| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第15-27页 |
| 1.1 皮肤光老化及光老化机理的研究概况 | 第15-19页 |
| 1.1.1 皮肤光老化的定义 | 第15页 |
| 1.1.2 光老化机理的研究概况 | 第15-19页 |
| 1.2 螺旋藻的研究概况 | 第19-20页 |
| 1.3 生物活性肽的研究概况 | 第20-21页 |
| 1.4 抗皮肤光老化生物活性肽的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.5 iTRAQ蛋白质组学研究进展 | 第22-24页 |
| 1.5.1 蛋白质组学概述 | 第22-23页 |
| 1.5.2 iTRAQ蛋白质组学技术 | 第23-24页 |
| 1.6 本课题的研究意义和主要研究内容 | 第24-27页 |
| 1.6.1 本课题的研究意义 | 第24-25页 |
| 1.6.2 本课题的主要研究内容 | 第25-27页 |
| 第二章 螺旋藻蛋白酶解物的基本性质和活性研究 | 第27-58页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第29页 |
| 2.3 实验内容及方法 | 第29-35页 |
| 2.3.1 螺旋藻粉总氮含量测定 | 第29页 |
| 2.3.2 螺旋藻蛋白质的提取 | 第29-30页 |
| 2.3.3 蛋白含量的测定 | 第30页 |
| 2.3.4 螺旋藻蛋白的酶解 | 第30-31页 |
| 2.3.5 超滤 | 第31页 |
| 2.3.6 氨基酸组成分析 | 第31-32页 |
| 2.3.7 傅立叶红外光谱测定多肽的二级结构 | 第32页 |
| 2.3.8 荧光法测定多肽组分的疏水性 | 第32页 |
| 2.3.9 抗氧化活性评价 | 第32-34页 |
| 2.3.10 多肽对UVB老化的HSF的保护作用 | 第34-35页 |
| 2.3.11 统计分析 | 第35页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第35-55页 |
| 2.4.1 螺旋藻蛋白质的提取和含量测定 | 第35-36页 |
| 2.4.2 螺旋藻蛋白质的酶解 | 第36-37页 |
| 2.4.3 螺旋藻蛋白质酶解物组分的分离 | 第37-38页 |
| 2.4.4 氨基酸组成分析 | 第38-40页 |
| 2.4.5 傅立叶红外光谱测定多肽的二级结构 | 第40-44页 |
| 2.4.6 疏水性测定 | 第44-45页 |
| 2.4.7 抗氧化活性评价 | 第45-50页 |
| 2.4.8 多肽对UVB老化的HSF的保护作用 | 第50-55页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第55-57页 |
| 2.6 本章小结 | 第57-58页 |
| 第三章 螺旋藻蛋白源生物活性肽的制备和活性研究 | 第58-107页 |
| 3.1 引言 | 第58页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第58-60页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第58-60页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第60页 |
| 3.3 实验内容及方法 | 第60-64页 |
| 3.3.1 凝胶色谱层析 | 第60页 |
| 3.3.2 多肽序列的鉴定 | 第60-61页 |
| 3.3.3 多肽的合成和纯度鉴定 | 第61-62页 |
| 3.3.4 多肽的结构预测 | 第62页 |
| 3.3.5 多肽生物活性评价 | 第62-64页 |
| 3.3.6 统计分析 | 第64页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第64-104页 |
| 3.4.1 多肽的柱层析纯化 | 第64-66页 |
| 3.4.2 多肽组分的抗氧化活性评价 | 第66-68页 |
| 3.4.3 多肽组分的对UVB老化的HSF的保护作用研究 | 第68-69页 |
| 3.4.4 多肽的序列鉴定 | 第69-76页 |
| 3.4.5 多肽的合成和纯度鉴定 | 第76-83页 |
| 3.4.6 多肽的结构 | 第83-87页 |
| 3.4.7 多肽的生物活性 | 第87-104页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第104-106页 |
| 3.6 本章小结 | 第106-107页 |
| 第四章 活性肽的结构修饰及其活性评价 | 第107-132页 |
| 4.1 引言 | 第107页 |
| 4.2 实验材料 | 第107-109页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第107-108页 |
| 4.2.2 主要仪器与设备 | 第108-109页 |
| 4.3 实验内容及方法 | 第109-110页 |
| 4.3.1 多肽对人类皮肤的渗透性预测 | 第109页 |
| 4.3.2 多肽的合成 | 第109页 |
| 4.3.3 多肽的结构测定 | 第109-110页 |
| 4.3.4 体外自由基活性评价 | 第110页 |
| 4.3.5 红细胞溶血活性测定 | 第110页 |
| 4.3.6 细胞内ROS的测定 | 第110页 |
| 4.3.7 多肽抗癌活性的测定 | 第110页 |
| 4.3.8 对UVB老化的HSF的保护作用 | 第110页 |
| 4.3.9 对UVB老化的人角质细胞的保护作用 | 第110页 |
| 4.3.10 统计分析 | 第110页 |
| 4.4 实验结果 | 第110-129页 |
| 4.4.1 多肽的皮肤渗透能力评价 | 第110-111页 |
| 4.4.2 多肽的合成和纯度鉴定 | 第111-117页 |
| 4.4.3 多肽的结构测定 | 第117-118页 |
| 4.4.4 多肽的生物活性评价 | 第118-124页 |
| 4.4.5 修饰多肽的抗癌作用研究 | 第124-126页 |
| 4.4.6 多肽对Hacat光老化的保护作用 | 第126-129页 |
| 4.5 结果讨论 | 第129-131页 |
| 4.6 本章小结 | 第131-132页 |
| 第五章 螺旋藻蛋白源活性肽体内抗光老化活性研究 | 第132-150页 |
| 5.1 引言 | 第132-133页 |
| 5.2 实验材料 | 第133-134页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第133页 |
| 5.2.2 材料与试剂 | 第133页 |
| 5.2.3 主要仪器与设备 | 第133-134页 |
| 5.3 实验内容与方法 | 第134-139页 |
| 5.3.1 分组与造模 | 第134-135页 |
| 5.3.2 分组处理方法以及给药方式 | 第135-136页 |
| 5.3.3 动物造模 | 第136页 |
| 5.3.4 小鼠背部皮肤宏观评价 | 第136-137页 |
| 5.3.5 皮肤拉伸后恢复评价 | 第137页 |
| 5.3.6 测定皮肤含水量 | 第137页 |
| 5.3.7 测定皮肤中抗氧化酶以及胶原蛋白的变化情况 | 第137-138页 |
| 5.3.8 测定组织病理变化和表皮厚度 | 第138页 |
| 5.3.9 测定皮肤中MMP-1和MMP-3的含量 | 第138-139页 |
| 5.3.10 统计分析 | 第139页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第139-148页 |
| 5.4.1 动物实验的宏观结果 | 第139-141页 |
| 5.4.2 动物皮肤弹性测定 | 第141页 |
| 5.4.3 动物皮肤含水量测定 | 第141-143页 |
| 5.4.4 动物皮肤组织病理变化和表皮厚度分析 | 第143-144页 |
| 5.4.5 抗皮肤光老化的初步机理探究 | 第144-146页 |
| 5.4.6 动物皮肤匀浆中MMP-1 和MMP-3 的测定 | 第146-147页 |
| 5.4.7 动物皮肤匀浆中胶原蛋白含量的测定 | 第147-148页 |
| 5.5 结果讨论 | 第148-149页 |
| 5.6 本章小结 | 第149-150页 |
| 第六章 iTRAQ差异蛋白质组鉴定皮肤光老化相关蛋白 | 第150-203页 |
| 6.1 引言 | 第150页 |
| 6.2 实验材料 | 第150-153页 |
| 6.2.1 实验动物 | 第150页 |
| 6.2.2 材料与试剂 | 第150-152页 |
| 6.2.3 仪器与设备 | 第152-153页 |
| 6.3 实验内容与方法 | 第153-160页 |
| 6.3.1 蛋白质的提取 | 第153页 |
| 6.3.2 SDS电泳 | 第153页 |
| 6.3.3 还原烷基化和酶解 | 第153页 |
| 6.3.4 iTRAQ标记 | 第153-154页 |
| 6.3.5 高pH RPLC第一维分离 | 第154页 |
| 6.3.6 第二维分离 | 第154-155页 |
| 6.3.7 生物信息学分析 | 第155-156页 |
| 6.3.8 数据库的选择 | 第156页 |
| 6.3.9 鉴定质量评估报告 | 第156页 |
| 6.3.10 功能注释 | 第156-157页 |
| 6.3.11 差异蛋白富集分析 | 第157页 |
| 6.3.12 差异蛋白表达模式聚类 | 第157-158页 |
| 6.3.13 差异蛋白互作网络分析 | 第158页 |
| 6.3.14 差异蛋白GO有向无环图 | 第158页 |
| 6.3.15 各组样本差异蛋白venn图 | 第158页 |
| 6.3.16 IPATH整合分析 | 第158页 |
| 6.3.17 多组样本PCA分析 | 第158页 |
| 6.3.18 免疫印迹验证蛋白质组学结果 | 第158-159页 |
| 6.3.19 统计分析 | 第159-160页 |
| 6.4 实验结果与分析 | 第160-200页 |
| 6.4.1 蛋白质质量鉴定 | 第160页 |
| 6.4.2 鉴定质量评估 | 第160-162页 |
| 6.4.3 光老化模型差异蛋白的研究 | 第162-170页 |
| 6.4.4 P_1抗光老化相关差异蛋白的研究 | 第170-180页 |
| 6.4.5 P_2抗光老化相关差异蛋白的研究 | 第180-190页 |
| 6.4.6 P_1和P_2抗光老化作用差异分析 | 第190-199页 |
| 6.4.7 Western Blot验证结果 | 第199-200页 |
| 6.5 结果讨论 | 第200-201页 |
| 6.6 本章小结 | 第201-203页 |
| 结论与展望 | 第203-207页 |
| 结论 | 第203-205页 |
| 论文创新点 | 第205页 |
| 展望 | 第205-207页 |
| 附录 | 第207-214页 |
| 参考文献 | 第214-227页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第227-229页 |
| 致谢 | 第229-230页 |
| Ⅳ-2 答辩委员会对论文的评定意见 | 第230页 |
