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香菇dsRNA病毒RT-PCR检测和传播途径的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-10页
第一章 文献综述第10-20页
   ·香菇第10-11页
   ·香菇的生活史第11-12页
   ·真菌病毒第12-13页
   ·真菌病毒的影响第13-15页
     ·“致死”现象第14页
     ·“低致病”现象第14-15页
   ·食用菌病毒第15-17页
     ·双孢蘑菇病毒第15-16页
     ·平菇病毒第16页
     ·香菇病毒第16-17页
   ·食用菌病毒同寄主的关系第17页
   ·食用菌病毒的检测第17-19页
     ·dsRNA提取技术第18页
     ·酶学检测第18页
     ·RT-PCR检测第18-19页
   ·研究目的和意义第19-20页
第二章 香菇病毒dsRNA纤维素-柱式离心提取方法的建立第20-28页
   ·材料与方法第20-23页
     ·材料第20页
       ·供试菌株第20页
       ·培养基第20页
       ·主要试剂和仪器第20页
     ·方法第20-23页
       ·供试菌株的培养第20页
       ·dsRNA的传统提取法第20页
       ·dsRNA小量提取法第20-21页
       ·dsRNA纤维素-柱式离心提取法第21-22页
       ·酶解第22页
       ·RT-PCR第22-23页
       ·琼脂糖凝胶电泳第23页
       ·RT-PCR产物克隆、测序第23页
   ·结果与分析第23-27页
     ·香菇dsRNA的分离第23-25页
     ·香菇dsRNA的酶解鉴定第25页
     ·香菇病毒dsRNA的RT-PCR第25-26页
     ·RT-PCR产物序列分析第26页
     ·三种香菇dsRNA提取方法的比较第26-27页
   ·讨论第27-28页
第三章 香菇dsRNA病毒RT-PCR检测体系的建立与优化第28-34页
   ·材料与方法第28-30页
     ·材料第28页
       ·供试菌株第28页
       ·培养基第28页
       ·主要试剂和仪器第28页
     ·方法第28-30页
       ·供试菌株的培养第28页
       ·RNA提取第28-29页
       ·香菇dsRNA病毒RT-PCR检测基本反应体系第29页
       ·香菇dsRNA病毒RT-PCR检测体系条件优化第29页
       ·香菇dsRNA病毒的RT-PCR稳定性试验第29页
       ·RT-PCR产物克隆、测序第29-30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·RT体系的优化第30-31页
     ·PCR体系的优化第31-32页
     ·RT-PCR检测的稳定性第32页
     ·RT-PCR产物序列分析第32-33页
   ·讨论第33-34页
第四章 香菇dsRNA病毒传播途径的研究第34-43页
   ·材料与方法第34-36页
     ·材料第34页
       ·供试菌株第34页
       ·培养基第34页
       ·主要试剂和仪器第34页
     ·方法第34-36页
       ·孢子收集第34-35页
       ·单孢分离和鉴定第35页
       ·单孢菌株的培养第35页
       ·对峙培养及菌株纯化第35页
       ·纯化菌株的培养第35页
       ·纯化菌株SRAP分子鉴定第35页
       ·dsRNA提取第35页
       ·RNA提取第35页
       ·RT_PCR第35页
       ·RT-PCR产物克隆、测序第35-36页
   ·结果与分析第36-42页
     ·香菇单孢菌株的鉴定第36页
     ·香菇单孢菌株dsRNA的提取检测第36-37页
     ·香菇单孢菌株dsRNA的RT-PCR检测第37-39页
     ·对峙培养的结果第39-40页
     ·香菇纯化菌株的鉴定第40页
     ·香菇纯化菌株dsRNA提取检测第40-41页
     ·香菇纯化菌株dsRNA的RT-PCR检测第41-42页
   ·讨论第42-43页
第五章 后续研究设想第43-44页
   ·食用菌病毒dsRNA提取试剂盒的建立第43页
   ·香菇dsRNA病毒的传播途径研究第43页
   ·香菇dsRNA病毒可侵染性全长cDNA克隆载体的构建第43-44页
参考文献第44-50页
附录1第50-52页
致谢第52页

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