| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第19-20页 |
| 第1章 绪论 | 第20-31页 |
| 1.1 植物类受体蛋白激酶 | 第20-24页 |
| 1.1.1 植物类受体蛋白激酶的发现 | 第20页 |
| 1.1.2 植物类受体蛋白激酶的研究进展 | 第20-24页 |
| 1.2 植物CrRLK1-L亚家族类受体蛋白激酶 | 第24-27页 |
| 1.2.1 植物CrRLK1-L亚家族类受体蛋白激酶的发现 | 第24-25页 |
| 1.2.2 CrRLK1-L亚家族类受体蛋白激酶FER的功能研究 | 第25-27页 |
| 1.3 植物胞质类受体蛋白激酶RLCK | 第27-29页 |
| 1.3.1 植物胞质类受体蛋白激酶RLCK的发现 | 第27页 |
| 1.3.2 植物胞质类受体蛋白激酶RLCK的功能研究 | 第27-29页 |
| 1.4 本论文的研究目的和意义 | 第29-31页 |
| 第2章 拟南芥类受体蛋白激酶RIPK与FER在细胞膜上相互作用 | 第31-60页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-35页 |
| 2.1.1 植物材料和菌株 | 第31页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第31页 |
| 2.1.3 相关试剂 | 第31-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-44页 |
| 2.2.1 拟南芥或水稻总RNA的提取和逆转录 | 第35-36页 |
| 2.2.2 RALF1小肽的制备及活性分析 | 第36-37页 |
| 2.2.3 免疫共沉淀-质谱法鉴定与FER互作的下游蛋白 | 第37-39页 |
| 2.2.4 基因克隆 | 第39页 |
| 2.2.5 载体构建 | 第39-40页 |
| 2.2.6 酵母双杂交实验 | 第40-42页 |
| 2.2.7 BiFC实验 | 第42页 |
| 2.2.8 融合His标签的重组蛋白的表达与纯化 | 第42-43页 |
| 2.2.9 融合GST标签的重组蛋白的表达与纯化 | 第43-44页 |
| 2.2.10 GST pull-down实验 | 第44页 |
| 2.3 结果与分析 | 第44-58页 |
| 2.3.1 免疫共沉淀-质谱法表明类受体激酶RIPK与FER互作 | 第44-47页 |
| 2.3.2 RIPK与FER在酵母中相互作用 | 第47-52页 |
| 2.3.3 RIPK与FER在细胞膜上相互作用 | 第52-53页 |
| 2.3.4 RIPK与FER的胞内激酶域在体外相互作用 | 第53-54页 |
| 2.3.5 RIPK,FER与RALF1的表达模式分析 | 第54-55页 |
| 2.3.6 RIPK的同源蛋白OsRIPK-A与FER的同源蛋白OsFLR-2在水稻中相互作用 | 第55-58页 |
| 2.4 小结 | 第58-60页 |
| 第3章 拟南芥类受体蛋白激酶RIPK为FER的遗传下游成员 | 第60-82页 |
| 3.1 实验材料 | 第60-61页 |
| 3.1.1 植物材料和菌株 | 第60页 |
| 3.1.2 质粒载体 | 第60页 |
| 3.1.3 相关试剂 | 第60-61页 |
| 3.2 实验方法 | 第61-64页 |
| 3.2.1 转基因拟南芥的获得及鉴定 | 第61-62页 |
| 3.2.2 fer-4/ripk双突变体的获得及鉴定 | 第62页 |
| 3.2.3 拟南芥根毛的表型分析 | 第62页 |
| 3.2.4 拟南芥根际酸化速率的表型分析 | 第62-63页 |
| 3.2.5 AHA2多克隆抗体的制备及特异性分析 | 第63-64页 |
| 3.2.6 植株形态的表征 | 第64页 |
| 3.2.7 拟南芥叶片平铺细胞(Pavement cell)嵌合度及大小的表征 | 第64页 |
| 3.2.8 生长素NAA的响应 | 第64页 |
| 3.2.9 脱落酸ABA的响应 | 第64页 |
| 3.3 结果与分析 | 第64-80页 |
| 3.3.1 ripk突变体根毛变少变短 | 第64-68页 |
| 3.3.2 ripk突变体植株形态及叶片变小 | 第68-71页 |
| 3.3.3 ripk突变体叶平铺细胞嵌合度降低 | 第71-72页 |
| 3.3.4 ripk突变体根际质膜氢泵活性增强 | 第72-77页 |
| 3.3.5 ripk突变体对生长素NAA敏感度下降 | 第77-79页 |
| 3.3.6 ripk突变体对脱落酸ABA表现敏感 | 第79-80页 |
| 3.3.7 ripk突变体的育性及种子大小无显著变化 | 第80页 |
| 3.4 小结 | 第80-82页 |
| 第4章 拟南芥类受体蛋白激酶RIPK与FER相互磷酸化 | 第82-100页 |
| 4.1 实验材料 | 第82-83页 |
| 4.1.1 植物材料和菌株 | 第82页 |
| 4.1.2 质粒载体 | 第82页 |
| 4.1.3 相关试剂 | 第82-83页 |
| 4.2 实验方法 | 第83-88页 |
| 4.2.1 免疫印迹流程 | 第83-84页 |
| 4.2.2 RIPK多克隆抗体的制备及特异性分析 | 第84-85页 |
| 4.2.3 FER乡克隆抗体的制备及特异性分析 | 第85页 |
| 4.2.4 碱性磷酸酶(CIP)实验分析 | 第85-86页 |
| 4.2.5 RIPK的体内磷酸化分析 | 第86页 |
| 4.2.6 FER的体内磷酸化分析 | 第86页 |
| 4.2.7 FER与RIPK的体外相互磷酸化分析 | 第86-87页 |
| 4.2.8 FER与RIPK相互磷酸化位点的质谱分析 | 第87-88页 |
| 4.2.9 RALF1小肽诱导RIPK磷酸化的分析 | 第88页 |
| 4.2.10 ripk突变体对RALF1小肽的敏感性分析 | 第88页 |
| 4.3 结果与分析 | 第88-99页 |
| 4.3.1 fer-4突变体中RIPK的磷酸化水平降低 | 第88-91页 |
| 4.3.2 ripk突变体中FER的磷酸化水平降低 | 第91-92页 |
| 4.3.3 FER与RIPK在体外相互磷酸化 | 第92-95页 |
| 4.3.4 RALF1小肽诱导RIPK的磷酸化水平变化 | 第95-97页 |
| 4.3.5 ripk突变体降低对RALF1小肽的敏感性 | 第97-99页 |
| 4.4 小结 | 第99-100页 |
| 第5章 拟南芥类受体蛋白激酶RIPK与FER共响应RALF1小肽信号 | 第100-111页 |
| 5.1 实验材料 | 第100页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第100页 |
| 5.1.2 质粒载体 | 第100页 |
| 5.1.3 相关试剂 | 第100页 |
| 5.2 实验方法 | 第100-103页 |
| 5.2.1 ralf1突变体的根毛表型分析 | 第100-101页 |
| 5.2.2 ralf1突变体的氢泵活性表型分析 | 第101页 |
| 5.2.3 RALF1小肽影响FER与RIPK互作的磷酸化分析 | 第101-102页 |
| 5.2.4 RALF1小肽影响FER与RIPK互作的BiFC分析 | 第102页 |
| 5.2.5 免疫共沉淀(Co-IP)流程 | 第102-103页 |
| 5.2.6 RALF1小肽影响FER与RIPK互作的Co-IP分析 | 第103页 |
| 5.3 结果与分析 | 第103-110页 |
| 5.3.1 ralf1突变体的氢泵活性增强 | 第103-104页 |
| 5.3.2 RALF1信号促进FER与RIPK的相互磷酸化 | 第104-105页 |
| 5.3.3 RALF1信号增强FER与RIPK在原生质体中的互作 | 第105-106页 |
| 5.3.4 RALF1信号增强FER与RIPK在植物体内的互作 | 第106-108页 |
| 5.3.5 RIPK过表达入fer-4突变体增强对RALF1的响应 | 第108-110页 |
| 5.4 小结 | 第110-111页 |
| 讨论与展望 | 第111-114页 |
| 参考文献 | 第114-127页 |
| 附录A 用于载体构建,RT-PCR以及序列分析的引物 | 第127-129页 |
| 附录B 真菌谷氨酸脱氢酶基因SsGDH与TrGDH的克隆、表征及在转基因水稻中的功能研究 | 第129-155页 |
| 参考文献 | 第152-155页 |
| 攻读博士学位期间所发表和完成的学术论文目录 | 第155-156页 |
| 致谢 | 第156-157页 |
