摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-25页 |
1.1 拟南芥开花途径的研究进展 | 第14-22页 |
1.1.1 拟南芥光周期开花途径的研究进展 | 第14-15页 |
1.1.2 生物钟与光周期 | 第15-16页 |
1.1.3 环境信号与内生时间的整合 | 第16页 |
1.1.4 CO基因的结构特征 | 第16-17页 |
1.1.5 昼夜节律依赖的CO调节 | 第17-18页 |
1.1.6 CO蛋白的调控 | 第18-20页 |
1.1.7 开花时间与非生物胁迫之间的关系 | 第20-22页 |
1.2 大豆开花机制研究进展 | 第22-24页 |
1.2.1 大豆成熟基因的开花分子基础 | 第23页 |
1.2.2 大豆COL基因研究进展 | 第23-24页 |
1.3 本文的研究目的与意义 | 第24-25页 |
第二章 基因和启动子克隆与生物信息学分析 | 第25-35页 |
2.1 材料和方法 | 第25-30页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第25页 |
2.1.3 主要仪器设备和试剂 | 第25页 |
2.1.4 拟南芥种子的处理及培养 | 第25-26页 |
2.1.5 基因组DNA的提取(参照天根植物基因组DN A提取试剂盒) | 第26页 |
2.1.6 大肠杆菌感受态的制备 | 第26页 |
2.1.7 农杆菌感受态的制备 | 第26-27页 |
2.1.8 实验所用引物 | 第27页 |
2.1.9 PCR反应 | 第27-28页 |
2.1.10 PCR反应产物的回收 | 第28页 |
2.1.11 载体和PCR反应回收产物的酶切及连接 | 第28页 |
2.1.12 连接产物的转化 | 第28-29页 |
2.1.13 单克隆的鉴定及阳性克隆的筛选 | 第29页 |
2.1.14 质粒的小量提取 | 第29-30页 |
2.1.15 Gateway重组技术 | 第30页 |
2.1.16 农杆菌的转化(电转) | 第30页 |
2.2 结果与分析 | 第30-34页 |
2.2.1 大豆Gm COL1和Gm COL13启动子的克隆 | 第30-31页 |
2.2.2 启动子原件分析 | 第31-32页 |
2.2.3 基因组基因的扩增 | 第32-33页 |
2.2.4 不同物种中COL的进化树分析 | 第33-34页 |
2.3 讨论 | 第34-35页 |
第三章 转基因拟南芥分析 | 第35-42页 |
3.1 材料和方法 | 第35-37页 |
3.1.1 植物材料 | 第35页 |
3.1.2 拟南芥的遗传转化(蘸花法)及筛选 | 第35页 |
3.1.3 转基因拟南芥的PCR鉴定 | 第35-36页 |
3.1.4 GUS染色 | 第36页 |
3.1.5 对拟南芥幼苗进行不同光质的处理 | 第36页 |
3.1.6 对拟南芥进行PEG处理 | 第36页 |
3.1.7 对拟南芥进行NaCl处理 | 第36-37页 |
3.2 结果与分析 | 第37-40页 |
3.2.1 PCR鉴定转基因拟南芥 | 第37页 |
3.2.2 LD/SD条件下Gm COL1pro和Gm COL13pro的GUS活性分析 | 第37-38页 |
3.2.3 不同光质条件下Gm COL1pro和Gm COL13pro的启动子活性分析 | 第38-40页 |
3.2.4 逆境处理条件下Gm COL1pro和Gm COL13pro的GUS活性分析 | 第40页 |
3.3 讨论 | 第40-42页 |
第四章 转基因大豆分析 | 第42-50页 |
4.1 方法 | 第42-45页 |
4.1.1 大豆的种植 | 第42页 |
4.1.2 基因组DNA的提取(参照天根植物基因组DN A提取试剂盒) | 第42页 |
4.1.3 植物总RNA的提取 | 第42页 |
4.1.4 逆转录(Takara,Prime Script RT reagent K it) | 第42页 |
4.1.5 大豆农杆菌介导的子叶节遗传转化的培养基配方 | 第42-43页 |
4.1.6 大豆农杆菌介导的子叶节遗传转化步骤 | 第43-44页 |
4.1.7 T1代阳性苗的鉴定 | 第44-45页 |
4.1.8 对转基因植株的干旱处理 | 第45页 |
4.2 结果与分析 | 第45-49页 |
4.2.1 转基因植株PCR鉴定 | 第45页 |
4.2.2 转基因植株在短日条件下对开花时间的影响 | 第45-46页 |
4.2.3 转基因植株在短日条件下Gm COL13的表达量分析 | 第46-47页 |
4.2.4 转基因植株在长日条件下Gm COL13的表达量分析 | 第47页 |
4.2.5 转基因大豆Enp13-g13在黑暗和远红光条件下Gm COL13表达量分析 | 第47-48页 |
4.2.6 转基因植株在干旱条件下的抗旱性分析 | 第48页 |
4.2.7 转基因植株在干旱条件下对Gm COL13表达量的影响 | 第48-49页 |
4.3 讨论 | 第49-50页 |
第五章 全文总结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-62页 |
附录 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |