭能力的影响 | 第75页 |
| 4.3.5 FACS分析miR-410 对乳腺癌细胞凋亡的影响 | 第75-76页 |
| 4.4 讨论 | 第76-77页 |
| 4.5 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 全文结论 | 第87-88页 |
| 综述 microRNAs在乳腺癌中的预后和治疗应用：组织和循环microRNAs | 第88-101页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 个人简历 | 第101-102页 |
| 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
