| 中文摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-33页 |
| 1 烟草起源和种类 | 第15-20页 |
| 1.1 烟草起源 | 第15-16页 |
| 1.2 烟草种类 | 第16-20页 |
| 2 烟草降烟碱生物合成研究进展 | 第20-31页 |
| 2.1 烟碱生物合成研究 | 第21-25页 |
| 2.2 降烟碱合成代谢研究 | 第25-31页 |
| 3 本课题研究的科学问题及主要研究内容 | 第31-33页 |
| 第二章 不同类型烟草种质烟碱和降烟碱生物合成研究 | 第33-47页 |
| 1 材料与方法 | 第33-38页 |
| 1.1 材料 | 第33-35页 |
| 1.2 方法 | 第35-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-44页 |
| 2.1 不同类型烟草种质烟碱及其代谢产物差异分析 | 第38-40页 |
| 2.2 ADC和ODC基因表达对烟碱合成的影响 | 第40-41页 |
| 2.3 PMT和QPT基因表达对烟碱合成的影响 | 第41-42页 |
| 2.4 A622基因表达对烟碱合成的影响 | 第42-43页 |
| 2.5 降烟碱合成代谢途径相关基因分析 | 第43-44页 |
| 2.6 亚硝酸还原酶基因对亚硝基降烟碱合成影响 | 第44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| 3.1 不同类型烟草种质烟碱和降烟碱含量与基因表达存在差异 | 第44-46页 |
| 3.2 烟碱和降烟碱间转化 | 第46-47页 |
| 第三章 PMT及QPT对烟碱合成代谢的影响 | 第47-63页 |
| 1 材料与方法 | 第47-56页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第47-48页 |
| 1.2 试剂 | 第48页 |
| 1.3 培养基 | 第48页 |
| 1.4 仪器 | 第48-49页 |
| 1.5 方法 | 第49-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-61页 |
| 2.1 植物表达载体构建及对烟草遗传转化 | 第56-58页 |
| 2.2 PMT和QPT基因表达对烟碱和降烟碱合成的影响 | 第58-59页 |
| 2.3 PMT基因表达对烟碱生物合成基因表达的影响 | 第59-60页 |
| 2.4 PMT基因表达对降烟碱生物合成基因表达的影响 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 3.1 PMT基因表达对烟碱合成有调控作用 | 第61-62页 |
| 3.2 降烟碱生物合成受到烟碱合成的影响 | 第62-63页 |
| 第四章 CYP82E4v1对降烟碱生物合成的影响 | 第63-88页 |
| 1 材料与方法 | 第64-75页 |
| 1.1 材料 | 第64-67页 |
| 1.2 方法 | 第67-75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-86页 |
| 2.1 K326 CYP82E4v1基因克隆及序列分析 | 第75-78页 |
| 2.2 植物表达载体构建及对烟草遗传转化 | 第78-80页 |
| 2.3 CYP82E4v1基因对烟碱和降烟碱代谢的影响 | 第80-82页 |
| 2.4 “Gene-deletor”系统对外源基因清除分析 | 第82-84页 |
| 2.5 CRISPR/Cas9基因编辑技术定向突变CYP82E4v1基因初步研究 | 第84-86页 |
| 3 讨论 | 第86-88页 |
| 3.1 烟草品种K326 CYP82E4v1基因分析 | 第86页 |
| 3.2 CYP82E4v1基因表达与烟碱及降烟碱代谢关系 | 第86-87页 |
| 3.3 “Gene-deletor”技术在烟草育种上的应用 | 第87页 |
| 3.4 基因编辑技术定向突变烟草的应用 | 第87-88页 |
| 第五章 烟草烟碱降烟碱生物合成部位研究 | 第88-96页 |
| 1 材料与方法 | 第89-90页 |
| 1.1 材料 | 第89页 |
| 1.2 方法 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-93页 |
| 2.1 烟草不同部位烟碱和降烟碱含量差异分析 | 第90-91页 |
| 2.2 烟草不同部位烟碱及降烟碱代谢基因表达差异分析 | 第91-93页 |
| 3 讨论 | 第93-96页 |
| 3.1 烟碱和降烟碱合成部位 | 第93-94页 |
| 3.2 烟碱和降烟碱生物合成基因表达的关系 | 第94-96页 |
| 第六章 CYP82E4v1基因干涉烟草植株对烟蚜抗性研究 | 第96-108页 |
| 1 材料与方法 | 第96-100页 |
| 1.1 材料 | 第96-97页 |
| 1.2 方法 | 第97-100页 |
| 2 结果与分析 | 第100-105页 |
| 2.1 T1代烟草植株鉴定及CYP82E4v1表达分析 | 第100-101页 |
| 2.2 干涉CYP82E4v1基因提高烟碱含量 | 第101页 |
| 2.3 不同植物激素对干涉植株烟碱含量影响 | 第101-102页 |
| 2.4 干涉CYP82E4v1提高植株对烟蚜的抗性 | 第102-103页 |
| 2.5 干涉CYP82E4v1对植株AOEs及PAL活性影响 | 第103-104页 |
| 2.6 CYP82E4v1干涉植株中SA/JA信号通路中基因表达分析 | 第104-105页 |
| 3 讨论 | 第105-108页 |
| 3.1 干涉CYP82E4v1基因减少外源激素对烟碱含量的影响 | 第105-106页 |
| 3.2 烟碱含量提高烟草植株对蚜虫抗性 | 第106页 |
| 3.3 CYP82E4v1基因干涉植株抗蚜虫与JA/SA信号通路的关系 | 第106-108页 |
| 第七章 结论与展望 | 第108-111页 |
| 1 结论 | 第108-109页 |
| 2 创新点 | 第109页 |
| 3 展望 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-125页 |
| 附录一 | 第125-127页 |
| 附录二 | 第127-129页 |
| 致谢 | 第129-131页 |
