| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 研究背景 | 第15-33页 |
| 第一节 海洋酸化研究 | 第15-17页 |
| 一、海洋酸化概述 | 第15-16页 |
| 二、海洋酸化的影响 | 第16-17页 |
| 第二节 海洋酸化对软体动物的影响 | 第17-25页 |
| 一、海洋酸化对软体动物能量代谢的影响 | 第18-19页 |
| 二、海洋酸化对软体动物钙化作用的影响 | 第19-21页 |
| 三、海洋酸化对软体动物免疫反应的影响 | 第21-22页 |
| 四、海洋酸化对软体动物生长发育的影响 | 第22-23页 |
| 五、海洋酸化对软体动物遗传繁育的影响 | 第23-25页 |
| 第三节 软体动物对海洋酸化的响应适应机制研究 | 第25-32页 |
| 第四节 本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
| 第二章 材料与方法 | 第33-57页 |
| 第一节 实验材料 | 第33-38页 |
| 一、实验动物 | 第33页 |
| 二、主要的试剂信息 | 第33-36页 |
| 三、主要的仪器设备 | 第36页 |
| 四、实验所用到的引物信息 | 第36-38页 |
| 第二节 实验方法 | 第38-57页 |
| 一、长牡蛎的酸化处理、药物注射及样品获取 | 第38-40页 |
| 二、长牡蛎组织总RNA的提取及cDNA模板的制备 | 第40-41页 |
| 三、目的基因的克隆 | 第41-42页 |
| 四、目的基因的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 五、荧光实时定量PCR（RT-PCR）检测 | 第43页 |
| 六、目的蛋白的重组表达、纯化 | 第43-48页 |
| 七、血淋巴细胞滴片、石蜡切片的制备及蛋白免疫荧光检测 | 第48-50页 |
| 八、重组蛋白和组织活性检测 | 第50-51页 |
| 九、牡蛎血淋巴细胞吞噬活性、凋亡率、细胞内pH、ROS、Ca~(2+)含量的检测 | 第51-53页 |
| 十、组织细胞内Ca~(2+)含量、cAMP含量的检测 | 第53页 |
| 十一、组织线粒体的提取 | 第53页 |
| 十二、细胞凋亡相关蛋白酶活性检测 | 第53页 |
| 十三、ATP含量的检测 | 第53页 |
| 十四、RNA干扰实验及检测 | 第53-55页 |
| 十五、血淋巴细胞cDNA文库的构建和测序 | 第55页 |
| 十六、转录组数据分析 | 第55页 |
| 十七、血清中钙、葡萄糖含量及肝糖原的检测 | 第55-56页 |
| 十八、数据的统计处理 | 第56-57页 |
| 第三章 实验结果 | 第57-106页 |
| 第一节 关键分子克隆表达及酸化处理下功能分析 | 第57-96页 |
| 一、长牡蛎CgCAII-1的克隆表达及酸化处理下功能分析 | 第57-67页 |
| 二、长牡蛎CgCA的克隆表达及酸化处理下功能分析 | 第67-79页 |
| 三、长牡蛎CgsAC的克隆表达及酸化处理下功能分析 | 第79-96页 |
| 第二节 短期和长期酸化处理下血淋巴细胞转录组学研究 | 第96-106页 |
| 一、转录组文库的构建和测序 | 第96页 |
| 二、基因本组装和表达丰度估计 | 第96-97页 |
| 三、差异表达基因的鉴定 | 第97页 |
| 四、差异表达基因的GO注释 | 第97-99页 |
| 五、GO富集基因分析 | 第99-101页 |
| 六、长期酸化处理下钙离子信号通路相关的差异表达基因 | 第101页 |
| 七、血淋巴细胞中钙离子含量、血清中钙含量及钙调蛋白表达水平的测定 | 第101-104页 |
| 八、血浆中葡萄糖含量及肝糖原含量测定 | 第104-106页 |
| 第四章 讨论 | 第106-120页 |
| 第一节 长牡蛎关键分子参与调控酸化处理下的生理生化变化 | 第106-115页 |
| 一、酸化处理下，碳酸酐酶参与酸碱调节和钙化调节 | 第106-110页 |
| 二、受HCO_3~-激活的游离的腺苷酸环化酶（sAC）介导CO_2引起的生理变化 | 第110-115页 |
| 第二节 长牡蛎应对短期的酸化应激和长期酸化适应过程的不同机制 | 第115-120页 |
| 第五章 结论 | 第120-122页 |
| 一、酸化处理下，长牡蛎启动碳酸酐酶介导的酸碱调节和钙化调节过程 | 第120页 |
| 二、酸化处理下，长牡蛎激活游离的腺苷酸环化酶介导的碱信号通路调节免疫反应和能量代谢过程 | 第120页 |
| 三、短期和长期酸化处理下，长牡蛎建立了不同的应激和适应机制 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第140-141页 |
