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腈水解酶的制备、固定化及其应用研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第1章 绪论第10-23页
   ·腈水解酶第10-14页
     ·腈水解酶的简介第10-12页
     ·腈水解酶在有机合成中的应用第12-14页
   ·影响酶催化的重要因素第14-17页
     ·诱导剂第14-15页
     ·金属离子第15页
     ·温度和pH第15页
     ·反应介质的影响第15-17页
   ·酶分子改造第17-19页
     ·化学修饰第17-19页
     ·生物酶工程法第19页
   ·酶的共价载体固定化研究第19-21页
     ·酶的固定化方法研究第19-21页
     ·固定化酶的应用研究第21页
   ·本课题的研究意义、目的和内容第21-23页
第2章 腈水解酶的分离、纯化以及部分酶学性质研究第23-35页
   ·前言第23页
   ·实验中的材料和仪器第23-25页
     ·主要实验材料第23-24页
     ·主要仪器设备第24页
     ·培养基和缓冲液的配置第24-25页
   ·实验分析方法第25-28页
     ·氨基腈化学合成第25页
     ·底物稳定性的研究第25页
     ·Bradford法测定蛋白质含量第25-26页
     ·重组腈水解酶的诱导表达第26页
     ·腈水解酶的亲和层析纯化技术第26页
     ·SDS-PAGE蛋白电泳第26-27页
     ·酶活力测定第27页
     ·温度和pH对酶活性的影响第27页
     ·腈水解酶有机溶剂耐受性以及助溶剂浓度对酶活力的影响的研究第27-28页
     ·不同缓冲液pH值对腈水解酶立体选择性的影响第28页
   ·结果与讨论第28-34页
     ·化学合成氨基腈的稳定性研究第28-30页
     ·腈水解酶纯化结果第30-31页
     ·腈水解酶的最适反应温度和pH第31-32页
     ·腈水解酶有机溶剂耐受性及助溶剂浓度对酶活力的影响第32-33页
     ·不同缓冲液pH值对腈水解酶立体选择性的影响第33-34页
   ·本章小结第34-35页
第3章 重组菌腈水解酶的固定化研究第35-48页
   ·前言第35页
   ·实验中的材料和仪器第35-36页
     ·主要实验材料第35-36页
     ·主要实验仪器第36页
   ·实验部分第36-37页
     ·载体活化第36-37页
     ·腈水解酶的固定化的研究第37页
     ·固定化酶的酶活力测定第37页
   ·结果与讨论第37-47页
     ·腈水解酶氨基载体的固定化条件优化第37-42页
     ·腈水解酶环氧载体的固定化条件优化第42-47页
   ·本章小结第47-48页
第4章 两种载体固定化酶的酶学性质研究第48-57页
   ·前言第48页
   ·实验中的材料及仪器第48-49页
     ·主要实验材料第48页
     ·主要实验仪器第48-49页
   ·实验方法第49-50页
     ·固定化酶的最适反应温度的测定第49页
     ·固定化酶的最适反应pH测定第49页
     ·固定化酶的pH稳定性研究第49页
     ·固定化酶的热稳定性测定第49页
     ·固定化酶的甲醇耐受性研究第49页
     ·底物浓度对腈水解酶酶活力的影响第49-50页
   ·结果与讨论第50-56页
     ·两种固定化酶的最适反应温度第50-51页
     ·两种固定化酶的最适反应pH第51-52页
     ·两种固定化酶的pH稳定性研究第52-53页
     ·两种固定化酶的温度稳定性研究第53-55页
     ·两种固定化酶的甲醇耐受性研究第55页
     ·最适底物浓度的选择第55-56页
   ·本章小结第56-57页
第5章 结论与展望第57-59页
   ·结论第57-58页
   ·展望第58-59页
第6章 泥螺多糖的分离、纯化,结构鉴定及生物活性研究第59-73页
   ·前言第59页
   ·实验中的材料及仪器第59-60页
     ·主要实验材料第59-60页
     ·主要实验仪器第60页
   ·实验方法第60-63页
     ·总糖、蛋白含量、硫含量以及糖醛酸的测定第60页
     ·泥螺多糖的分离、纯化第60-61页
     ·多糖均一性以及分子量的测定第61页
     ·泥螺多糖的单糖组成测定第61页
     ·单糖的构型测定第61-62页
     ·多糖的甲基化研究第62页
     ·多糖的红外光谱分析第62页
     ·多糖的抗癌活性分析第62-63页
   ·结果与讨论第63-73页
     ·多糖的化学组成第63-64页
     ·泥螺多糖分离、纯化结果第64页
     ·多糖均一性以及分子量的测定结果第64-66页
     ·泥螺多糖的单糖组成以及单糖构型结果第66-69页
     ·多糖甲基化的结果以及硫酸根位置的分析第69-70页
     ·泥螺多糖红外光谱分析结果第70-71页
     ·泥螺多糖的抗癌活性与结构之间的分析第71-73页
参考文献第73-81页
攻读硕士学位期间发表论文第81-82页
致谢第82页

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