| 摘要 | 第13-16页 |
| ABSTRACT | 第16-19页 |
| 符号与缩写 | 第20-21页 |
| 第一章 绪论 | 第21-63页 |
| 1.1 DNA甲基转移酶概述 | 第21-22页 |
| 1.1.1 DNA甲基转移酶定义及功能 | 第21-22页 |
| 1.1.2 DNA甲基转移酶的分类 | 第22页 |
| 1.1.3 DNA甲基转移酶的研究意义 | 第22页 |
| 1.2 DNA甲基转移酶活性的检测方法 | 第22-39页 |
| 1.2.1 传统意义上的检测方法 | 第22-23页 |
| 1.2.2 新型的检测方法 | 第23-39页 |
| 1.2.2.1 重亚硫酸盐转化法 | 第23-25页 |
| 1.2.2.2 亲和富集法 | 第25-27页 |
| 1.2.2.3 核酸酶消化法 | 第27-39页 |
| 1.3 荧光生物传感方法 | 第39-41页 |
| 1.3.1 基于荧光染料的荧光生物传感法及其生物学应用 | 第39-41页 |
| 1.3.2 基于FRET的荧光生物传感法及其生物学应用 | 第41页 |
| 1.4 本论文的创新点和研究内容 | 第41-44页 |
| 1.4.1 创新点 | 第41-42页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-63页 |
| 第二章 基于链置换扩增和DNAzyme扩增的荧光双扩增策略灵敏检测DNA甲基转移酶活性 | 第63-85页 |
| 2.1 引言 | 第63-64页 |
| 2.2 实验部分 | 第64-67页 |
| 2.2.1 试剂和仪器 | 第64-65页 |
| 2.2.2 M.SssI MTase活性分析 | 第65-66页 |
| 2.2.3 凝胶电泳分析DNA甲基化和切割过程 | 第66页 |
| 2.2.4 抑制剂对M.SssI MTase活性的抑制作用 | 第66-67页 |
| 2.2.5 检测方法的选择性 | 第67页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第67-79页 |
| 2.3.1 DNA甲基化分析的原理 | 第67-68页 |
| 2.3.2 荧光双扩增策略用于灵敏检测DNA MTase活性的可行性 | 第68-70页 |
| 2.3.3 识别探针序列优化 | 第70页 |
| 2.3.4 分析条件优化 | 第70-74页 |
| 2.3.5 荧光双扩增策略用于灵敏检测DNA MTase活性的分析性能 | 第74-75页 |
| 2.3.6 双扩增策略的选择性 | 第75-76页 |
| 2.3.7 双扩增策略的精密度和重现性 | 第76-77页 |
| 2.3.8 双扩增策略的回收率 | 第77页 |
| 2.3.9 抑制剂对M.SssI MTase活性的抑制作用 | 第77-79页 |
| 2.4 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 第三章 环介导的级联扩增策略用于DNA甲基转移酶活性的高灵敏精确检测 | 第85-109页 |
| 3.1 引言 | 第85-86页 |
| 3.2 实验部分 | 第86-89页 |
| 3.2.1 试剂和仪器 | 第86-88页 |
| 3.2.2 Dam MTase活性检测 | 第88页 |
| 3.2.3 凝胶电泳研究甲基化和切割反应 | 第88-89页 |
| 3.2.4 抑制剂对Dam MTase活性的影响 | 第89页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第89-102页 |
| 3.3.1 级联扩增策略用于Dam MTase活性分析的原理 | 第89-90页 |
| 3.3.2 级联扩增策略用于Dam MTase活性高灵敏精确检测的可行性 | 第90-91页 |
| 3.3.3 识别探针序列设计优化 | 第91-92页 |
| 3.3.4 实验条件优化 | 第92-96页 |
| 3.3.5 级联扩增策略用于Dam MTase活性高灵敏精确检测的分析性能 | 第96-99页 |
| 3.3.6 级联扩增策略的选择性 | 第99页 |
| 3.3.7 级联扩增策略的精密度和重现性 | 第99-100页 |
| 3.3.8 级联扩增策略的回收率 | 第100-101页 |
| 3.3.9 级联扩增策略的抑制剂分析 | 第101-102页 |
| 3.4 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-109页 |
| 第四章 多重封闭引物介导的滚环扩增策略灵敏检测DNA甲基转移酶活性 | 第109-131页 |
| 4.1 引言 | 第109-110页 |
| 4.2 实验部分 | 第110-113页 |
| 4.2.1 试剂和仪器 | 第110-112页 |
| 4.2.2 检测Dam MTase活性 | 第112页 |
| 4.2.3 凝胶电泳实验验证甲基化和切割反应的可行性 | 第112页 |
| 4.2.4 Dam MTase活性分析的抑制评估 | 第112-113页 |
| 4.2.5 Dam MTase活性检测策略的选择性考察 | 第113页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第113-125页 |
| 4.3.1 多重封闭引物介导的RCA策略灵敏检测Dam MTase活性的原理 | 第113-114页 |
| 4.3.2 多重封闭引物介导的RCA策略灵敏检测Dam MTase活性的可行性 | 第114-115页 |
| 4.3.3 优化DRP设计 | 第115-116页 |
| 4.3.4 优化反应条件 | 第116-119页 |
| 4.3.5 考察Dam MTase活性检测策略的分析性能 | 第119-122页 |
| 4.3.6 考察Dam MTase活性检测策略的选择性 | 第122页 |
| 4.3.7 考察Dam MTase活性检测策略的精密度和重现性 | 第122-123页 |
| 4.3.8 Dam MTase活性检测策略分析复杂生物样品 | 第123页 |
| 4.3.9 研究DamMTase活性的抑制作用 | 第123-125页 |
| 4.4 结论 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-131页 |
| 第五章 一体化构象可变式探针介导的链置换扩增策略检测DNA甲基转移酶活性 | 第131-145页 |
| 5.1 引言 | 第131-132页 |
| 5.2 实验部分 | 第132-133页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第132页 |
| 5.2.2 DNA MIase活性检测 | 第132-133页 |
| 5.2.3 Dam MTase活性分析的抑制评估 | 第133页 |
| 5.2.4 Dam MTase活性检测策略的选择性考察 | 第133页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第133-141页 |
| 5.3.1 一体化构象可变式探针介导的扩增策略检测DNA MTase活性的原理 | 第133-134页 |
| 5.3.2 基于构象转变原理的扩增策略检测Dam MTase活性的可行性分析 | 第134-135页 |
| 5.3.3 优化检测系统中的反应条件 | 第135-137页 |
| 5.3.4 基于构象转变原理的扩增策略的检测性能考察 | 第137-138页 |
| 5.3.5 基于构象转变原理的扩增策略的选择性考察 | 第138-139页 |
| 5.3.6 基于构象转变原理的扩增策略的精密度和重现性考察 | 第139页 |
| 5.3.7 基于构象转变原理的扩增策略分析复杂生物样品 | 第139-140页 |
| 5.3.8 Dam MTase活性的抑制剂评估 | 第140-141页 |
| 5.4 结论 | 第141-142页 |
| 参考文献 | 第142-145页 |
| 第六章 结论和展望 | 第145-147页 |
| 6.1 结论 | 第145-146页 |
| 6.2 前景展望 | 第146-147页 |
| 致谢 | 第147-149页 |
| 博士期间发表论文 | 第149-150页 |
| 附件 | 第150-163页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第163页 |
