| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词 | 第12-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-21页 |
| 第一章 猪血凝性脑脊髓炎病毒的研究进展 | 第13-21页 |
| 1.1 PHEV感染的危害性 | 第13-14页 |
| 1.2 PHEV致病机制的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3 PHE诊断方法的研究进展 | 第16-21页 |
| 1.3.1 电镜观察 | 第16-17页 |
| 1.3.2 免疫组化/免疫荧光方法 | 第17页 |
| 1.3.3 血凝/血凝抑制实验 | 第17-18页 |
| 1.3.4 中和实验 | 第18页 |
| 1.3.5 分子生物学方法 | 第18-20页 |
| 1.3.6 ELISA | 第20页 |
| 1.3.7 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二篇 研究内容 | 第21-51页 |
| 第1章 PHEV N基因的原核表达 | 第21-39页 |
| 1.1 材料 | 第21-25页 |
| 1.1.1 病毒、质粒和细胞 | 第21页 |
| 1.1.2 血清与抗体 | 第21-22页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第22页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第22-23页 |
| 1.1.5 主要试剂的配制 | 第23-25页 |
| 1.2 方法 | 第25-31页 |
| 1.2.1 PHEV N基因的克隆 | 第25-28页 |
| 1.2.3 N基因重组表达载体(pET28a-N)的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| 1.2.3 重组N蛋白的诱导表达 | 第29页 |
| 1.2.4 重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第29-30页 |
| 1.2.5 重组N蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| 1.2.6 纯化N蛋白的SDS-PAGE检测 | 第31页 |
| 1.2.7 纯化蛋白的Western blot检测 | 第31页 |
| 1.3 结果 | 第31-36页 |
| 1.3.1 RNA的提取 | 第31-32页 |
| 1.3.2 N基因的PCR扩增结果 | 第32页 |
| 1.3.2 重组克隆质粒(pMD-N)的双酶切鉴定结果 | 第32-33页 |
| 1.3.3 基因序列测定和分析 | 第33页 |
| 1.3.4 重组原核表达质粒(pET28a-N)的双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| 1.3.5 重组质粒测序分析 | 第34页 |
| 1.3.6 表达产物的鉴定 | 第34-36页 |
| 1.4 讨论 | 第36-38页 |
| 1.5 小结 | 第38-39页 |
| 第2章 PHEV重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用. | 第39-51页 |
| 2.1 材料 | 第39-41页 |
| 2.1.1 主要试剂和血清 | 第39页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.3 主要工作液的配制 | 第40-41页 |
| 2.2 方法 | 第41-43页 |
| 2.2.1 PHEV重组N蛋白ELISA检测方法实验条件的确定 | 第41-42页 |
| 2.2.2 特异性试验 | 第42页 |
| 2.2.3 批内重复性试验鉴定 | 第42页 |
| 2.2.4 批间重复性试验 | 第42-43页 |
| 2.2.5 ELISA方法的初步应用 | 第43页 |
| 2.3 结果 | 第43-49页 |
| 2.3.1 PHEV重组N蛋白ELISA检测方法实验条件的确定 | 第43-47页 |
| 2.3.2 PHEV重组N蛋白间接ELISA阳性、阴性判定标准 | 第47页 |
| 2.3.3 特异性试验 | 第47-48页 |
| 2.3.4 重复性试验 | 第48页 |
| 2.3.5 临床样品的检测 | 第48-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-50页 |
| 2.5 小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 导师简介 | 第57-58页 |
| 作者简介及科研成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
