| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-33页 |
| 1.1 马铃薯晚疫病的发生与危害及其病原特性 | 第12-19页 |
| 1.1.1 晚疫病对马铃薯的危害 | 第12-13页 |
| 1.1.2 马铃薯晚疫病的田间症状及流行规律 | 第13-14页 |
| 1.1.3 致病疫霉菌P.infestans分类地位 | 第14页 |
| 1.1.4 致病疫霉菌P.infestans形态学特性 | 第14-15页 |
| 1.1.5 P.infestans侵染过程中的细胞生物学特性 | 第15-17页 |
| 1.1.6 致病疫霉菌的侵染循环和生活史 | 第17-18页 |
| 1.1.7 晚疫病菌的群体变异 | 第18-19页 |
| 1.2 病原与寄主互作分子机理 | 第19-24页 |
| 1.2.1 病原与寄主互作概念 | 第19-20页 |
| 1.2.2 植物免疫与抗病性 | 第20-21页 |
| 1.2.3 植物的抗病性 | 第21-24页 |
| 1.3 效应蛋白种类及其研究进展 | 第24-30页 |
| 1.3.1 质外体效应蛋白（Apoplastic effectors） | 第25-27页 |
| 1.3.2 细胞质效应蛋白（Cytoplasmic effectors） | 第27-30页 |
| 1.4 P.infestans RxLR效应蛋白与寄主互作及其功能 | 第30-31页 |
| 1.4.1 PiAVR3a与CMPG1互作，抑制INFI诱导的细胞死亡 | 第30-31页 |
| 1.4.2 PiAvr4与抗性基因R4互作，引起植物防卫反应，表现无毒活性 | 第31页 |
| 1.4.3 PiAvrblb1与LerRK1.9 互作，影响植物抗性 | 第31页 |
| 1.4.4 PITG_03192与NTP1和NTP2互作，抑制晚疫病菌的侵染 | 第31页 |
| 1.5 致病疫霉效应蛋白RxLR在侵染阶段具有不同的表达模式 | 第31-32页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-47页 |
| 2.1 材料 | 第33页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第33页 |
| 2.1.2 晚疫病菌培养基 | 第33页 |
| 2.1.3 供试植株 | 第33页 |
| 2.2 方法 | 第33-47页 |
| 2.2.1 黑麦培养基制作方法 | 第33-34页 |
| 2.2.2 晚疫病菌菌株保存及复壮 | 第34页 |
| 2.2.3 P. infestans孢子悬浮液的制备 | 第34页 |
| 2.2.4 P. infestans孢子悬浮液活体接种供试植物 | 第34页 |
| 2.2.5 基因瞬时表达 | 第34-35页 |
| 2.2.6 农杆菌瞬时表达接种晚疫病菌分析实验（ATTA） | 第35-36页 |
| 2.2.7 载体构建、基因克隆及农杆菌转化 | 第36-39页 |
| 2.2.8 共聚焦成像及图片处理 | 第39-40页 |
| 2.2.9 叶片组织总RNA抽提 | 第40-41页 |
| 2.2.10 DNase处理 | 第41页 |
| 2.2.11 cDNA合成 | 第41页 |
| 2.2.12蛋白质-蛋白质互作技术寻找Pi04089在寄主中的靶蛋白 | 第41-43页 |
| 2.2.13基因表达分析 | 第43-44页 |
| 2.2.14病毒诱导基因沉默（Virus Induced Gene Silencing，VIGS） | 第44-45页 |
| 2.2.15 Western blot检测蛋白 | 第45-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-69页 |
| 3.1 Pi04089在植物体内的功能鉴定与研究 | 第47-55页 |
| 3.1.1 瞬时表达Pi04089基因，显著促进晚疫病菌侵染 | 第47-48页 |
| 3.1.2 Pi04089在植物体内的亚细胞定位 | 第48-50页 |
| 3.1.3 Pi04089在寄主细胞核仁中发挥作用，促进晚疫病菌侵染 | 第50-54页 |
| 3.1.4 在晚疫病菌侵染早期阶段，Pi04089表达量上调 | 第54-55页 |
| 3.2 利用多项蛋白互作技术，寻找Pi04089的互作寄主靶蛋白 | 第55-60页 |
| 3.2.1 酵母双杂交技术（Yeast-Two-Hybrid） | 第55-56页 |
| 3.2.2 免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation，Co-IP）技术 | 第56-58页 |
| 3.2.3 双分子荧光互补实验证明St KRBP1与Pi04089的互作关系 | 第58-60页 |
| 3.3 Pi04089寄主互作靶蛋白StKRBP1的功能研究 | 第60-64页 |
| 3.3.1 StKRBP1在植物体内的亚细胞定位 | 第60页 |
| 3.3.2 StKRBP1与Pi04089发生互作的亚细胞区域 | 第60-61页 |
| 3.3.3 超量表达（overexpression）StKRBP1促进晚疫病菌生长 | 第61-62页 |
| 3.3.4 在侵染早期阶段，StKRBP1因Pi04089在植物体内稳定存在 | 第62-64页 |
| 3.4 StKRBP1突变体构建及其功能研究 | 第64-69页 |
| 3.4.1 StKRBP1突变体构建 | 第64页 |
| 3.4.2 StKRBP1突变体与Pi04089互作消失 | 第64-65页 |
| 3.4.3 StKRBP1突变体的亚细胞定位 | 第65-66页 |
| 3.4.4 StKRBP1突变体与Pi04089在本氏烟中共表达 | 第66页 |
| 3.4.5 StKRBP1突变体不再促进晚疫病菌的侵染 | 第66-69页 |
| 4 讨论 | 第69-74页 |
| 4.1 效应蛋白Pi04089的研究价值 | 第69页 |
| 4.2 效应蛋白Pi04089在植物体内的亚细胞定位 | 第69页 |
| 4.3 核定位信号的应用效果 | 第69页 |
| 4.4 三项蛋白互作技术寻找Pi04089的寄主互作靶蛋白 | 第69-70页 |
| 4.5 靶蛋白StKRBP1的功能研究及进展 | 第70-72页 |
| 4.6 基因敲除靶蛋白StKRBP1 | 第72页 |
| 4.7 效应蛋白Pi04089和StKRBP1互作功能研究 | 第72-74页 |
| 5 结论 | 第74-75页 |
| 论文创新点 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-89页 |
| 附录 | 第89-95页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第95页 |
