摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 引言 | 第10-22页 |
·水通道蛋白基因研究进展 | 第11-16页 |
·哺乳动物的水通道蛋白基因 | 第11-12页 |
·植物的水通道蛋白基因 | 第12-13页 |
·两栖类的水通道蛋白基因 | 第13-14页 |
·鱼类的水通道蛋白基因 | 第14-16页 |
·表观遗传调控与环境压力 | 第16-20页 |
·DNA甲基化 | 第16-18页 |
·组蛋白修饰与环境压力 | 第18-20页 |
·本研究的意义 | 第20-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-36页 |
前言 | 第22页 |
·实验材料 | 第22页 |
·主要实验试剂与仪器 | 第22-24页 |
·主要试剂 | 第22-24页 |
·实验仪器 | 第24页 |
·实验方法与步骤 | 第24-34页 |
·细胞培养与观察 | 第24-25页 |
·实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第25-27页 |
·总RNA的提取与质检 | 第25-26页 |
·RNA反转录合成cDNA | 第26页 |
·引物的设计 | 第26-27页 |
·RT-qPCR法检测AQP1b的相对表达水平 | 第27页 |
·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第27-33页 |
·细胞交联 | 第27-28页 |
·优化超声体系 | 第28-30页 |
·验证染色质免疫共沉淀(ChIP)体系 | 第30-32页 |
·ChIP-qPCR法检测AQP1b基因组蛋白修饰 | 第32-33页 |
·DNA甲基化免疫共沉淀(MeDIP) | 第33-34页 |
·提取基因组DNA | 第33页 |
·MeDIP-qPCR法检测AQP1b基因DNA甲基化 | 第33-34页 |
·实验数据统计分析 | 第34-36页 |
·RT-qPCR数据分析 | 第34-35页 |
·ChIP-qPCR数据分析 | 第35页 |
·MeDIP-qPCR数据分析 | 第35-36页 |
第三章 结果与讨论 | 第36-43页 |
·细胞培养与观察 | 第36-37页 |
·AQP1b基因相对表达水平 | 第37页 |
·染色质免疫共沉淀 | 第37-40页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段大小 | 第37-38页 |
·Western blot法检测组蛋白抗原免疫原性 | 第38-39页 |
·普通PCR验证ChIP体系 | 第39页 |
·AQP1b基因在低温下的组蛋白修饰 | 第39-40页 |
·DNA甲基化免疫共沉淀(MeDIP) | 第40-41页 |
·基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
·DNA甲基化免疫共沉淀-实时定量PCR(MeDIP-qPCR) | 第41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
·ChIP的优化与体系的验证 | 第41-42页 |
·AQP1b基因与低温胁迫 | 第42-43页 |
第四章 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
致谢 | 第50页 |