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TRIM31在抗病毒天然免疫中的功能及其机制研究

中文摘要第8-20页
Abstract第20-29页
符号说明第30-32页
前言第32-35页
材料和方法第35-57页
    1. 实验材料第35-38页
        1.1 主要试剂第35-36页
        1.2 细胞株、质粒及小鼠来源第36页
        1.3 主要仪器第36-37页
        1.4 PCR引物第37-38页
        1.5 TRIM31干扰RNA序列第38页
    2. 实验方法第38-57页
        2.1 试剂配制第38-39页
        2.2 细胞培养,复苏和冻存第39-41页
        2.3 RNA提取与反转录第41-42页
        2.4 普通PCR与实时定量PCR第42-43页
        2.5 Western blot检测蛋白水平的变化第43-47页
        2.6 表达载体构建第47-51页
        2.7 点突变体的构建第51-53页
        2.8 细胞转染实验步骤第53页
        2.9 免疫共沉淀(Co-IP)实验第53-54页
        2.10 体外泛素化实验第54页
        2.11 体外蛋白的翻译第54-55页
        2.12 空斑法测定VSV/HSV-1病毒滴度第55页
        2.13 线粒体粗提第55-56页
        2.14 免疫荧光染色(细胞爬片)第56-57页
实验结果第57-81页
    1. RNA病毒感染引起TRIM31在线粒体聚集第57-58页
    2. TRIM31正向调控IFN-β的产生和抗病毒免疫第58-61页
        2.1 TRIM31干扰后抑制IFN-β的产生第58页
        2.2 TRIM31高表达促进RNA病毒介导的IFN-β的产生第58-59页
        2.3 TRIM31的抗病毒作用第59-61页
    3. TRIM31缺失在细胞水平抑制抗病毒反应第61-64页
        3.1 TRIM31缺陷抑制RNA病毒介导的IFN-β产生第61-62页
        3.2 TRIM31敲基因小鼠抑制RNA病毒介导的免疫反应第62-64页
    4. TRIM31缺失小鼠更易感染RNA病毒第64-66页
    5. TRIM31促进RLR信号通路的活化第66-68页
    6. TRIM31靶向MAVS第68-71页
    7. TRIM31促进MAVS泛素化修饰第71-72页
    8. TRIM31促进MAVS的K63位泛素化修饰第72-74页
    9. TRIM31对MAVS第10位,第311位,第461位赖氨酸发进行K63位泛素素化修饰第74-75页
    10. TRIM31促进MAVS阮蛋白样多聚体的形成第75-77页
    11. 基因恢复实验检测TRIM31对MAVS多聚化形成的影响第77-79页
    12. TRIM31促进抗病毒作用的模式图第79-81页
讨论第81-83页
参考文献第83-87页
攻读博士学位期间发表的论文第87-88页
致谢第88-89页
发表论文一第89-130页
发表论文二第130-162页
学位论文评阅及答辩情况表第162页

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