摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
·香菇 | 第10-11页 |
·香菇的生活史 | 第11-12页 |
·真菌病毒 | 第12-13页 |
·真菌病毒的影响 | 第13-15页 |
·“致死”现象 | 第14页 |
·“低致病”现象 | 第14-15页 |
·食用菌病毒 | 第15-17页 |
·双孢蘑菇病毒 | 第15-16页 |
·平菇病毒 | 第16页 |
·香菇病毒 | 第16-17页 |
·食用菌病毒同寄主的关系 | 第17页 |
·食用菌病毒的检测 | 第17-19页 |
·dsRNA提取技术 | 第18页 |
·酶学检测 | 第18页 |
·RT-PCR检测 | 第18-19页 |
·研究目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 香菇病毒dsRNA纤维素-柱式离心提取方法的建立 | 第20-28页 |
·材料与方法 | 第20-23页 |
·材料 | 第20页 |
·供试菌株 | 第20页 |
·培养基 | 第20页 |
·主要试剂和仪器 | 第20页 |
·方法 | 第20-23页 |
·供试菌株的培养 | 第20页 |
·dsRNA的传统提取法 | 第20页 |
·dsRNA小量提取法 | 第20-21页 |
·dsRNA纤维素-柱式离心提取法 | 第21-22页 |
·酶解 | 第22页 |
·RT-PCR | 第22-23页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
·RT-PCR产物克隆、测序 | 第23页 |
·结果与分析 | 第23-27页 |
·香菇dsRNA的分离 | 第23-25页 |
·香菇dsRNA的酶解鉴定 | 第25页 |
·香菇病毒dsRNA的RT-PCR | 第25-26页 |
·RT-PCR产物序列分析 | 第26页 |
·三种香菇dsRNA提取方法的比较 | 第26-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
第三章 香菇dsRNA病毒RT-PCR检测体系的建立与优化 | 第28-34页 |
·材料与方法 | 第28-30页 |
·材料 | 第28页 |
·供试菌株 | 第28页 |
·培养基 | 第28页 |
·主要试剂和仪器 | 第28页 |
·方法 | 第28-30页 |
·供试菌株的培养 | 第28页 |
·RNA提取 | 第28-29页 |
·香菇dsRNA病毒RT-PCR检测基本反应体系 | 第29页 |
·香菇dsRNA病毒RT-PCR检测体系条件优化 | 第29页 |
·香菇dsRNA病毒的RT-PCR稳定性试验 | 第29页 |
·RT-PCR产物克隆、测序 | 第29-30页 |
·结果与分析 | 第30-33页 |
·RT体系的优化 | 第30-31页 |
·PCR体系的优化 | 第31-32页 |
·RT-PCR检测的稳定性 | 第32页 |
·RT-PCR产物序列分析 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
第四章 香菇dsRNA病毒传播途径的研究 | 第34-43页 |
·材料与方法 | 第34-36页 |
·材料 | 第34页 |
·供试菌株 | 第34页 |
·培养基 | 第34页 |
·主要试剂和仪器 | 第34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·孢子收集 | 第34-35页 |
·单孢分离和鉴定 | 第35页 |
·单孢菌株的培养 | 第35页 |
·对峙培养及菌株纯化 | 第35页 |
·纯化菌株的培养 | 第35页 |
·纯化菌株SRAP分子鉴定 | 第35页 |
·dsRNA提取 | 第35页 |
·RNA提取 | 第35页 |
·RT_PCR | 第35页 |
·RT-PCR产物克隆、测序 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-42页 |
·香菇单孢菌株的鉴定 | 第36页 |
·香菇单孢菌株dsRNA的提取检测 | 第36-37页 |
·香菇单孢菌株dsRNA的RT-PCR检测 | 第37-39页 |
·对峙培养的结果 | 第39-40页 |
·香菇纯化菌株的鉴定 | 第40页 |
·香菇纯化菌株dsRNA提取检测 | 第40-41页 |
·香菇纯化菌株dsRNA的RT-PCR检测 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第五章 后续研究设想 | 第43-44页 |
·食用菌病毒dsRNA提取试剂盒的建立 | 第43页 |
·香菇dsRNA病毒的传播途径研究 | 第43页 |
·香菇dsRNA病毒可侵染性全长cDNA克隆载体的构建 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
附录1 | 第50-52页 |
致谢 | 第52页 |