| 目录 | 第1-5页 |
| 英文缩略词表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 序言 | 第10-15页 |
| 1 HPSE 在肿瘤转移中的作用 | 第10-11页 |
| 2 人 HPSE 基因以及人 HPSE 蛋白结构 | 第11-12页 |
| 3 HPSE 相关抑制剂 | 第12页 |
| 4 HPSE 真核以及原核表达 | 第12-13页 |
| 5 抗 HPSE 单克隆抗体的应用以及研究现状 | 第13-15页 |
| 第一部分 HPSE 原核表达系统的构建以及表达条件优化 | 第15-40页 |
| 1 实验材料 | 第15-18页 |
| ·质粒和菌株 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·溶液配制 | 第15-17页 |
| ·主要设备 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-27页 |
| ·目的 DNA 的扩增 | 第18-20页 |
| ·原核表达载体的准备 | 第20-21页 |
| ·pET-28a(+)-HPSE 的克隆和鉴定 | 第21-24页 |
| ·重组人 HPSE 菌株的诱导表达及条件优化 | 第24-25页 |
| ·重组人 HPSE 蛋白的表达形式的确定 | 第25-26页 |
| ·重组人 HPSE 蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-38页 |
| ·人 HPSE 以及质粒相关结果 | 第27-32页 |
| ·人 HPSE 蛋白表达结果 | 第32-36页 |
| ·重组人 HPSE 纯化相关结果 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 第二部分 人 HPSE 单克隆抗体的制备 | 第40-62页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第40-43页 |
| ·实验动物 | 第40页 |
| ·实验用品 | 第40-41页 |
| ·实验仪器 | 第41页 |
| ·溶液配制 | 第41-43页 |
| 2 实验方法 | 第43-51页 |
| ·BALB/c 小鼠的免疫 | 第43-45页 |
| ·细胞融合相关物品以及细胞的准备 | 第45-46页 |
| ·细胞融合 | 第46-47页 |
| ·杂交瘤的选择与克隆化 | 第47-48页 |
| ·小鼠腹水单克隆抗体的制备 | 第48-49页 |
| ·单克隆抗体小鼠抗体亚类鉴定(捕获 ELISA 法) | 第49页 |
| ·HPSE 单克隆抗体的纯化 | 第49-50页 |
| ·HPSE 单克隆抗体亲和常数的测定 | 第50页 |
| ·HPSE 单克隆抗体特异性的鉴定[42] | 第50-51页 |
| 3 结果 | 第51-60页 |
| ·BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定抗原蛋白含量 | 第51-52页 |
| ·抗原抗体工作浓度的确定 | 第52-53页 |
| ·免疫小鼠血清效价测定 | 第53-55页 |
| ·细胞融合后生长状况 | 第55页 |
| ·杂交瘤数据统计 | 第55-56页 |
| ·阳性筛选结果 | 第56-57页 |
| ·腹水效价测定 | 第57页 |
| ·单克隆抗体小鼠抗体亚类鉴定 | 第57页 |
| ·纯化抗体浓度 | 第57-58页 |
| ·抗体亲和常数的测定 | 第58-59页 |
| ·Western Blot 检测抗体特异性结果 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |