| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| TABLE OF CONTENTS | 第12-16页 |
| 图目录 | 第16-19页 |
| 表目录 | 第19-20页 |
| 主要符号表 | 第20-21页 |
| 1 绪论 | 第21-40页 |
| 1.1 糖尿病简介 | 第21-23页 |
| 1.1.1 糖尿病胰岛素注射治疗 | 第21页 |
| 1.1.2 糖尿病胰腺移植治疗 | 第21-22页 |
| 1.1.3 糖尿病胰岛移植治疗 | 第22-23页 |
| 1.2 胰岛移植治疗中存在的问题 | 第23-28页 |
| 1.2.1 胰岛细胞的来源 | 第23-25页 |
| 1.2.2 胰岛移植位点的选择 | 第25页 |
| 1.2.3 免疫排斥问题 | 第25-28页 |
| 1.3 胰岛分离纯化以及保存研究 | 第28-36页 |
| 1.3.1 胰岛分离纯化研究现状 | 第28-30页 |
| 1.3.2 胰岛保存研究现状 | 第30-31页 |
| 1.3.3 影响胰岛活性的主要因素 | 第31-36页 |
| 1.4 存在的问题和研究思路 | 第36-40页 |
| 1.4.1 胰岛分离提取研究中存在的问题 | 第36-38页 |
| 1.4.2 论文设计思路 | 第38-40页 |
| 2 胰岛分离及表征方法的建立 | 第40-52页 |
| 2.1 引言 | 第40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-46页 |
| 2.2.1 材料与仪器 | 第40-41页 |
| 2.2.2 结晶紫灌注小鼠胰腺 | 第41-42页 |
| 2.2.3 胰腺组织形态学考察-快速冰冻切片的制备及HE染色 | 第42页 |
| 2.2.4 体外灌注胶原酶法分离提取小鼠胰岛 | 第42页 |
| 2.2.5 不连续密度梯度离心法纯化小鼠胰岛 | 第42页 |
| 2.2.6 胰岛鉴定方法 | 第42-43页 |
| 2.2.7 胰岛的体外培养 | 第43页 |
| 2.2.8 胰岛定量方法 | 第43-45页 |
| 2.2.9 胰岛活性检测法 | 第45-46页 |
| 2.2.10 胰岛功能检测法 | 第46页 |
| 2.2.11 统计学分析 | 第46页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第46-51页 |
| 2.3.1 胰腺组织形态学考察 | 第46-47页 |
| 2.3.2 小鼠胰岛的分离提取及鉴定 | 第47-48页 |
| 2.3.3 胰岛纯度及产量的考察 | 第48-49页 |
| 2.3.4 胰岛活性及功能的考察 | 第49-51页 |
| 2.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 3 胰岛纯化工艺的建立与优化 | 第52-69页 |
| 3.1 引言 | 第52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 3.2.1 材料与仪器 | 第52-53页 |
| 3.2.2 胰岛分离提取制备方法 | 第53页 |
| 3.2.3 不连续密度梯度离心法纯化胰岛 | 第53页 |
| 3.2.4 高渗-低渗法优化胰岛纯化工艺 | 第53-55页 |
| 3.2.5 Plackett-Burman试验设计 | 第55页 |
| 3.2.6 胰岛的鉴定 | 第55页 |
| 3.2.7 胰岛纯度的测定 | 第55页 |
| 3.2.8 胰岛产量的测定 | 第55页 |
| 3.2.9 胰岛活性的测定 | 第55页 |
| 3.2.10 胰岛功能的测定 | 第55页 |
| 3.2.11 统计学分析 | 第55页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第55-67页 |
| 3.3.1 高渗-低渗法对胰岛纯度的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.2 影响胰岛纯度的显著性因素筛选 | 第56-62页 |
| 3.3.3 高渗-低渗法对胰岛活性及功能的影响 | 第62-64页 |
| 3.3.4 优化设计图法预测最佳纯化条件及其实验验证 | 第64-67页 |
| 3.4 本章小结 | 第67-69页 |
| 4 海藻酸凝胶包埋胰岛储运条件的优化 | 第69-91页 |
| 4.1 引言 | 第69页 |
| 4.2 实验方法 | 第69-72页 |
| 4.2.1 材料与仪器 | 第69-70页 |
| 4.2.2 胰岛分离提取制备方法 | 第70-71页 |
| 4.2.3 ALG-胰岛的制备 | 第71-72页 |
| 4.2.4 ALG-胰岛的鉴定 | 第72页 |
| 4.2.5 ALG-胰岛纯度的测定 | 第72页 |
| 4.2.6 ALG-胰岛产量的测定 | 第72页 |
| 4.2.7 ALG-胰岛活性的测定 | 第72页 |
| 4.2.8 ALG-胰岛功能的测定 | 第72页 |
| 4.2.9 统计学分析 | 第72页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第72-89页 |
| 4.3.1 ALG-胰岛的制备 | 第72-75页 |
| 4.3.2 储运过程中影响ALG-胰岛活性因素的考察 | 第75-84页 |
| 4.3.3 胰岛储运工艺的优化 | 第84-89页 |
| 4.4 本章小结 | 第89-91页 |
| 5 、工程化胰岛的初步研究 | 第91-102页 |
| 5.1 引言 | 第91页 |
| 5.2 实验方法 | 第91-96页 |
| 5.2.1 材料与仪器 | 第91-93页 |
| 5.2.2 胰岛分离提取制备方法 | 第93页 |
| 5.2.3 胰岛单细胞的制备方法 | 第93页 |
| 5.2.4 ALG-胰岛细胞的制备 | 第93-94页 |
| 5.2.5 胰岛细胞的培养与收集 | 第94页 |
| 5.2.6 ALG-胰岛细胞团直径的测定 | 第94页 |
| 5.2.7 ALG-胰岛细胞团活性检测 | 第94页 |
| 5.2.8 ALG-胰岛细胞团存活率检测 | 第94-95页 |
| 5.2.9 细胞内总RNA的提取 | 第95页 |
| 5.2.10 Real time PCR法检测基因表达情况 | 第95-96页 |
| 5.2.11 ALG-胰岛细胞团功能检测 | 第96页 |
| 5.2.12 统计学分析 | 第96页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第96-101页 |
| 5.3.1 工程化胰岛细胞团的状态 | 第96-98页 |
| 5.3.2 工程化胰岛细胞团活性及存活率的研究 | 第98-99页 |
| 5.3.3 工程化胰岛细胞团基因表达的研究 | 第99-100页 |
| 5.3.4 工程化胰岛细胞团功能的研究 | 第100-101页 |
| 5.4 本章小结 | 第101-102页 |
| 6 总结 | 第102-107页 |
| 6.1 结论 | 第102-103页 |
| 6.2 创新点 | 第103页 |
| 6.3 展望 | 第103-107页 |
| 参考文献 | 第107-115页 |
| 附录 | 第115-117页 |
| 作者简介 | 第117页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第117-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
