| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-18页 |
| 1.1 罗非鱼养殖产业的发展现状 | 第12-14页 |
| 1.1.1 罗非鱼养殖业在中国的发展现状 | 第12-13页 |
| 1.1.2 广西地区罗非鱼养殖产业现状 | 第13-14页 |
| 1.2 罗非鱼养殖中的病害问题 | 第14-15页 |
| 1.3 无乳链球菌的检测方法 | 第15-17页 |
| 1.3.1 CAMP检测方法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 细菌自动检测仪 | 第16页 |
| 1.3.3 其他生理生化检测方法 | 第16页 |
| 1.3.4 血清培养检测方法 | 第16页 |
| 1.3.5 分子生物检测 | 第16-17页 |
| 1.4 研究目的和主要内容 | 第17-18页 |
| 1.4.1 研究目的和主要内容 | 第17页 |
| 1.4.2 创新点 | 第17-18页 |
| 第二章 纯培养无乳链球菌巢式PCR检测 | 第18-30页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第18-20页 |
| 2.1.1 菌种 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂和药品 | 第18-19页 |
| 2.1.3 培养基的配制 | 第19-20页 |
| 2.1.4 主要试剂及其配制方法 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 引物设计合成 | 第20-21页 |
| 2.2.2 标准无乳链球菌菌液的制备 | 第21页 |
| 2.2.3 单次PCR扩增的反应条件优化 | 第21页 |
| 2.2.4 DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第21-22页 |
| 2.2.5 单次PCR扩增的特异性实验 | 第22页 |
| 2.2.6 单次PCR扩增的灵敏度实验 | 第22页 |
| 2.2.7 巢式PCR扩增的灵敏度实验 | 第22-23页 |
| 2.2.8 巢式PCR扩增的重复性实验 | 第23页 |
| 2.3 实验结果 | 第23-27页 |
| 2.3.1 单次PCR优化结果 | 第23-24页 |
| 2.3.2 单次PCR扩增的特异性实验结果 | 第24-25页 |
| 2.3.3 单次PCR扩增的灵敏度实验结果 | 第25-26页 |
| 2.3.4 巢式PCR扩增的灵敏度实验结果 | 第26页 |
| 2.3.5 巢式PCR扩增的重复性实验结果 | 第26-27页 |
| 2.4 分析与讨论 | 第27-30页 |
| 2.4.1 无乳链球菌纯培养 | 第27页 |
| 2.4.2 PCR反应优化 | 第27-28页 |
| 2.4.3 巢式PCR | 第28-29页 |
| 2.4.4 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 人工制备含菌罗非鱼血液的巢式PCR检测 | 第30-40页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第30-31页 |
| 3.1.1 菌种 | 第30页 |
| 3.1.2 试剂和药品 | 第30页 |
| 3.1.3 培养基的配制 | 第30-31页 |
| 3.1.4 主要试剂及其配制方法 | 第31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 罗非鱼采血 | 第31页 |
| 3.2.2 抗凝血剂的制备 | 第31-32页 |
| 3.2.3 抗凝血剂的抗凝效果实验 | 第32页 |
| 3.2.4 罗非鱼血液标准模版的制备 | 第32页 |
| 3.2.5 抗凝血剂对PCR检测结果影响 | 第32-33页 |
| 3.2.6 含菌罗非鱼血液巢式PCR特异性实验 | 第33页 |
| 3.2.7 含菌罗非鱼血液巢式PCR扩增灵敏度实验 | 第33页 |
| 3.2.8 巢式PCR检测的定期重复实验 | 第33页 |
| 3.3 实验结果 | 第33-38页 |
| 3.3.0 罗非鱼健康状况的检查结果 | 第33-34页 |
| 3.3.1 抗凝血剂选择的结果 | 第34-35页 |
| 3.3.2 抗凝血剂对PCR检测影响的结果 | 第35页 |
| 3.3.3 巢式PCR扩增的特异性实验结果 | 第35-36页 |
| 3.3.4 巢式PCR扩增的灵敏度实验结果 | 第36-37页 |
| 3.3.5 巢式PCR扩增的重复性实验结果 | 第37页 |
| 3.3.6 巢式PCR定期重复实验结果 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论与分析 | 第38-40页 |
| 3.4.1 抗凝血剂的抗凝效果实验的结果分析 | 第38-39页 |
| 3.4.2 罗非鱼血菌液巢式PCR扩增灵敏度实验 | 第39页 |
| 3.4.3 巢式PCR检测的重复性实验的结果分析 | 第39页 |
| 3.4.4 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 攻毒实验及活体罗非鱼检测 | 第40-50页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第40页 |
| 4.1.1 菌种 | 第40页 |
| 4.1.2 试剂和药品 | 第40页 |
| 4.1.3 培养基的配制 | 第40页 |
| 4.1.4 主要试剂及其配制方法 | 第40页 |
| 4.2 试验方法 | 第40-42页 |
| 4.2.1 人工感染 | 第40-41页 |
| 4.2.2 无乳链球菌感染死亡统计 | 第41页 |
| 4.2.3 供试罗非鱼血液中无乳链球菌血液平板计数及巢式PCR检测 | 第41页 |
| 4.2.4 无乳链球菌药敏实验 | 第41-42页 |
| 4.3 实验结果 | 第42-48页 |
| 4.3.1 攻毒实验结果 | 第42-44页 |
| 4.3.2 活体采样实验结果 | 第44-46页 |
| 4.3.3 无乳链球菌药敏试验结果 | 第46-48页 |
| 4.4 分析与讨论 | 第48-50页 |
| 4.4.1 攻毒及采样实验结果分析 | 第48页 |
| 4.4.2 药敏结果分析 | 第48页 |
| 4.4.3 小结 | 第48-50页 |
| 第五章 结论与展望 | 第50-53页 |
| 5.1 结论 | 第50-51页 |
| 5.2 展望 | 第51-53页 |
| 5.2.1 巢式PCR易见到的问题 | 第51页 |
| 5.2.2 无乳链球菌检测方法的展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录：药敏试验结果 | 第58-64页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |