| 中文摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 符号说明 | 第13-15页 |
| 第一部分：文献综述 | 第15-39页 |
| 第一章 硒与奶牛乳腺炎的关系 | 第15-21页 |
| 1 奶牛乳腺炎 | 第15-17页 |
| 1.1 奶牛乳腺炎的发病原因及危害 | 第15-17页 |
| 2 奶牛乳腺组织的防御机制 | 第17-18页 |
| 2.1 乳头管的机械性屏障作用 | 第17页 |
| 2.2 免疫细胞的防御作用 | 第17-18页 |
| 3 硒的生物学特性 | 第18-21页 |
| 3.1 硒在奶牛体内的存在形式及其生理功能 | 第18-19页 |
| 3.2 硒对奶牛乳腺免疫反应的影响 | 第19页 |
| 3.3 硒对免疫细胞的调节 | 第19-21页 |
| 第二章 硒与炎症信号通路的关系 | 第21-28页 |
| 1 TLR信号通路概述 | 第21-23页 |
| 2 NLR信号通路概述 | 第23-24页 |
| 3 NF-KB和MAPK信号通路 | 第24-27页 |
| 4 硒对NF-KB和MAPK信号通路的调控作用 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-39页 |
| 第二部分：试验研究 | 第39-92页 |
| 第一章 金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺组织损伤作用的研究 | 第39-49页 |
| 1 材料 | 第39-40页 |
| 1.1 实验动物 | 第39页 |
| 1.2 菌种 | 第39页 |
| 1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
| 1.4 主要试剂 | 第40页 |
| 1.5 相关试剂的配置 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-44页 |
| 2.1 金黄色葡萄球菌的培养与计数 | 第40页 |
| 2.2 奶牛金黄色葡萄球菌性乳腺炎病理模型的制备 | 第40-41页 |
| 2.3 样品的采集 | 第41页 |
| 2.4 荧光定量PCR方法检测相关炎症因子基因的表达 | 第41-43页 |
| 2.5 数据处理 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-46页 |
| 3.1 金黄色葡萄球菌对奶牛血常规主要指标的影响 | 第44页 |
| 3.2 金黄色葡萄球菌急性感染对奶牛血液生化指标的影响 | 第44-45页 |
| 3.3 金黄色葡萄球菌侵袭对乳腺组织炎症细胞因子相对表达量的影响 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第二章 荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞体外培养、鉴定及其炎性细胞因子基因对金黄色葡萄球菌感染的反应 | 第49-64页 |
| 1 材料 | 第50-52页 |
| 1.1 实验动物 | 第50页 |
| 1.2 主要仪器 | 第50页 |
| 1.3 主要试剂 | 第50页 |
| 1.4 主要试剂的配置 | 第50-52页 |
| 2 方法 | 第52-56页 |
| 2.1 乳腺上皮细胞原代培养 | 第52页 |
| 2.2 乳腺上皮细胞的纯化 | 第52页 |
| 2.3 乳腺上皮细胞的冻存与复苏 | 第52-53页 |
| 2.4 乳腺上皮细胞鉴定与观察 | 第53-55页 |
| 2.5 金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺上皮细胞炎症细胞因子mRNA表达水平的影响 | 第55页 |
| 2.6 数据分析 | 第55-56页 |
| 3 结果 | 第56-61页 |
| 3.1 乳腺上皮细胞的原代培养 | 第56-57页 |
| 3.2 奶牛乳腺上皮细胞的鉴定 | 第57-60页 |
| 3.3 金黄色葡萄球菌感染对奶牛乳腺上皮细胞炎症细胞因子基因表达的影响 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 第三章 硒对金黄色葡萄球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎症损伤的机制研究 | 第64-80页 |
| 1 材料 | 第64-65页 |
| 1.1 细胞 | 第64页 |
| 1.2 主要仪器 | 第64页 |
| 1.3 主要试剂 | 第64-65页 |
| 1.4 主要试剂的配置 | 第65页 |
| 2 方法 | 第65-68页 |
| 2.1 奶牛乳腺上皮细胞的分离培养 | 第65-66页 |
| 2.2 MTT法检测硒对奶牛乳腺上皮细胞活性的影响 | 第66页 |
| 2.3 荧光定量PCR检测相关基因表达 | 第66-67页 |
| 2.4 Western Blot检测相关蛋白的表达 | 第67-68页 |
| 3 结果 | 第68-75页 |
| 3.1 硒对乳腺上皮细胞活性的影响 | 第68页 |
| 3.2 硒对金黄色葡萄球菌诱导奶牛乳腺上皮细胞TLR2通路的影响 | 第68-71页 |
| 3.3 硒对金黄色葡萄球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞Nod2信号通路的影响 | 第71页 |
| 3.4 硒对金黄色葡萄球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性细胞因子基因表达的影响 | 第71-74页 |
| 3.5 硒对金黄色葡萄球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞IκBα和NF-κB p65磷酸化水平的影响 | 第74-75页 |
| 3.6 硒对金黄色葡萄球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞p38 MAPK和Erk MAPK磷酸化水平的影响 | 第75页 |
| 4 讨论 | 第75-78页 |
| 参考文献 | 第78-80页 |
| 第四章 硒对金黄色葡萄球菌诱导的巨噬细胞NF-KB和MAPK信号通路调控机制的研究 | 第80-92页 |
| 1 材料 | 第80-81页 |
| 1.1 实验细胞 | 第80页 |
| 1.2 主要仪器 | 第80-81页 |
| 1.3 主要试剂 | 第81页 |
| 2 方法 | 第81-82页 |
| 2.1 RAW264.7细胞的复苏 | 第81页 |
| 2.2 MTT法检测硒对乳腺上皮细胞活性的影响 | 第81页 |
| 2.3 荧光定量PCR检测炎症细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6基因表达 | 第81-82页 |
| 2.4 ELISA检测炎症细胞因子TNF-α,IL-1β,IL-6蛋白表达 | 第82页 |
| 2.5 Western Blot检测NF-κB和MAPK信号通路关键蛋白表达 | 第82页 |
| 3 结果 | 第82-87页 |
| 3.1 硒对RAW264.7巨噬细胞活性的影响 | 第82-83页 |
| 3.2 硒对金黄色葡萄球菌诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症细胞因子基因表达的影响 | 第83-84页 |
| 3.3 硒对金黄色葡萄球菌诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症细胞因子蛋白表达的影响 | 第84-85页 |
| 3.4 硒对金黄色葡萄球菌诱导的巨噬细胞NF-κB信号通路的影响 | 第85-86页 |
| 3.5 硒对金黄色葡萄球菌诱导的巨噬细胞MAPK信号通路的影响 | 第86-87页 |
| 4 讨论 | 第87-90页 |
| 参考文献 | 第90-92页 |
| 全文总结 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第94-95页 |
