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小鼠CD4相互作用蛋白的筛选与鉴定

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
英文縮略词一览表第12-14页
第1章 文献综述第14-20页
   ·CD4的分子结构与功能第14-15页
     ·CD4的分子结构第14-15页
     ·CD4的功能第15页
   ·CD4在精子内化外源DNA中的作用第15-16页
   ·酵母双杂交是筛选相互作用蛋白的有效方法第16-18页
     ·酵母双杂交的原理第16-18页
     ·酵母双杂交的应用第18页
   ·问题与建议第18-20页
     ·筛选鉴定CD4相互作用蛋白的必要性第18页
     ·利用第18-20页
第2章 引言第20-22页
   ·本研究的目的意义第20-21页
   ·本研究的技术路线第21-22页
第3章 小鼠CD4基因诱饵表达载体的构建及自激活检测第22-36页
   ·材料与方法第22-30页
     ·材料第22-26页
     ·方法第26-30页
       ·总RNA的提取第26-27页
       ·重组质粒pGB-mCD4的构建与鉴定第27-29页
       ·CaCl_2制备感受态细胞(DH5α)第29页
       ·pGB-mCD4质粒载体转化至DH5α感受态第29页
       ·筛选阳性克隆第29页
       ·pGB-mCD4自激活的检测第29-30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·总RNA提取及电泳结果第30-31页
     ·重组质粒pGB-mCD4的鉴定第31-32页
     ·重组质粒pGB-mCD4转化Y190菌株自激活检测第32-33页
   ·讨论与结论第33-36页
     ·构建诱饵载体pGB-mCD4第34页
     ·诱饵载体pGB-mCD4自激活检测第34-36页
第4章 利用酵母双杂交筛选CD4相互作用蛋白第36-48页
   ·材料与方法第36-39页
     ·材料第36页
     ·方法第36-39页
       ·利用Mouse Testis MATCHMAKER cDNA文库筛选第36-37页
       ·阳性克隆抽提酵母质粒实验第37-38页
       ·酵母质粒的扩增第38页
       ·prey质粒与Bait质粒共转入Y190第38-39页
       ·阳性克隆测序及生物信息学分析第39页
   ·结果与分析第39-44页
     ·酵母双杂交结果第39-42页
     ·生物信息学分析结果第42-44页
   ·讨论与结论第44-48页
第5章 4个候选分子在哺乳动物细胞中的转化和表达检测第48-58页
   ·材料与方法第48-51页
     ·材料第48-49页
     ·方法第49-51页
       ·真核表达载体的构建第49-50页
       ·重组真核表达载体的鉴定第50页
       ·细胞转染第50页
       ·细胞培养第50-51页
   ·结果与分析第51-56页
     ·真核表达载体的构建第51-53页
     ·转染后293FT细胞生长情况及转染效率第53-55页
     ·裂解产物蛋白表达的检测第55-56页
   ·讨论与结论第56-58页
第6章 结论第58-60页
参考文献第60-64页
致谢第64-66页
在读期间参与的课题和发表的文章第66页

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