| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-26页 |
| 1.1 LEA蛋白理化特征及分类 | 第12-13页 |
| 1.2 不同亚族LEA蛋白结构特征和研究进展 | 第13-21页 |
| 1.2.1 Dehydrin (PF00257) | 第13-15页 |
| 1.2.2 LEA_1家族蛋白(PF03760) | 第15-16页 |
| 1.2.3 LEA_2家族蛋白(PF03168) | 第16-18页 |
| 1.2.4 LEA_3族蛋白(PF03242) | 第18页 |
| 1.2.5 LEA_4家族蛋白(PF02987) | 第18-19页 |
| 1.2.6 LEA_5家族蛋白(PF00477) | 第19页 |
| 1.2.7 LEA_6家族蛋白(PF10714) | 第19-20页 |
| 1.2.8 SMP家族蛋白(PF04927) | 第20页 |
| 1.2.9 ABA_WDS家族(PF02496) | 第20-21页 |
| 1.3 LEA蛋白亚细胞定位 | 第21-22页 |
| 1.4 LEA蛋白功能及其分子作用机制 | 第22-23页 |
| 1.5 柠条锦鸡儿 | 第23-24页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第24页 |
| 1.7 技术路线 | 第24-26页 |
| 2 材料和方法 | 第26-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-33页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第26页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第26-28页 |
| 2.1.4 主要实验仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.1.5 引物合成和测序 | 第29-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-47页 |
| 2.2.1 植物培养 | 第33页 |
| 2.2.2 柠条锦鸡儿处理 | 第33-34页 |
| 2.2.3 RNA提取及cDNA的合成 | 第34-36页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR | 第36页 |
| 2.2.5 柠条锦鸡儿CkLEA基因克隆 | 第36-38页 |
| 2.2.6 基因生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 2.2.7 PCR产物回收纯化与质粒提取 | 第39页 |
| 2.2.8 目的片段与载体的连接 | 第39-40页 |
| 2.2.9 大肠杆菌感受态细胞制备和连接产物的转化 | 第40页 |
| 2.2.10 菌落PCR检测 | 第40-41页 |
| 2.2.11 原核表达和纯化 | 第41-43页 |
| 2.2.12 植物表达载体的构建 | 第43页 |
| 2.2.13 拟南芥的遗传转化 | 第43-44页 |
| 2.2.14 转基因植株纯合体筛选及鉴定 | 第44-45页 |
| 2.2.15 CkLEA蛋白亚细胞定位观察 | 第45页 |
| 2.2.16 转基因拟南芥表型分析 | 第45-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-88页 |
| 3.1 柠条锦鸡儿CkLEA基因家族的克隆与分析 | 第47-54页 |
| 3.1.1 柠条锦鸡儿CkLEA家族基因理化特征分析 | 第47-49页 |
| 3.1.2 柠条锦鸡儿CkLEA蛋白二级结构预测 | 第49页 |
| 3.1.3 柠条锦鸡儿CkLEA蛋白系统进化分析 | 第49-50页 |
| 3.1.4 柠条锦鸡儿CkLEA蛋白保守区域分析 | 第50-52页 |
| 3.1.5 柠条锦鸡儿CkLEA基因组织特异性表达检测 | 第52-53页 |
| 3.1.6 柠条锦鸡儿CkLEA基因胁迫处理下表达检测 | 第53-54页 |
| 3.1.7 柠条锦鸡儿CkLEA蛋白亚细胞定位预测 | 第54页 |
| 3.2 柠条锦鸡儿CkLEA2-2基因的克隆与功能研究 | 第54-66页 |
| 3.2.1 CkLEA2-2基因的克隆与分析 | 第55-56页 |
| 3.2.2 柠条锦鸡儿CkLEA2-2基因表达分析 | 第56-57页 |
| 3.2.3 CkLEA2-2亚细胞定位 | 第57-58页 |
| 3.2.4 CkLEA2-2基因原核表达分析 | 第58-60页 |
| 3.2.5 过表达CkLEA2-2基因拟南芥的获得与鉴定 | 第60-61页 |
| 3.2.6 过表达CkLEA2-2基因拟南芥抗逆性检测 | 第61-66页 |
| 3.3 CkLEA2-3基因的克隆与功能研究 | 第66-75页 |
| 3.3.1 CkLEA2-3基因的克隆与分析 | 第66-67页 |
| 3.3.2 柠条锦鸡儿CkLEA2-3基因表达分析 | 第67-68页 |
| 3.3.3 CkLEA2-3亚细胞定位 | 第68-69页 |
| 3.3.4 过表达CkLEA2-3基因拟南芥的获得与鉴定 | 第69-71页 |
| 3.3.5 转CkLEA2-3基因拟南芥抗逆性研究 | 第71-75页 |
| 3.4 过表达CkLEA3-1基因功能研究 | 第75-80页 |
| 3.4.1 过表达CkLEA3-1基因拟南芥的获得与鉴定 | 第75-76页 |
| 3.4.2 转CkLEA3-1因拟南芥抗逆性研究 | 第76-80页 |
| 3.5 CkLEA4-2基因的克隆与功能研究 | 第80-88页 |
| 3.5.1 CkLEA4-2基因的克隆与分析 | 第80-81页 |
| 3.5.2 柠条锦鸡儿CkLEA4-2基因表达分析 | 第81-82页 |
| 3.5.3 CkLEA4-2亚细胞定位 | 第82-83页 |
| 3.5.4 过表达CkLEA4-2基因拟南芥的获得与鉴定 | 第83-84页 |
| 3.5.5 转CkLEA4-2基因拟南芥抗逆性研究 | 第84-88页 |
| 4 讨论 | 第88-94页 |
| 4.1 CkLEA基因克隆与分析 | 第88-89页 |
| 4.2 CkLEA蛋白系统进化分析 | 第89页 |
| 4.3 CkLEA基因表达模式分析 | 第89-90页 |
| 4.4 CkLEA基因参与干旱胁迫响应 | 第90-91页 |
| 4.5 CkLEA2-2参与NaCl胁迫响应 | 第91页 |
| 4.6 CkLEA基因与ABA信号途径 | 第91-92页 |
| 4.7 CkLEA2-2和CkLEA2-3在功能上的相同与差异 | 第92页 |
| 4.8 CkLEA蛋白在逆境胁迫中的作用机制 | 第92-94页 |
| 5 结论 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-113页 |
| 作者简介 | 第113-114页 |
