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福建漳州水仙病毒病的病原鉴定及两病毒基因组全序列分析

目录第1-9页
摘要第9-10页
Abstract第10-12页
第一章 前言第12-20页
   ·水仙病毒病研究概况第12-14页
   ·侵染水仙的主要病毒研究进展第14-18页
     ·水仙花叶病毒(Narcissus mosaic virus, NMW)第14页
     ·水仙黄条病毒(Narcissus yellow stripe virus,NYSV)第14-15页
     ·水仙潜隐病毒(Narcissus latent virus,NLV)第15-16页
     ·水仙迟黄病毒(Narcissus late season yellows virus,NLSYV)第16-17页
     ·水仙退化病毒(Narcissus degeneration virus,NDV)第17-18页
     ·水仙顶端坏死病毒(Narcissus tip necrosis virus,NTNV)第18页
     ·水仙普通潜隐病毒(Narcissus common latent virus,NCLV)第18页
   ·本研究的目的和意义第18-20页
第二章 材料与方法第20-27页
   ·材料第20-21页
     ·毒源第20页
     ·供试寄主第20页
     ·菌株与质粒第20页
     ·主要试剂第20页
     ·dsRNA提取相关溶液及E.coli DH5a培养基第20-21页
   ·实验方法第21-27页
     ·接种寄主第21页
     ·电镜观察第21页
     ·血清学检测第21-22页
     ·Trizol法提取总RNA第22页
     ·dsRNA的微量提取第22-23页
     ·cDNA合成第23页
     ·PCR扩增技术第23-24页
     ·PCR产物纯化第24页
     ·分子克隆技术第24-25页
     ·序列测定及分析第25页
     ·5'-RACE技术第25-27页
第三章 福建水仙病毒病的毒源种类鉴定第27-41页
   ·材料和方法第27-28页
     ·毒源第27页
     ·引物第27页
     ·接种寄主第27页
     ·电镜观察第27-28页
     ·ELISA检测第28页
     ·RT-PCR检测第28页
   ·结果与分析第28-39页
     ·水仙病株症状第28-29页
     ·水仙汁液电镜观察第29-30页
     ·样品血清学检测第30-31页
     ·马铃薯Y病毒属(Potyvirus)病毒RT-PCR检测第31-35页
     ·水仙花叶病毒(NMV)的RT-PCR检测第35-37页
     ·水仙潜隐病毒(NLV)RT-PCR检测第37-38页
     ·水仙普通潜隐病毒(NCLV)的RT-PCR检测第38-39页
     ·水仙退化病毒(NDV)的RT-PCR检测第39页
   ·小结和讨论第39-41页
第四章 NLSYV漳州分离物(NLSYV-ZZ)的基因组全序列分析第41-51页
   ·材料和方法第41-44页
     ·毒源与dsRNA提取第41页
     ·NLSYV-ZZ基因组全长扩增引物第41页
     ·病毒基因组全长扩增策略第41-44页
     ·RT-PCR反应第44页
     ·5'-RACE第44页
     ·PCR产物回收和分子克隆第44页
     ·序列测定及分析第44页
   ·结果和分析第44-50页
     ·NLSYV-ZZ分离物基因组全序列扩增结果第44-45页
     ·序列分析第45-46页
     ·NLSYV-ZZ与Potyvirus其他病毒进化关系第46-48页
     ·NLSYV-ZZ CP蛋白和其他NLSYV分离物的进化关系第48-50页
   ·小结与讨论第50-51页
第五章 漳州水仙分离物Y13-1 3’-端基因的克隆及序列分析第51-56页
   ·材料和方法第51-52页
     ·毒源与dsRNA提取第51页
     ·分离物Y13-1 3’-端基因扩增引物第51-52页
     ·RT-PCR反应第52页
     ·PCR产物回收和分子克隆第52页
     ·序列测定及分析第52页
   ·结果与分析第52-55页
     ·RT-PCR扩增结果第52页
     ·序列分析第52-53页
     ·Y13-1与Potyvirus病毒进化关系第53-55页
   ·小结与讨论第55-56页
第六章 漳州水仙分离物ZZ-2的基因组全序列分析第56-65页
   ·材料和方法第56-57页
     ·毒源与dsRNA提取第56页
     ·分离物ZZ-2基因组全长扩增引物第56页
     ·分离物ZZ-2基因组全长扩增策略第56页
     ·RT-PCR反应第56页
     ·5'-RACE第56-57页
     ·PCR产物回收和分子克隆第57页
     ·序列测定及分析第57页
   ·结果和分析第57-63页
     ·分离物ZZ-2的初步分子鉴定第57-58页
     ·分离物ZZ-2的基因组全序列扩增结果第58页
     ·序列分析第58-61页
     ·分离物ZZ-2与Potyvirus病毒进化关系第61页
     ·水仙上分离的potyviruses间进化关系第61-63页
   ·小结与讨论第63-65页
参考文献第65-69页
附录 缩写词和英汉对照第69-70页
致谢第70页

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