摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
英文縮略词一览表 | 第12-14页 |
第1章 文献综述 | 第14-20页 |
·CD4的分子结构与功能 | 第14-15页 |
·CD4的分子结构 | 第14-15页 |
·CD4的功能 | 第15页 |
·CD4在精子内化外源DNA中的作用 | 第15-16页 |
·酵母双杂交是筛选相互作用蛋白的有效方法 | 第16-18页 |
·酵母双杂交的原理 | 第16-18页 |
·酵母双杂交的应用 | 第18页 |
·问题与建议 | 第18-20页 |
·筛选鉴定CD4相互作用蛋白的必要性 | 第18页 |
·利用 | 第18-20页 |
第2章 引言 | 第20-22页 |
·本研究的目的意义 | 第20-21页 |
·本研究的技术路线 | 第21-22页 |
第3章 小鼠CD4基因诱饵表达载体的构建及自激活检测 | 第22-36页 |
·材料与方法 | 第22-30页 |
·材料 | 第22-26页 |
·方法 | 第26-30页 |
·总RNA的提取 | 第26-27页 |
·重组质粒pGB-mCD4的构建与鉴定 | 第27-29页 |
·CaCl_2制备感受态细胞(DH5α) | 第29页 |
·pGB-mCD4质粒载体转化至DH5α感受态 | 第29页 |
·筛选阳性克隆 | 第29页 |
·pGB-mCD4自激活的检测 | 第29-30页 |
·结果与分析 | 第30-33页 |
·总RNA提取及电泳结果 | 第30-31页 |
·重组质粒pGB-mCD4的鉴定 | 第31-32页 |
·重组质粒pGB-mCD4转化Y190菌株自激活检测 | 第32-33页 |
·讨论与结论 | 第33-36页 |
·构建诱饵载体pGB-mCD4 | 第34页 |
·诱饵载体pGB-mCD4自激活检测 | 第34-36页 |
第4章 利用酵母双杂交筛选CD4相互作用蛋白 | 第36-48页 |
·材料与方法 | 第36-39页 |
·材料 | 第36页 |
·方法 | 第36-39页 |
·利用Mouse Testis MATCHMAKER cDNA文库筛选 | 第36-37页 |
·阳性克隆抽提酵母质粒实验 | 第37-38页 |
·酵母质粒的扩增 | 第38页 |
·prey质粒与Bait质粒共转入Y190 | 第38-39页 |
·阳性克隆测序及生物信息学分析 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-44页 |
·酵母双杂交结果 | 第39-42页 |
·生物信息学分析结果 | 第42-44页 |
·讨论与结论 | 第44-48页 |
第5章 4个候选分子在哺乳动物细胞中的转化和表达检测 | 第48-58页 |
·材料与方法 | 第48-51页 |
·材料 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-51页 |
·真核表达载体的构建 | 第49-50页 |
·重组真核表达载体的鉴定 | 第50页 |
·细胞转染 | 第50页 |
·细胞培养 | 第50-51页 |
·结果与分析 | 第51-56页 |
·真核表达载体的构建 | 第51-53页 |
·转染后293FT细胞生长情况及转染效率 | 第53-55页 |
·裂解产物蛋白表达的检测 | 第55-56页 |
·讨论与结论 | 第56-58页 |
第6章 结论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
致谢 | 第64-66页 |
在读期间参与的课题和发表的文章 | 第66页 |