摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
论文总体设计 | 第17-18页 |
第一部分 氧化应激机制下的自噬在心血管应激和运动中的研究现状及展望 | 第18-42页 |
1 心脏活性氧介导氧化应激概述 | 第18-23页 |
1.1 氧化应激与活性氧平衡 | 第18-19页 |
1.2 氧化应激与线粒体渗透性 | 第19-20页 |
1.3 氧化应激与细胞自噬 | 第20-21页 |
1.4 氧化应激与线粒体自噬 | 第21-23页 |
2 氧化应激与心血管应激 | 第23-26页 |
2.1 氧化应激与心肌缺血 | 第23-24页 |
2.2 氧化应激与缺血再灌注损伤 | 第24-25页 |
2.3 氧化应激与缺血预适应 | 第25-26页 |
3 氧化应激与运动的研究现状 | 第26-31页 |
3.1 运动性氧化应激与心血管应激 | 第26-27页 |
3.2 氧化应激与长周期运动 | 第27-28页 |
3.3 氧化应激与短周期运动 | 第28-29页 |
3.4 氧化应激与运动预适应 | 第29-31页 |
4 展望 | 第31-32页 |
5 参考文献 | 第32-42页 |
第二部分 运动预适应对力竭运动大鼠心肌的早期和晚期保护效应 | 第42-70页 |
1 前言 | 第42-43页 |
2 材料与方法 | 第43-52页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第43-45页 |
2.2 主要技术路线 | 第45-46页 |
2.3 实验对象 | 第46页 |
2.4 实验分组 | 第46-47页 |
2.5 适应性训练 | 第47页 |
2.6 运动预适应模型的建立 | 第47页 |
2.7 力竭运动至心肌损伤模型的建立 | 第47页 |
2.8 自噬阻滞剂渥曼青霉素的注射 | 第47页 |
2.9 取材 | 第47-48页 |
2.10 大鼠血清c Tn I含量的检测 | 第48页 |
2.11 组织固定包埋方法 | 第48页 |
2.12 HBFP染色 | 第48页 |
2.13 组织学图像处理和分析 | 第48页 |
2.14 透射电镜样本处理和观察 | 第48-49页 |
2.15 组织蛋白含量(考马斯亮蓝法)检测 | 第49页 |
2.16 MDA的检测 | 第49页 |
2.17 H_2O_2的检测 | 第49-50页 |
2.18 SOD活性的检测 | 第50-51页 |
2.19 BCA法检测蛋白浓度 | 第51页 |
2.20 SDS-PAGE凝胶电泳检测Mn SOD含量 | 第51-52页 |
2.21 统计学处理 | 第52页 |
3 实验结果 | 第52-64页 |
3.1 大鼠力竭运动的距离和时间 | 第52-53页 |
3.2 大鼠心肌血浆c Tn I水平的变化 | 第53-54页 |
3.3 大鼠心肌HBFP染色结果 | 第54-58页 |
3.4 大鼠心肌超微结构( 1.5K倍)观察结果 | 第58-59页 |
3.5 大鼠心肌MDA及H2O2含量 | 第59-61页 |
3.6 大鼠心肌Mn SOD和T-SOD活性结果 | 第61-63页 |
3.7 大鼠心肌Mn SOD水平的免疫印迹结果 | 第63-64页 |
4 分析讨论 | 第64-67页 |
4.1 力竭运动导致大鼠心肌损伤 | 第64-65页 |
4.2 运动预适应对力竭大鼠心肌的保护 | 第65-66页 |
4.3 自噬抑制对运动预适应心肌保护效应的影响 | 第66-67页 |
5 结论 | 第67页 |
6 参考文献 | 第67-70页 |
第三部分 氧化应激和细胞自噬在运动预适应及其保护效应中对线粒体自噬的影响 | 第70-102页 |
1 前言 | 第70-71页 |
2 材料与方法 | 第71-75页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第71-72页 |
2.2 主要技术路线 | 第72-73页 |
2.3 实验对象 | 第73页 |
2.4 实验模型与取材 | 第73页 |
2.5 透射电镜观察 | 第73页 |
2.6 Phos-tag法检测VDAC1磷酸化 | 第73页 |
2.7 组织线粒体的提取 | 第73-74页 |
2.8 免疫印迹法 | 第74页 |
2.9 免疫荧光双标法 | 第74页 |
2.10 免疫荧光双标图像采集和分析 | 第74-75页 |
2.11 统计学处理 | 第75页 |
3 实验结果 | 第75-92页 |
3.1 大鼠心肌线粒体及自噬体超微结构( 3.0 K)观察结果 | 第75-77页 |
3.2 大鼠心肌VDAC1及其磷酸化水平的免疫印迹结果 | 第77-78页 |
3.3 线粒体提取的验证性免疫印迹实验结果 | 第78页 |
3.4 大鼠心肌细胞胞浆和线粒体Cyt-c免疫印迹结果及二者比值 | 第78-80页 |
3.5 大鼠心肌Beclin1与Bcl-2 水平的免疫印迹结果及二者比值 | 第80-82页 |
3.6 大鼠心肌LC3的免疫印迹结果及LC3II与LC3I比值 | 第82-84页 |
3.7 大鼠心肌LC3在线粒体标记蛋白COX4/1 上的免疫荧光共定位情况及其图像处理分析 | 第84-90页 |
3.8 大鼠心肌线粒体及胞浆中p62水平的免疫印迹结果 | 第90-92页 |
4 分析讨论 | 第92-98页 |
4.1 力竭运动中氧化应激 -线粒体 -细胞自噬三者的作用关系 | 第92-93页 |
4.2 运动预适应及其保护效应中氧化应激 -线粒体 -细胞自噬三者作用关系 | 第93-96页 |
4.3 自噬抑制对运动预适应心肌保护效应中氧化应激 -线粒体 -细胞自噬三者作用关系的影响 | 第96-98页 |
5 结论 | 第98页 |
6 参考文献 | 第98-102页 |
第四部分 线粒体自噬在运动预适应及其保护效应中发生的分子机制 | 第102-127页 |
1 前言 | 第102-103页 |
2 材料与方法 | 第103-105页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第103-104页 |
2.2 主要技术路线 | 第104页 |
2.3 实验对象 | 第104页 |
2.4 实验模型与取材 | 第104-105页 |
2.5 线粒体提取 | 第105页 |
2.6 免疫印迹法 | 第105页 |
2.7 免疫荧光双标法 | 第105页 |
2.8 组织学图像处理和分析 | 第105页 |
2.9 统计学处理 | 第105页 |
3 实验结果 | 第105-119页 |
3.1 大鼠心肌线粒体及胞浆中Parkin水平的免疫印迹结果 | 第105-107页 |
3.2 大鼠心肌Parkin与其线粒体识别蛋白TOM70的免疫荧光共定位情况及其图像处理分析 | 第107-112页 |
3.3 大鼠心肌线粒体及胞浆中Bnip3水平的免疫印迹结果 | 第112-114页 |
3.4 大鼠心肌Bnip3与其线粒体识别蛋白TOM20的免疫荧光共定位情况及其图像处理分析 | 第114-119页 |
4 分析讨论 | 第119-124页 |
4.1 力竭运动中线粒体自噬的调节因素和影响 | 第119-121页 |
4.2 运动预适应及其保护效应中线粒体自噬的调节因素和影响 | 第121-122页 |
4.3 自噬抑制对运动预适应心肌保护效应中线粒体自噬的影响 | 第122-124页 |
5 结论 | 第124页 |
6 参考文献 | 第124-127页 |
全文总结 | 第127-130页 |
致谢 | 第130-131页 |
附录 | 第131-133页 |
英文缩略词表 | 第133-135页 |