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氧化应激与线粒体自噬在运动预适应心肌保护效应中的作用及分子机制

摘要第5-8页
Abstract第8-12页
论文总体设计第17-18页
第一部分 氧化应激机制下的自噬在心血管应激和运动中的研究现状及展望第18-42页
    1 心脏活性氧介导氧化应激概述第18-23页
        1.1 氧化应激与活性氧平衡第18-19页
        1.2 氧化应激与线粒体渗透性第19-20页
        1.3 氧化应激与细胞自噬第20-21页
        1.4 氧化应激与线粒体自噬第21-23页
    2 氧化应激与心血管应激第23-26页
        2.1 氧化应激与心肌缺血第23-24页
        2.2 氧化应激与缺血再灌注损伤第24-25页
        2.3 氧化应激与缺血预适应第25-26页
    3 氧化应激与运动的研究现状第26-31页
        3.1 运动性氧化应激与心血管应激第26-27页
        3.2 氧化应激与长周期运动第27-28页
        3.3 氧化应激与短周期运动第28-29页
        3.4 氧化应激与运动预适应第29-31页
    4 展望第31-32页
    5 参考文献第32-42页
第二部分 运动预适应对力竭运动大鼠心肌的早期和晚期保护效应第42-70页
    1 前言第42-43页
    2 材料与方法第43-52页
        2.1 主要试剂和仪器第43-45页
        2.2 主要技术路线第45-46页
        2.3 实验对象第46页
        2.4 实验分组第46-47页
        2.5 适应性训练第47页
        2.6 运动预适应模型的建立第47页
        2.7 力竭运动至心肌损伤模型的建立第47页
        2.8 自噬阻滞剂渥曼青霉素的注射第47页
        2.9 取材第47-48页
        2.10 大鼠血清c Tn I含量的检测第48页
        2.11 组织固定包埋方法第48页
        2.12 HBFP染色第48页
        2.13 组织学图像处理和分析第48页
        2.14 透射电镜样本处理和观察第48-49页
        2.15 组织蛋白含量(考马斯亮蓝法)检测第49页
        2.16 MDA的检测第49页
        2.17 H_2O_2的检测第49-50页
        2.18 SOD活性的检测第50-51页
        2.19 BCA法检测蛋白浓度第51页
        2.20 SDS-PAGE凝胶电泳检测Mn SOD含量第51-52页
        2.21 统计学处理第52页
    3 实验结果第52-64页
        3.1 大鼠力竭运动的距离和时间第52-53页
        3.2 大鼠心肌血浆c Tn I水平的变化第53-54页
        3.3 大鼠心肌HBFP染色结果第54-58页
        3.4 大鼠心肌超微结构( 1.5K倍)观察结果第58-59页
        3.5 大鼠心肌MDA及H2O2含量第59-61页
        3.6 大鼠心肌Mn SOD和T-SOD活性结果第61-63页
        3.7 大鼠心肌Mn SOD水平的免疫印迹结果第63-64页
    4 分析讨论第64-67页
        4.1 力竭运动导致大鼠心肌损伤第64-65页
        4.2 运动预适应对力竭大鼠心肌的保护第65-66页
        4.3 自噬抑制对运动预适应心肌保护效应的影响第66-67页
    5 结论第67页
    6 参考文献第67-70页
第三部分 氧化应激和细胞自噬在运动预适应及其保护效应中对线粒体自噬的影响第70-102页
    1 前言第70-71页
    2 材料与方法第71-75页
        2.1 主要试剂和仪器第71-72页
        2.2 主要技术路线第72-73页
        2.3 实验对象第73页
        2.4 实验模型与取材第73页
        2.5 透射电镜观察第73页
        2.6 Phos-tag法检测VDAC1磷酸化第73页
        2.7 组织线粒体的提取第73-74页
        2.8 免疫印迹法第74页
        2.9 免疫荧光双标法第74页
        2.10 免疫荧光双标图像采集和分析第74-75页
        2.11 统计学处理第75页
    3 实验结果第75-92页
        3.1 大鼠心肌线粒体及自噬体超微结构( 3.0 K)观察结果第75-77页
        3.2 大鼠心肌VDAC1及其磷酸化水平的免疫印迹结果第77-78页
        3.3 线粒体提取的验证性免疫印迹实验结果第78页
        3.4 大鼠心肌细胞胞浆和线粒体Cyt-c免疫印迹结果及二者比值第78-80页
        3.5 大鼠心肌Beclin1与Bcl-2 水平的免疫印迹结果及二者比值第80-82页
        3.6 大鼠心肌LC3的免疫印迹结果及LC3II与LC3I比值第82-84页
        3.7 大鼠心肌LC3在线粒体标记蛋白COX4/1 上的免疫荧光共定位情况及其图像处理分析第84-90页
        3.8 大鼠心肌线粒体及胞浆中p62水平的免疫印迹结果第90-92页
    4 分析讨论第92-98页
        4.1 力竭运动中氧化应激 -线粒体 -细胞自噬三者的作用关系第92-93页
        4.2 运动预适应及其保护效应中氧化应激 -线粒体 -细胞自噬三者作用关系第93-96页
        4.3 自噬抑制对运动预适应心肌保护效应中氧化应激 -线粒体 -细胞自噬三者作用关系的影响第96-98页
    5 结论第98页
    6 参考文献第98-102页
第四部分 线粒体自噬在运动预适应及其保护效应中发生的分子机制第102-127页
    1 前言第102-103页
    2 材料与方法第103-105页
        2.1 主要试剂和仪器第103-104页
        2.2 主要技术路线第104页
        2.3 实验对象第104页
        2.4 实验模型与取材第104-105页
        2.5 线粒体提取第105页
        2.6 免疫印迹法第105页
        2.7 免疫荧光双标法第105页
        2.8 组织学图像处理和分析第105页
        2.9 统计学处理第105页
    3 实验结果第105-119页
        3.1 大鼠心肌线粒体及胞浆中Parkin水平的免疫印迹结果第105-107页
        3.2 大鼠心肌Parkin与其线粒体识别蛋白TOM70的免疫荧光共定位情况及其图像处理分析第107-112页
        3.3 大鼠心肌线粒体及胞浆中Bnip3水平的免疫印迹结果第112-114页
        3.4 大鼠心肌Bnip3与其线粒体识别蛋白TOM20的免疫荧光共定位情况及其图像处理分析第114-119页
    4 分析讨论第119-124页
        4.1 力竭运动中线粒体自噬的调节因素和影响第119-121页
        4.2 运动预适应及其保护效应中线粒体自噬的调节因素和影响第121-122页
        4.3 自噬抑制对运动预适应心肌保护效应中线粒体自噬的影响第122-124页
    5 结论第124页
    6 参考文献第124-127页
全文总结第127-130页
致谢第130-131页
附录第131-133页
英文缩略词表第133-135页

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