| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-34页 |
| 1 哺乳动物性别控制技术的研究进展 | 第15-26页 |
| ·受精后的性别控制技术 | 第15-21页 |
| ·发育学基础 | 第15页 |
| ·遗传学基础 | 第15-17页 |
| ·胚胎水平的性别控制 | 第17-21页 |
| ·妊娠水平的性别控制 | 第21页 |
| ·受精前性别控制技术 | 第21-26页 |
| ·生殖环境干预法 | 第21-22页 |
| ·精子分离法 | 第22-26页 |
| 2 性别特异蛋白的研究进展 | 第26-33页 |
| ·精子上存在性别特异蛋白的生物学基础 | 第26-29页 |
| ·精子发生和减数分裂过程 | 第26-27页 |
| ·精子发生期间X和Y染色体上的基因表达 | 第27-28页 |
| ·精子细胞中基因表达产物的共享 | 第28-29页 |
| ·精子细胞中基因表达产物的不完全共享 | 第29页 |
| ·性别特异蛋白分离、鉴定方法研究进展 | 第29-33页 |
| ·差异蛋白的分子生物学分析技术 | 第29-31页 |
| ·差异蛋白的蛋白组学分析技术 | 第31页 |
| ·差异蛋白的免疫学检测技术 | 第31-33页 |
| 3 研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 第2章 在精液冷冻保存稀释液中添加猪精清对解冻后性控精子质量的影响 | 第34-40页 |
| 1 引言 | 第34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-38页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·实验样品的准备 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·溶液配制 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·牛性别控制细管冷冻保存精液的制作 | 第36页 |
| ·牛性别控制细管冷冻保存精液解冻后精液品质鉴定 | 第36-38页 |
| ·数据分析 | 第38页 |
| 3 结果与分析 | 第38页 |
| ·解冻后精子质量的比较 | 第38页 |
| ·性控精子冷冻保存稀释液配方的筛选 | 第38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 5 小结 | 第39-40页 |
| 第3章 精子性别特异蛋白的分离和鉴定 | 第40-60页 |
| 1 引言 | 第40页 |
| 2 材料和方法 | 第40-49页 |
| ·材料 | 第40-43页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要溶液配制 | 第41-42页 |
| ·仪器设备 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-49页 |
| ·精子蛋白的提取及浓度测定 | 第43-44页 |
| ·抗性别分离精子阳性血清的制备 | 第44-45页 |
| ·抗性控精子兔血清中交叉反应抗体免疫中和方法的优化 | 第45-46页 |
| ·精子性别特异抗体的鉴定 | 第46-47页 |
| ·精子性别特异蛋白的捕获 | 第47-48页 |
| ·精子性别特异蛋白的质谱分析 | 第48-49页 |
| ·数据分析 | 第49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-58页 |
| ·免疫后家兔血清中抗性控精子抗体水平 | 第49页 |
| ·最适免疫中和方法 | 第49-50页 |
| ·抗性控精子血清在牛未分离精子上的结合率 | 第50-51页 |
| ·抗性控精子血清在牛分离精子上的结合率 | 第51-52页 |
| ·精子性别特异蛋白的分离 | 第52-53页 |
| ·差异蛋白的鉴别 | 第53-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 5 小结 | 第59-60页 |
| 第4章 精子性别特异蛋白的验证 | 第60-80页 |
| 1 引言 | 第60页 |
| 2 材料和方法 | 第60-71页 |
| ·材料 | 第60-62页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·主要溶液配制 | 第60-62页 |
| ·仪器设备 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-71页 |
| ·AKAP4目的基因扩增产物的获得 | 第62-64页 |
| ·AKAP4表达载体的构建 | 第64-67页 |
| ·AKAP4重组蛋白的表达与纯化 | 第67-69页 |
| ·兔抗牛AKAP4蛋白抗体的制备 | 第69-70页 |
| ·AKAP4蛋白的免疫印迹分析 | 第70-71页 |
| 3 结果与分析 | 第71-78页 |
| ·RNA的质量 | 第71页 |
| ·牛AKAP4目的基因片段的特性 | 第71-72页 |
| ·pKG-AKAP4重组表达质粒的特性 | 第72-73页 |
| ·融合蛋白的表达与可溶性鉴定 | 第73页 |
| ·诱导温度对AKAP4可溶性融合蛋白表达量的影响 | 第73-74页 |
| ·时间对AKAP4可溶性融合蛋白表达量的影响 | 第74-75页 |
| ·IPTG浓度对AKAP4可溶性融合蛋白表达量的影响 | 第75页 |
| ·AKAP4可溶性重组蛋白的纯度 | 第75-76页 |
| ·兔抗牛AKAP4重组蛋白血清的抗体效价测定 | 第76页 |
| ·AKAP4性别特异性鉴定 | 第76-78页 |
| 5 结论 | 第78-80页 |
| 创新与不足 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-95页 |
| 发表的主要论文 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 附录 | 第97页 |
