| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-38页 |
| ·微孢子虫的研究现状 | 第16-27页 |
| ·微孢子虫的分类学地位及系统发育分析 | 第17-18页 |
| ·微孢子虫的生物学特性 | 第18-27页 |
| ·cDNA文库构建策略及应用 | 第27-28页 |
| ·表达序列标签(EST)的应用 | 第28-29页 |
| ·热休克蛋白HSP70的研究 | 第29-30页 |
| ·胰蛋白酶的研究进展 | 第30-31页 |
| ·柞蚕微孢子虫的研究现状 | 第31-36页 |
| ·柞蚕的微孢子虫种类 | 第32-33页 |
| ·柞蚕微孢子虫的感染途径 | 第33-34页 |
| ·柞蚕微孢子虫病检测及防治 | 第34-35页 |
| ·柞蚕微孢子虫的系统分类研究 | 第35页 |
| ·柞蚕微孢子虫基因和蛋白的研究 | 第35-36页 |
| ·本项目的目的及意义 | 第36-38页 |
| 第二章 柞蚕微孢子虫形态学与系统分类研究 | 第38-58页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·药品试剂及配置 | 第38-40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| ·试验方法 | 第40-44页 |
| ·柞蚕微孢子虫的分离及纯化 | 第40-41页 |
| ·柞蚕微孢子虫大小的测量 | 第41页 |
| ·柞蚕微孢子虫的电镜观察 | 第41-42页 |
| ·柞蚕微孢子虫感染柞蚕的感染途径推测 | 第42页 |
| ·柞蚕微孢子虫α、β、γ-微管蛋白基因的克隆 | 第42-44页 |
| ·柞蚕微孢子虫α、β、γ-微管蛋白基因序列分析 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-54页 |
| ·柞蚕微孢子虫孢子分离纯化效果 | 第44-46页 |
| ·柞蚕微孢子虫孢子大小测量及电镜观察 | 第46-48页 |
| ·柞蚕微孢子虫感染柞蚕后的丝腺、脂肪体等组织的病变 | 第48-49页 |
| ·柞蚕微孢子虫α、β、γ-微管蛋白基因的克隆 | 第49-50页 |
| ·柞蚕微孢子虫α、β、γ-微管蛋白基因的序列分析 | 第50-52页 |
| ·柞蚕微孢子虫的系统进化分析 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-58页 |
| ·柞蚕微孢子虫孢子分离纯化 | 第54-55页 |
| ·柞蚕微孢子虫孢子的形态观察和感染途径 | 第55页 |
| ·柞蚕微孢子虫的系统发育分析 | 第55-58页 |
| 第三章 柞蚕微孢子虫全长CDNA文库的构建及EST分析 | 第58-70页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·试验材料 | 第58页 |
| ·药品试剂 | 第58-59页 |
| ·主要仪器设备 | 第59页 |
| ·试验方法 | 第59-63页 |
| ·柞蚕微孢子虫的分离及纯化 | 第59页 |
| ·柞蚕微孢子虫RNA的提取 | 第59-60页 |
| ·cDNA的合成 | 第60-61页 |
| ·cDNA的纯化与酶切 | 第61-62页 |
| ·cDNA的连接与转化 | 第62-63页 |
| ·文库质量鉴定 | 第63页 |
| ·EST测序及分析 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-68页 |
| ·柞蚕微孢子虫RNA的提取 | 第63-64页 |
| ·柞蚕微孢子虫cDNA的合成鉴定 | 第64-65页 |
| ·柞蚕微孢子虫cDNA文库质量的鉴定 | 第65页 |
| ·柞蚕微孢子虫cDNA文库EST测序 | 第65-67页 |
| ·随机挑选EST的测通验证(NpSP-1基因的克隆) | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第四章 柞蚕微孢子虫孢壁蛋白NPSWP1的克隆、序列分析及原核表达研究 | 第70-87页 |
| ·材料 | 第70-73页 |
| ·试验材料 | 第70-71页 |
| ·药品试剂及配置 | 第71-72页 |
| ·主要仪器设备 | 第72-73页 |
| ·试验方法 | 第73-79页 |
| ·柞蚕微孢子虫的分离及纯化 | 第73页 |
| ·柞蚕微孢子虫RNA的提取 | 第73页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第73页 |
| ·PCR反应体系 | 第73-75页 |
| ·连接T载体并测序 | 第75-77页 |
| ·NpSWP1基因原核表达载体的构建 | 第77-78页 |
| ·NpSWP1基因的原核表达及Western-blot检测 | 第78-79页 |
| ·结果与分析 | 第79-86页 |
| ·柞蚕微孢子NpSWP1基因的克隆 | 第79-80页 |
| ·NpSWP1基因连接T载体并测序 | 第80-83页 |
| ·NpSWP1基因原核表达及检测 | 第83-86页 |
| ·讨论 | 第86-87页 |
| 第五章 柞蚕中肠APHSC70基因对微孢子虫入侵的响应研究 | 第87-97页 |
| ·试验材料与试剂 | 第87页 |
| ·试验材料 | 第87页 |
| ·试验试剂 | 第87页 |
| ·主要仪器设备 | 第87页 |
| ·试验方法 | 第87-89页 |
| ·ApHSC70基因的克隆 | 第87-88页 |
| ·ApHSC70基因的序列分析与蛋白质结构预测 | 第88页 |
| ·目的基因的qRT-PCR分析 | 第88-89页 |
| ·结果与分析 | 第89-94页 |
| ·柞蚕ApHSC70基因的克隆及序列分析 | 第89-91页 |
| ·柞蚕ApHSC70蛋白的系统进化分析 | 第91-92页 |
| ·柞蚕中肠感染柞蚕微孢子虫后ApHSC70基因的表达谱分析 | 第92-94页 |
| ·讨论 | 第94-97页 |
| 第六章 柞蚕APTP1基因感染微孢子虫后的表达谱分析 | 第97-108页 |
| ·试验材料与试剂 | 第97-98页 |
| ·试验材料 | 第97页 |
| ·试验试剂 | 第97页 |
| ·主要仪器设备 | 第97-98页 |
| ·试验方法 | 第98-100页 |
| ·ApTP1基因的克隆 | 第98页 |
| ·ApTP1基因的序列分析 | 第98页 |
| ·ApTP1原核表达载体的构建 | 第98-99页 |
| ·ApTP1融合蛋白的表达及Westren-blot检测 | 第99页 |
| ·柞蚕各发育时期及5龄幼虫各组织ApTP1基因的半定量检测 | 第99页 |
| ·柞蚕微孢子虫诱导后柞蚕中肠ApTP1基因Realtime PCR检测 | 第99-100页 |
| ·结果与分析 | 第100-106页 |
| ·ApTP1基因的克隆 | 第100页 |
| ·ApTP1基因的序列分析 | 第100-101页 |
| ·ApTP1基因的同源性比对及系统进化分析 | 第101-103页 |
| ·ApTP1基因原核表达载体的构建 | 第103-104页 |
| ·ApTP1重组蛋白的表达及Westren-blot检测 | 第104页 |
| ·ApTP1基因的半定量检测 | 第104-105页 |
| ·经微孢子虫诱导后柞蚕中肠ApTP1基因的Real-time PCR检测 | 第105-106页 |
| ·讨论 | 第106-108页 |
| 第七章 结论 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-125页 |
| 附录 | 第125-127页 |
| 致谢 | 第127-129页 |
| 攻读博士学位期间发表文章 | 第129页 |
