| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-28页 |
| ·南极大陆的形成及其鱼类的适应性进化 | 第11-13页 |
| ·南极大陆的形成过程 | 第11页 |
| ·南极鱼类对寒冷环境的适应 | 第11-13页 |
| ·裂腹鱼类及其起源演化 | 第13-15页 |
| ·裂腹鱼类的起源演化 | 第13-14页 |
| ·裂腹鱼类的起源演化与高原隆升 | 第14-15页 |
| ·Zona pellucida（透明带）基因研究进展 | 第15-26页 |
| ·哺乳动物的ZP基因 | 第16-18页 |
| ·鸟类和两栖类的ZP基因 | 第18页 |
| ·鱼类的ZP基因 | 第18-21页 |
| ·软体动物和海鞘类卵黄膜（VE） | 第21-22页 |
| ·ZP domain介导的卵壳蛋白组装 | 第22-24页 |
| ·南极Notothenioids鱼类ZP基因 | 第24-26页 |
| ·本研究的主要内容和意义 | 第26-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-44页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·主要实验仪器和试剂 | 第28-31页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·所用各种试剂、试剂盒及缓冲液 | 第29-30页 |
| ·样品、菌株和质粒 | 第30-31页 |
| ·实验的方法和步骤 | 第31-44页 |
| ·Zona pellucida基因真核表达载体的构建 | 第31-36页 |
| ·pIRES2-ZP-EGFP载体的定点突变 | 第36-38页 |
| ·细胞培养及转染 | 第38-40页 |
| ·总蛋白的提取与目的蛋白纯化 | 第40-41页 |
| ·目的蛋白ZP纯化质量的检测 | 第41-42页 |
| ·ZP蛋白的冰晶实验（活性检测） | 第42-44页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第44-58页 |
| ·齐口裂腹鱼ZP3 基因 | 第44-51页 |
| ·SP_ZP3 基因的克隆与序列分析 | 第44-48页 |
| ·真核表达载体的构建及定点突变（Site-Directed Mutagenesis） | 第48-49页 |
| ·转基因细胞系筛选，表达检测及纯化 | 第49-51页 |
| ·重组蛋白SP_ZP3 的冰晶实验 | 第51页 |
| ·南极Notothenioids鱼类ZP基因 | 第51-55页 |
| ·卵壳总蛋白的冰晶结合活性 | 第51-53页 |
| ·体外表达南极鱼DmZPC5 蛋白的冰晶结合活性 | 第53-54页 |
| ·DmZPC5 的冰晶结合活性与ZP结构域的关系 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| ·南极鱼类的低温适应性与ZP蛋白的关系 | 第55-56页 |
| ·齐口裂腹鱼SP_ZP3 的冰晶结合活性 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
