| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| ·颠茄的研究概况 | 第10-12页 |
| ·颠茄的形态学特征 | 第10页 |
| ·颠茄的生物学特性 | 第10-11页 |
| ·颠茄的化学成分及其药用价值 | 第11-12页 |
| ·颠茄的组织培养研究 | 第12-13页 |
| ·农杆菌介导植物悬浮细胞转化的研究 | 第13-15页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导 | 第13-14页 |
| ·植物细胞悬浮系的建立 | 第14页 |
| ·胚性细胞悬浮系遗传转化的方法研究 | 第14-15页 |
| ·颠茄的代谢工程研究进展 | 第15-20页 |
| ·颠茄代谢工程中重要基因的研究进展 | 第15-16页 |
| ·1,4-丁二胺-氮-甲基转移酶(PMT)的研究进展 | 第16-17页 |
| ·以PMT为靶点的代谢工程研究进展 | 第17页 |
| ·诱导子对TAs的生物合成的影响 | 第17-20页 |
| 第2章 立题依据 | 第20-24页 |
| ·研究目的与意义 | 第20-21页 |
| ·研究范围与内容 | 第21页 |
| ·技术路线 | 第21-24页 |
| 第3章 材料与方法 | 第24-36页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·工程菌株 | 第24页 |
| ·仪器和设备 | 第24-25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·常规试剂及培养基的配制 | 第25-26页 |
| ·颠茄胚性细胞悬浮系的建立 | 第26-29页 |
| ·颠茄愈伤组织诱导的优化 | 第26-27页 |
| ·颠茄胚性愈伤组织的诱导 | 第27页 |
| ·颠茄胚性细胞悬浮系的建立 | 第27-28页 |
| ·颠茄胚性悬浮细胞的生长特性的测定 | 第28页 |
| ·颠茄胚性细胞悬浮系中体胚的产生与植株再生 | 第28-29页 |
| ·颠茄胚性细胞的遗传转化 | 第29-31页 |
| ·菌株活化 | 第29页 |
| ·工程菌C58C1-pCAMBIA1304~+-Abpmt转化颠茄 | 第29页 |
| ·转化条件的筛选 | 第29-31页 |
| ·抗生素对农杆菌抑制浓度的确定 | 第31页 |
| ·抗生素对颠茄胚性愈伤组织生长的影响 | 第31页 |
| ·潮霉素选择压的确定 | 第31页 |
| ·转化发根的分子与TAs含量检测 | 第31-36页 |
| ·抗性颠茄发根的PCR检测 | 第31-33页 |
| ·转基因颠茄发根的生长特性的测定 | 第33页 |
| ·转基因颠茄发根生物碱的提取及HPLC测定 | 第33-36页 |
| 第4章 结果与分析 | 第36-60页 |
| ·颠茄胚性细胞悬浮系的建立 | 第36-44页 |
| ·颠茄愈伤诱导的优化 | 第36-38页 |
| ·颠茄胚性愈伤组织的诱导 | 第38-39页 |
| ·颠茄胚性细胞悬浮系的建立 | 第39-40页 |
| ·颠茄胚性细胞的生长特性 | 第40-41页 |
| ·颠茄胚性悬浮细胞的体胚发生 | 第41-42页 |
| ·颠茄胚性悬浮细胞的植株再生 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·颠茄胚性细胞遗传转化体系的建立 | 第44-54页 |
| ·头孢霉素和羧苄青霉素抑制农杆菌浓度的确定 | 第44页 |
| ·头孢霉素和羧苄青霉素对颠茄胚性愈伤组织生长的影响 | 第44-47页 |
| ·潮霉素(Hygr)选择压的确定 | 第47-48页 |
| ·农杆菌菌液浓度对转化频率的影响 | 第48页 |
| ·农杆菌浸染时间对转化频率的影响 | 第48-49页 |
| ·共培养时间对转化频率的影响 | 第49页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)对转化频率的影响 | 第49-50页 |
| ·转基因颠茄发根的获得 | 第50-51页 |
| ·抗性发根中基因的PCR检测 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·转基因发根的托品烷类生物碱含量检测 | 第54-60页 |
| ·莨菪碱和东莨菪碱标准曲线的绘制 | 第54-55页 |
| ·颠茄转基因发根的生长曲线 | 第55页 |
| ·转基因发根的托品烷类生物碱的含量 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 第5章 结论与展望 | 第60-62页 |
| ·结论 | 第60页 |
| ·展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 附录 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 发表论文及参加课题一览表 | 第76页 |
