氰戊菊酯噬菌体抗体库的构建及筛选
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-19页 |
| ·农药残留概述 | 第8-9页 |
| ·农药残留现状 | 第8页 |
| ·农药残留的危害 | 第8-9页 |
| ·氰戊菊酯残留概述 | 第9-10页 |
| ·氰戊菊酯残留现状 | 第9页 |
| ·氰戊菊酯作用机理 | 第9-10页 |
| ·氰戊菊酯残留危害 | 第10页 |
| ·氰戊菊酯残留检测方法 | 第10-13页 |
| ·生物活体法 | 第10页 |
| ·分光光度法 | 第10-11页 |
| ·气相色谱法 | 第11页 |
| ·高效液相色谱法 | 第11页 |
| ·各种联用技术 | 第11页 |
| ·生物传感器 | 第11页 |
| ·超临界流体色谱技术 | 第11-12页 |
| ·薄层层析色谱法 | 第12页 |
| ·光谱分析技术 | 第12页 |
| ·免疫分析技术 | 第12-13页 |
| ·基因工程抗体 | 第13-16页 |
| ·基因工程抗体概述 | 第13-15页 |
| ·抗体种类 | 第15-16页 |
| ·噬菌体抗体库技术 | 第16-17页 |
| ·噬菌体展示技术原理 | 第16页 |
| ·辅助噬菌体应用原理 | 第16-17页 |
| ·噬菌体抗体库应用现状 | 第17页 |
| ·论文研究目的及意义 | 第17-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-43页 |
| ·材料 | 第19-25页 |
| ·实验菌种、载体及实验动物 | 第19页 |
| ·实验用工具酶及抗生素 | 第19页 |
| ·实验用试剂及试剂盒 | 第19-21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·PCR实验中用到的引物 | 第22-23页 |
| ·实验中用到的溶液及培养基的配制方法 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-43页 |
| ·合成氰戊菊酯人工免疫原和包被原 | 第25-27页 |
| ·氰戊菊酯人工免疫原免疫Balb/c小鼠 | 第27页 |
| ·提取小鼠脾脏组织总RNA | 第27-29页 |
| ·分离纯化mRNA | 第29-30页 |
| ·合成cDNA | 第30-31页 |
| ·扩增单链抗体可变区片段scFv | 第31-35页 |
| ·亚克隆实验 | 第35-37页 |
| ·构建噬菌体展示初级库 | 第37-40页 |
| ·淘选初级抗体库 | 第40-41页 |
| ·菌落PCR验证 | 第41页 |
| ·噬菌体ELISA实验 | 第41-42页 |
| ·测序 | 第42-43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-57页 |
| ·实验结果 | 第43-56页 |
| ·氰戊菊酯半抗原合成 | 第43页 |
| ·小鼠脾脏组织总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·扩增抗体片段scFv | 第44-45页 |
| ·亚克隆实验 | 第45-47页 |
| ·构建噬菌体抗体展示库 | 第47-49页 |
| ·淘选初级库 | 第49页 |
| ·菌落PCR检测输出阳性克隆 | 第49-51页 |
| ·噬菌体ELISA实验 | 第51-52页 |
| ·测序 | 第52-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 5 展望 | 第58-59页 |
| 6 参考文献 | 第59-66页 |
| 7 致谢 | 第66页 |
